Минусы лада гранта: Отзывы о LADA Granta седан, плюсы и минусы Лада Гранта седан авто на сайте Autospot.ru

Джон Карни сказал, что он не в восторге от сокращения субсидий, но «[t] он получил от многих некоммерческих организаций отзывы о том, что они ценят тот факт, что это не больше. ”

Прошлые и будущие сокращения
В течение нескольких дней в конце июня и начале июля некоммерческие организации беспокоились, что ничего не получат.

Совместный финансовый комитет прекратил финансирование субсидий 28 июня, что позволило законодателям сбалансировать бюджет. Демократы и республиканцы продолжали говорить о способах поиска денег, при этом демократы надеялись оказать давление на представителей меньшинства Республиканской партии, чтобы те проголосовали за повышение налогов, чтобы восстановить некоторое финансирование.

Однако республиканцы отказались уступить, и законодательный орган вступил в новый финансовый год без соглашения о бюджете.

Некоммерческие организации провели несколько митингов в Законодательном зале в последние дни, пытаясь убедить законодателей найти способ и дальше давать им деньги.

В конце концов, Генеральная Ассамблея пришла к компромиссу, охватив субсидию в размере 80 процентов от предыдущего финансового года.

Г-жа Фредрикс, описавшая чувство себя «пешкой», пойманной в партийной политике, сказала, что отказ от безвозмездной помощи «по сути выбил меня из воды».«Хотя она приветствовала реставрацию, она сказала, что 20-процентное сокращение было больше, чем предполагалось.

Это сокращение представляет собой убыток в размере 100 000 долларов для Modern Maturity Center.

Другие были также удивлены 20-процентным поражением: г-жа Браво ожидала сокращения не более чем на 10 процентов, а Дафна Бамбри, исполнительный директор Milford Senior Center, сказала, что она почувствовала «шок и немного беспокойства», узнав бюджетной сделки.

Субсидия — не единственные государственные деньги, которые идут некоммерческим организациям: г-жаБраво сказал, что многие государственные агентства заключают контракты с некоммерческими организациями на оказание услуг.

«Когда государственное агентство сокращает расходы, часть этого может быть передана некоммерческому сообществу», — сказала г-жа Браво.

Руководители некоммерческих организаций опасаются, что в следующем году может быть то же самое.

Законодатели и губернатор предупредили, что структурное решение бюджета остается труднодостижимым и, вероятно, приведет к еще одному дефициту весной.

Финансирование в виде субсидий оставалось неизменным в течение нескольких лет до этого бюджета, что еще больше усложняло проблемы для некоммерческих групп, которым теперь поручено заниматься сокращением.

«Меры по затягиванию поясов, о которых вы могли подумать, многие из них применялись в течение последних нескольких лет», — сказал г-н Бок.

Несколько человек жаловались, что лица, принимающие решения в штате, не видят в полной мере преимуществ, которые приносят некоммерческие организации.

«Я не думаю, что они, кажется, понимают, что мы делаем для пожилых людей», — сказала Дебби Браун, директор Центра для пожилых людей Мэми А. Уоррен в Смирне. «Это не только для пожилых людей, но и для самого сообщества».

Другие говорили, что, если некоммерческие организации не смогут помочь людям, эта задача, скорее всего, перейдет к государству — возможно, с более высокими денежными затратами.

«Мы можем предоставить весь комплекс услуг, чтобы помочь людям оставаться в своих домах, активно участвовать в жизни своего сообщества, вести более долгий и здоровый образ жизни», — настаивал г-н Бок.

Поскольку некоммерческие организации часто могут полагаться на волонтеров, они могут снизить стоимость рабочей силы. По словам сторонников, организации также могут помочь в решении незначительных проблем, таких как сохранение здоровья пожилых людей, прежде чем у них появится шанс стать гораздо более серьезными.

Г-н Бок заявил, что правительство штата экономит более 100 000 долларов на каждого человека, лишенного доступа в дом престарелых в течение года, и отметил, что в прошлом году программа CHEER оказала помощь примерно 6 500 людям.

У г-жи Браво было такое же мнение.

«Это почти как хорошее бизнес-решение — инвестировать в некоммерческий сектор», — сказала она.

Обратитесь к штатному писателю Мэтту Битлу по телефону [адрес электронной почты]

Гранты — плюсы и минусы

The Graph Foundation выделяет более 5 миллионов долларов на гранты и поддержку экосистемы

С момента запуска основной сети в декабре сообщество The Graph проявило невероятную преданность делу. То, что начиналось как небольшая команда с миссией, теперь насчитывает более тысячи участников.Независимо от того, являетесь ли вы индексатором, делегатом или участником сообщества, каждый играет свою роль в децентрализованной сети.

В течение последних трех месяцев Фонд уделял особое внимание созданию благоприятной экосистемы и финансированию наиболее важных дополнений к протоколу и инструментам, полезным децентрализованным приложениям и подграфам, а также расширению сообщества. Фонд находится под надзором Совета Graph, который голосует за управление протоколом и распределение финансирования. Мы рады сообщить, что более 5 миллионов долларов было выделено на гранты, вкладчики экосистемы и вознаграждения для развития The Graph .Около 2,6 миллиона долларов было присуждено получателям грантов в первой волне, и 3 миллиона долларов были выделены для участников экосистемы на год.

Гранты 1-й волны

Мы получили более 200 соискателей грантов из более чем 10 стран. Заявки волны 1 оценивались на основе их относительной значимости и срочности, ожидаемого воздействия и отзывов сообщества. Интервью взяли более 15 экспертов в разных областях экосистемы, специализирующихся на каждой категории грантов.

Все гранты будут выплачиваться в GRT, распределяться ежемесячно или ежеквартально по мере выполнения основных этапов.Мы впечатлены масштабом приложений и размахом проектов. Если вы не получили грант в волне 1, не расстраивайтесь! Приложение всегда открыто, поэтому вы можете подать заявку в любое время и узнать больше о программе грантов здесь.

В общей сложности на гранты 1-й волны было выделено ~ 2,6 миллиона долларов, прочтите подробный список грантов и ознакомьтесь с основными моментами ниже:

Инфраструктура протокола ~ 1,2 млн долл. США

• Автоматизация Kubernetes — цепной стек (60 тыс. Долл. США)
• Абстракция Kubernetes — Easy2Stake (60 тыс. Долл. США)
• Ansible Automation — StakeMachine (15 тыс. Долл. США)
• Indexer Install Suite — Koen Verbruggen (30 тыс. Долл. США)
• Улучшения индексатора-агента — Крис Весселс (10 тыс. Долл. США)
• НИОКР по эффективности индексатора — протокол сомелье (1 млн долларов)

Инструменты ~ 650 тыс. Долл.

• Библиотека Python с подграфами — Keyko (25 тыс. Долл.)
• Прототип схемы GraphQL — Гильдия (100 тыс. Долл. США)
• Расширение запроса Chrome — Томми Чан (10 тыс. Долл. США)
• Телеграмм-бот The Graph Network — Рябина (10 тыс. Долларов)
• Панель управления Grafana — StakeMachine (30 тыс. Долл. США)
• Graphscan — Рябина (35 тыс. Долл. США)
• Graphlets — StakingFacilities (25 тыс. Долл. США)
• Панель мониторинга сети Graph — DappQuery (15 тыс. Долл. США)
• Инструменты для мониторинга и оповещения индексатора — Chainflow (30 тыс. Долл. США)
• Визуализация графической сети — Адитья Кумар Верма (5 тыс. Долларов)
• Инструмент для внешнего дизайна — частный (400 тыс. Долл. США)

Dapps и подграфы ~ 400 тыс. Долл. США

• Badgeth (75 тыс. Долл. США)
• NFT сообщества Graph — POAP (4 КБ)
• DeepWork Dapp Design (66 тыс. Долл. США)
• Destake (25 тыс. Долл. США)
• SkyDocs (15 тыс. Долл. США)
• Coinfu (15 тыс. Долларов)
• GoodGhosting (12 тыс. Долл. США)
• Протокол усреднения долларовой стоимости (15 тыс. Долл. США)
• APY.Vision (25 тыс. Долл. США)
• SimpleFi (8 тыс. Долл. США)
• PandiFi (5 тысяч долларов)
• Moonlet (30 тысяч долларов)
• Подграфы OpenSea и Cryptopunks (15 тыс. Долл. США)
• Подграфы DeFi (15 тыс. Долл. США)
• Подграф NFT (2 тыс. Долл. США)
• Антифишинговый подграф (2 тыс. Долл. США)
• Подграф DODO Dex (2 тыс. Долл. США)
• Подграф MicroDAO (3 тыс. Долл. США)

Общественное здание ~ 400 тыс. Долларов

• Академия графов (50 тыс. Долларов)
• Академия онлайн-образования для подграфов (57 тыс. Долл. США)
• Кроличья нора (50 тыс. Долл. США)
• Графтронавты (10 тыс. Долл. США)
• GRTIQ (10 тыс. Долл. США)
• Введение.Руководства для разработчиков подграфов (5 тыс. Долл. США)
• Курсы интерфейсных разработчиков (подграфы для разработчиков Web2) (20 тыс. Долл. США)
• Учебная программа Graph (2 тыс. Долл. США)
• Подкаст The Index (40 тыс. Долл. США)
• Обучающие видео на английском и русском языках (15 тыс. Долл. США)
• Образовательная карточная игра Graph (20 тыс. Долл. США)
• Разработка программы (14 тыс. Долл. США)
• Общественное здание: Индия, Китай, Япония, Вьетнам, Франция, Ближний Восток, Южная Америка, Россия (66 тыс. Долл. США)
• Пожертвование Coincenter (15 тыс. Долл. США)
• Спонсорство мероприятий ($ 53 тыс.)

Мы рады объявить о первой волне грантов The Graph.Нам не терпится увидеть, как наши грантополучатели добьются успеха и увидим, что впереди в Волне 2!

Участники экосистемы

Фонд призван выполнять роль координатора, объединяющего лучших разработчиков и ресурсы для улучшения протокола и развития экосистемы. На годовой бюджет для участников экосистемы, которые следят за долгосрочным успехом протокола, выделено ~ 3 миллиона долларов.

Исследования ~ 1,4 миллиона долларов

Фонд нанял BlockScience для моделирования динамики протокола в своей библиотеке cadCAD с открытым исходным кодом, используя реальные данные, которые были собраны в основной сети.Они начинают с моделирования рынка делегирования, где на сегодняшний день в протоколе произошла наибольшая активность. Это основано на теоретической работе, которую они проделали по формализации некоторых проблем принятия решений Indexer в прошлом году, перед запуском The Foundation.

Аналогичным образом Фонд привлек Semiotic, команду специалистов в области криптографии и машинного обучения, для разработки агентов, которые оптимизируют их взаимодействие с протоколом с помощью обучения с подкреплением (RL), того же набора методов, которые недавно использовались для обыграть лучших в мире игроков в го и совершить крупный прорыв в вековой проблеме сворачивания белка.Первоначально они сосредоточены на обучении агентов, которые будут взаимодействовать с рынком запросов и протоколом переговоров, с целью информирования о проектах будущих версий этих подсистем.

Сообщество и развитие $ 500 000 +

Graph — ничто без сообщества. Вот почему мы стремимся поддерживать всех участников сети и разработчиков подграфов на всех этапах их жизненного пути. В волне 1 мы приветствуем Джима Казинса, Indexer_Payne и Slimchance в качестве индексатора и куратора, а также Кальвина Чу, эксперта по графической области. У нас также есть много менеджеров сообщества и неофициальных создателей мемов, которые сыграли важную роль в нашем росте. Фонд также гордится тем, что работает с магазинами разработки блокчейнов, такими как Protofire, LimeChain и другими.

Операции фонда 400 тыс. Долл. США +

Фонд потратил последние несколько месяцев на подготовку и развитие команды. Цель Фонда — сотрудничать с ключевыми участниками и возглавить инициативы, чтобы наилучшим образом удовлетворить потребности экосистемы. Мы рады приветствовать в команде Алекса Яо (развитие сообщества) и Рима Чахрура (менеджер экосистемы — гранты).Однако мы по-прежнему набираем сотрудников и расширяем свою деятельность! Ознакомьтесь с нашими открытыми вакансиями, если вы заинтересованы в тесном сотрудничестве с руководителями The Graph и техническими отделами разработки продуктов.

Награды и аудит $ 500 000 +

Программа Graph Bounty действует с декабря, и за сообщения об ошибках было выплачено 10 тысяч долларов в виде вознаграждений. Мы активно ищем разработчиков и исследователей для выявления и сообщения о любых других уязвимостях, в том числе в сетевых контрактах, графическом узле, логике протокола и каналах состояний.Следуйте нашей политике безопасности для соответствующего раскрытия информации о вознаграждении: https://thegraph.com/security/.

Наконец, Фонд продолжает привлекать OpenZeppelin, Chainsafe, Consensys Diligence и другие охранные фирмы для аудита протоколов и продуктов.

Что дальше?

Волна 1 только что закончилась, и мы уже готовимся к Волне 2! Мы продолжим уделять приоритетное внимание четырем категориям, упомянутым выше, однако мы также хотели бы видеть больше предложений в отношении:

• Поддержка расширения мультиблокчейнов
• Инструменты для курирования и подграфов
• Фреймворки для тестирования подграфов
• Инструмент для статического анализа подграфов
• Стандарты Dapp и подграфов
• Репутация в сети
• Интернационализация / переводы
• Оптимизация узлов блокчейна L1
• Содержание образования и разработка учебных программ

Несмотря на то, что процесс грантов в настоящее время включает множество экспертов в предметной области, Фонд также изучает способы дальнейшей децентрализации, чтобы обеспечить более активное участие в принятии решений о финансировании.Следите за новостями о том, как сообщество может принять участие!

В промежутке между подачей заявки на следующий грант есть много дополнительных способов принять участие в The Graph Network. Вы можете стать Делегатором, Индексатором, создавать подграфы, голосовать за предстоящие предложения по управлению, варианты безграничны. Если есть какие-либо проекты, которыми вы восхищаетесь в пространстве web3, которые не используют подграфы, мы рекомендуем вам сообщить им об использовании подграфов.

О графике

График — это уровень индексации и запросов в децентрализованной сети.Разработчики создают и публикуют открытые API-интерфейсы, называемые подграфами, которые приложения могут запрашивать с помощью GraphQL. В настоящее время Graph поддерживает индексирование данных из Ethereum, IPFS и PoA, и скоро появятся новые сети. На сегодняшний день более 10 000 активных разработчиков развернули более 8000 подграфов для таких приложений, как Uniswap, Synthetix, Aragon, Gnosis, Balancer, Livepeer, DAOstack, AAVE, Decentraland и многих других.

Если вы разработчик, создающий приложение или приложение Web3, вы можете использовать подграфы для индексации и запроса данных из блокчейнов.График позволяет приложениям эффективно и результативно представлять данные в пользовательском интерфейсе, а также позволяет другим разработчикам использовать ваш подграф. Вы можете развернуть подграф или запросить существующие подграфы, которые есть в Graph Explorer.

The Graph будет рад приветствовать вас в качестве индексаторов, кураторов и / или делегатов в сети The Graph. Присоединяйтесь к сообществу The Graph, представившись в The Graph Discord для технических обсуждений, присоединяйтесь к чату The Graph в Telegram или подписывайтесь на The Graph в Twitter! Разработчики Graph и члены сообщества всегда готовы поболтать с вами, а в экосистеме Graph растет сообщество разработчиков, которые поддерживают друг друга.

Как стать рецензентом гранта

Действительно ли люди, которые рассматривают заявки на гранты, заботятся о размере шрифта, когда наука блестящая? Они действительно замечают ноутбук, который вы включили в свой бюджетный план?

Когда рецензенты собираются для оценки заявок на гранты, они обычно делают это в частном порядке, что делает эти сессии богатым источником академического фольклора. Лучший способ узнать, что такое обзорная сессия, — это самому поучаствовать в ней. Быть младшим преподавателем не должно быть препятствием.Многие организации нуждаются в рассмотрении заявок на гранты, и, приложив немного усилий, вы, вероятно, сможете найти место для работы.

Агентства обычно ищут людей, обладающих опытом в той области деятельности, которую поддержит данный раунд заявок. Однако эту область деятельности можно определить в широком смысле, поэтому не беспокойтесь о том, что не специализируетесь в одной и той же подполе, такой как органическая или аналитическая химия. Предложение по проекту в области органической химии не может быть рассмотрено группой, состоящей исключительно из химиков, не говоря уже о химиках той же специальности.Кроме того, исследования становятся все более междисциплинарными, а экспертные комиссии часто охватывают целый ряд дисциплин, а не несколько узкоспециализированных подполей.

Агентство ищет рецензентов несколькими способами. Иногда он их активно вербует. Он просматривает списки авторов статей на крупных научных конференциях или авторов недавних научных статей в данной области. Известно, что агентства находят рецензентов через поиск в Google. Кроме того, многие агентства принимают заявки на участие в рецензировании.Информация и инструменты на их веб-сайтах упростили волонтерство ваших услуг.

Рассмотрение предложений может потребовать значительного объема работы, поэтому убедитесь, что у вас есть время, прежде чем принимать приглашение выступить в качестве члена комиссии. Узнайте, сколько заявок на гранты вам придется прочитать, сколько они длятся и сколько времени у вас будет на их рассмотрение.

Важно, чтобы вы могли уделять задаче достаточно времени. Случалось ли вам когда-нибудь возвращать отзыв о своей заявке на грант, который заставлял вас думать: «Они даже не читали это»? Беглый обзор никому не помогает.Соответственно планируйте свое время.

Процесс обзора

Рассмотрение предложений осуществляется несколькими способами. В некоторых случаях агентство собирает группу рецензентов в своем офисе. Как рецензент, вы получаете пакет предложений заранее, чтобы вы могли прочитать и оценить их. Каждый рецензент, вероятно, будет нести ответственность за представление нескольких предложений комиссии в целом с рекомендацией о том, финансировать ли это. Затем вся комиссия рассматривает проект и принимает решение.

В ходе панельных дискуссий можно разработать ряд сценариев. Ведущий рецензент может поддержать предложение, но другой участник дискуссии может обнаружить проблему с его методологией или каким-либо другим аспектом проекта. В зависимости от того, насколько серьезна эта проблема — или от того, воспринимают ли ее другие участники дискуссии как проблему — предложение может быть в конечном итоге отклонено.

Иногда ведущий рецензент рекомендует отклонить проект, и в этом случае единственная надежда проекта состоит в том, что кто-то другой прочитает его и почувствует себя достаточно решительно, чтобы отстаивать его.Иногда большинство членов комиссии поддерживают предложение, но один человек категорически против него из-за недостатка, который не видят другие. Этот человек может иметь опыт в области, которой не знает никто другой. Один сильный противник может опровергнуть популярное в других отношениях предложение.

Как видите, этот процесс нелегко предсказать, и он подвержен влиянию личностей тех, кто в нем участвует. Имейте это в виду, когда в следующий раз ваше предложение будет отклонено: вероятно, оно не имело ничего общего с вами лично, а во многом связано с набором людей, работающих в этой конкретной группе.

Нельзя сказать, что рассмотрение предложения — это чисто случайная игра. В большинстве случаев невыполненные предложения просвечивают, а драндулет быстро выявляются и устраняются.

Но есть много промежуточных предложений, в которых сочетаются сильные и слабые стороны, и именно здесь происходит большая часть дебатов. А по мере того, как из-за сокращения федеральных ассигнований количество грантов становится все меньше, комиссии по обзору будут вынуждены разделять все более тонкие и тонкие волосы, чтобы принимать решения о финансировании.

На некоторых обзорных сессиях участники дискуссии остаются в своих офисах и оценивают заявки на гранты посредством конференц-связи. В других случаях они присылают свои критические обзоры. По мере сокращения бюджетов агентства ищут менее дорогие способы проведения обзоров.

Вы не заработаете много денег на рассмотрении заявок на гранты, но работа окупится. Агентство обычно покрывает ваши расходы, если вам нужно поехать на панель, и может выплатить вам небольшой гонорар.

Ценность в самом опыте.Вы увидите, что ожидается от успешных запросов на грант. Вы встретитесь с другими преподавателями, активно работающими в вашей области, и прочитаете предложения по работе в авангарде дисциплины. У вас может быть интеллектуальная дискуссия, которую многие ищут в академических кругах, но редко проводят, например, с оценкой работ и работой в комитетах.

В конечном итоге, опыт может помочь вам подготовить лучшие предложения и получить грант на свою работу.

Веб-сайты для потенциальных рецензентов

Федеральные агентства упрощают процесс добровольного рассмотрения заявок на гранты, позволяя людям регистрироваться через Интернет.На веб-сайтах агентств обычно запрашивается информация об образовании и профессиональном опыте предполагаемого рецензента, а также об области его знаний.

У Национального научного фонда есть веб-страница, на которой эксперты призываются добровольно участвовать в рассмотрении заявок на гранты. Изучите сайт, найдите сотрудника программы, который курирует гранты в вашей области знаний, и предоставьте этому человеку краткую информацию о вашем прошлом.

Национальный институт здравоохранения описывает более формальный и сложный процесс отбора рецензентов, особенно тех, которые служат в качестве постоянных, а не временных рецензентов.Подробная информация о процессе проверки доступна в Интернете вместе с информацией о выборе членов комиссии (см. Http://cms.csr.nih.gov/PeerReviewMeetings/BestPractices и щелкните «Как отбираются ученые для работы в секции исследования»).

NIH будет принимать рецензентов-добровольцев, но взгляд на его состав группы показывает, что доцентов меньшинство. Агентство предоставляет много полезной информации для новых соискателей гранта, в том числе 39-минутное видео имитационного сеанса рассмотрения заявки, известного на языке NIH как «учебный раздел».”

Другие сайты, которые следует рассмотреть:

• Система рецензирования Службы государственных исследований, образования и распространения знаний Министерства сельского хозяйства США предлагает рецензентам онлайн-инструменты для обновления своей личной информации и отправки рецензий.

• Управление послесреднего образования Министерства образования США называет свою базу данных рецензентов системой Field Reader или FRS. «Полевой читатель» — это еще одно название рецензента.

• Национальный фонд гуманитарных наук ведет базу данных PRISM, содержащую потенциальных рецензентов и экспертов.

Найдите на веб-сайтах других агентств имена сотрудников программ в интересующей вас области и их контактную информацию.

Первые шаги

Когда вы впервые участвуете в рассмотрении, попробуйте записать свою реакцию на предложения. Например, вы с тревогой смотрите на большую стопку приложений и задаетесь вопросом, как вы их все обработаете? Вас раздражает то, что заявитель включил письма поддержки, когда в инструкциях прямо сказано не делать этого? Как вы относитесь к этой опечатке в абстракции?

Это те вещи, которые проходят через головы и других рецензентов, включая людей, просматривающих ваши собственные предложения.В следующий раз, когда вы напишете его, просмотрите свои заметки, чтобы напомнить себе, что нельзя делать то, что отвлекает от проекта.

Также, просматривая предложения, обратите внимание на то, что вас впечатляет. Возможно, предложение включает в себя график завершения проекта, который легко понять с первого взгляда. Запишите этот формат, если вам нужно составить расписание для собственного проекта.

Если вы не можете рассмотреть предложения федерального агентства, поищите местные возможности.Ищите программы кампуса, которые предоставляют небольшие гранты студентам или профессорам для исследований или других типов проектов. Простое принятие мышления рецензента очень поможет в написании вашего собственного предложения. Хотя вы не узнаете об ожиданиях ученых от вашей дисциплины, вы сможете наблюдать за динамикой экспертной комиссии, что само по себе ценно.

Вы можете засвидетельствовать силу, которую сильный сторонник или противник конкретного предложения может иметь в группе. Вы можете увидеть в действии кого-то, кто орлиным глазом относится к бюджету — кажется, что в каждой толпе найдется один, независимо от того, насколько мало денег задействовано.

И тогда вы сможете отделить академический миф от реальности.

Карен М. Маркин — директор по развитию исследований в исследовательском офисе Университета Род-Айленда.

Руководители США обеспокоены слабостями студентов в области математики и естественных наук

Билл Гейтс, председатель гигантской корпорации Microsoft, говорит, что он немного «напуган» этим. Конгрессмен Вернон Дж. Элерс из штата Мичиган заявляет, что кризис постоянно ухудшается. Деловой круглый стол утверждает, что Соединенные Штаты не могут дождаться еще одной проблемы, такой как запуск Советским Союзом спутника «Спутник», прежде чем страна начнет работать над этим.

То, что беспокоит их и других национальных деловых и политических лидеров, так это способность школ США стимулировать интерес учащихся к математике и естественным наукам — область слабости, которая, по их словам, привела к растущему влиянию азиатских стран, в первую очередь Индии и других. Китай, в области техники и технологий.

Другие тем временем задаются вопросом, похожи ли эти опасения на те, которые возникли в начале 1980-х годов, когда многие видные американцы били тревогу по поводу подъема Японии в мировой экономике.Отчет о водоразделе 1983 года A Nation at Risk в некотором смысле был прямым следствием таких опасений. Он предупредил о том, что «образовательные основы нашего общества … подорваны нарастающей волной посредственности, которая угрожает самому нашему будущему как нации и народа», и поднял призрак того, что другие страны могут сравниться с Соединенными Штатами и превзойти их.

Некоторые наблюдатели заявили, что сегодняшние опасения по поводу того, что сокращение числа выпускников инженерных специальностей представляет угрозу для американского руководства, могут быть преувеличенными.

«Когда я сравниваю наши средние школы с тем, что я вижу, когда путешествую за границу, я боюсь за нашу рабочую силу завтрашнего дня».

— Билл Гейтс, председатель, Microsoft Corp.

«Экономию кричат ​​не инженеры», — Дэвид С.Берлинер, профессор педагогического лидерства и политических исследований в Университете штата Аризона в Темпе, написал по электронной почте. «Это налоговая политика, предпринимательская среда, отсутствие взяток, разумные налоговые ставки, инвестиции в инфраструктуру, такие как дороги, например».

Нет корреляции между успеваемостью в школе и экономической мощью в промышленно развитых странах, добавил он. «Эта корреляция сильна в слаборазвитых странах. Мы не должны путать эти два понятия », — сказал г-н Берлинер, чья книга 1995 года Искусственный кризис: мифы, мошенничество и нападение на государственные школы Америки , написанная в соавторстве с Брюсом Дж.Биддл утверждал, что политики искажают реальность, когда делают выводы об образовании в США на основе международных сравнений успеваемости учащихся.

Но те, кто говорит, что кризис действительно реальный, предупреждают, что без более сильной подготовки студентов по математике и естественным наукам Соединенные Штаты не смогут быть конкурентоспособными в глобализированном мире.

«Работа будущего потребует базового понимания принципов математики и естественных наук. Если мы не сможем дать образование нашим детям, они не получат достойной работы, и я говорю не только об ученых и инженерах », — сказал г-н.- сказал Элерс.

Международные тесты

Среди наиболее часто упоминаемых примеров недостаточного уровня образования в США — результаты исследования тенденций в международной математике и естествознании, которое в течение многих лет обнаруживало, что американские старшеклассники успевают на более низком уровне, чем их сверстники в других развитых странах.

Некоторые обозреватели международного образования говорят, что сравнение Соединенных Штатов с зарубежными странами на основе таких результатов тестов не всегда может привести к точным предположениям.

«Критическая ситуация в области американских инноваций угрожает подорвать наш уровень жизни дома и наше лидерство в мире. мы не можем дождаться следующего спутника, который продвинет нашу энергию вперед в этой области ».

— Джон Кастеллани, президент Делового круглого стола

«В разных странах учащимся задают ряд вопросов, не связанных с тем, чему их учат в школе», — сказала Элизабет Лью, старший советник по вопросам образования Академии развития образования, базирующейся в Вашингтоне группы, которая работает. образовательные программы за рубежом.«Это чье-то представление о том, что должны знать студенты определенного уровня. Всегда есть такая проблема с международными оценками, и в конечном итоге они так или иначе оказываются несправедливыми ».

Но г-жа Леу указала на исследование видеозаписи в классе TIMSS, которое, по ее мнению, действительно проливает свет. Он изучил классы в Японии, Германии и США и обнаружил, что в Японии учителя дают ученикам время поразмышлять над проблемой и развить четкое понимание основных математических концепций.В Соединенных Штатах учителя быстро вмешивались и диктовали процедуры, которые помогли ученикам их решить.

«Это одна из самых важных вещей, о которых я думаю, когда я думаю о среднем образовании здесь, особенно о естественных науках и математике, и о том, что мы довольно плохо сравниваемся со многими другими великими странами», — сказала г-жа Леу.

Пробуждение

В последние годы был запущен ряд инициатив, направленных на то, чтобы изменить позицию США в подобных вопросах. К ним относятся фракция Конгресса по науке, технологиям, инженерии и математике, сформированная для поддержки этих областей обучения.Кроме того, некоторые штаты потребовали, чтобы учащиеся изучали математику в старших классах школы. А с учетом того, что в соответствии с Федеральным законом «Ни одного отстающего ребенка» сосредоточено внимание на тестировании по математике, а теперь и естественным наукам, школы были вынуждены уделять этим предметам больше внимания.

Также указали на неквалифицированных учителей из-за отсутствия у американских студентов знаний и интереса к математике и естественным наукам. По оценкам Управления по политике в области науки и технологий Белого дома, половина школьников, изучающих физику в Соединенных Штатах, обучаются «вне поля».

«Есть кризис, и он неуклонно ухудшается … Если мы не сможем дать образование нашим детям, они не получат достойной работы, и я говорю не только об ученых и инженерах».

— Вернон Дж. Элерс, представитель США R-Mich.

Чтобы повысить уровень знаний учителей в этих областях, U.S. Министерство образования предоставляет гранты Партнерства по математике и естествознанию. Вариант Закона о высшем образовании, который сейчас ожидает повторного утверждения в Конгрессе, направлен на увеличение грантов для студентов педагогических колледжей, которые изучают математику и естественные науки.

Г-н Элерс, который в прошлом году вместе с конгрессменом Марком Удаллом, штат Колорадо, организовал собрание по науке, технологиям и математике, или STEM, говорит, что проблема низких достижений в математике и естественных науках не решается. долгое время, но только недавно попал в заголовки.

«Когда я начал говорить об этом в 1996 году, едва ли нашлось лицо, которое меня слушало», — сказал он. «Сегодня почти везде читаю об этом. … Нам потребовалось время, чтобы проснуться ».

Самая поразительная статистика, показывающая, насколько далеко могут быть Соединенные Штаты, помимо посредственных результатов американских студентов на международных тестах, — это количество тех, кто набирает инженеров в колледжах.

Деловой круглый стол, базирующаяся в Вашингтоне коалиция ведущих США.S. corporations в июле выпустили план действий по ускорению успеваемости студентов в области математики, естественных наук, технологий и инженерии с целью удвоить количество выпускников инженерных специальностей в течение следующих 10 лет. По данным группы, количество студентов в Соединенных Штатах, планирующих получить инженерное образование, сократилось на треть в период с 1992 по 2002 год. («Business Coalition Focuses on Math, Science Careers», 10 августа 2005 г.)

Последний В год в США было произведено 60 000 инженеров, в то время как в некоторых отчетах говорится, что Китай произвел миллион.Более того, согласно отчету Business Roundtable, половина докторантов, окончивших инженерные колледжи в США, являются иностранными гражданами.

Г-н Элерс сказал, что успех Китая стал результатом многолетней упорной работы.

«Люди думают, что китайцев и индийцев нанимают, потому что это дешевле, но обе страны приложили усилия для обучения людей в течение последних двух десятилетий, и это приносит свои плоды», — сказал он.

Но г-н Берлинер говорит, что, хотя может быть некоторый незначительный и краткосрочный дефицит в количестве выпускников инженерных специальностей, «на самом деле мы, возможно, сейчас производим слишком много выпускников колледжей для экономики.

Министерство труда США заявляет, что наибольшим спросом будут пользоваться такие должности, как уборщики, медицинские работники на дому, продавцы и официанты.

«Таким образом, Китаю и Индии могут потребоваться [инженеры] для разработки, и иногда нам может потребоваться украсть лучших из них для нашей собственной промышленности, но суть в том, что у нас не так уж и мало этих типов, учитывая потребности экономики в них », — заявил г-н Берлинер.

Начало в начале

Чтобы быть действительно эффективными, инициативы по развитию интереса к математике и естественным наукам должны начинаться еще в детском саду, по словам г-на.Элерс, физик по профессии. «Дети, поступающие в первый класс, очень любопытны. … Им нравится математика и естественные науки на этом уровне », — сказал он, отметив, что результаты тестов подтверждают это. «Мы выше среднего в 4 классе, в среднем в 8 классе и ниже среднего в 12 классе. К тому времени, когда ученик заканчивает среднюю школу, он не интересуется математикой и естественными науками, если он действительно не посвящен».

За последнее время студенты из США показали некоторый прогресс на нескольких национальных тестах. Например, старшеклассники в 2005 году показали рекордный результат SAT по математике.Согласно последней Национальной оценке успеваемости в образовании, 9–13-летние дети достигли наибольших успехов в математике за всю историю, хотя успеваемость 17-летних оставалась в основном неизменной.

Кэти Л. Сили, президент Национального совета учителей математики, базирующегося в Рестоне, штат Вирджиния, сказала, что, когда ученики не любят математику и не занимаются ею, меньше учителей привлекают к этой области. «Но есть и обратная сторона медали», — сказала она. «По мере того, как мы делаем лучшую работу по привлечению большего количества людей с математическим образованием в учебный пул, они могут стимулировать успехи учащихся лучше, чем мы могли бы это сделать в противном случае.”

Департамент образования предоставляет штатам гранты в рамках Партнерства по математике и естествознанию для повышения уровня знаний и преподавательских навыков классных учителей. В 2004 году департамент выделил 146 миллионов долларов такой помощи.

Национальный научный фонд также финансирует проекты, которые улучшают успеваемость учащихся по математике и естественным наукам.

Суреш Наир, профессор инженерных наук Университета Миссури-Колумбия, получил в прошлом году премию NSF в размере 1,2 миллиона долларов за проект, реализуемый для учащихся средних классов.

В рамках программы «Инженерия для K-12» аспиранты-инженеры вместе с учителями средних школ работают с учениками 6–9 классов в трех соседних округах, обучая их «мыслить как инженеры».

Г-н Наир сказал, что программа помогает научить детей смотреть на каждую проблему, с которой они сталкиваются в классе, с точки зрения инженера, используя такие приспособления, как роботы Lego. Учащиеся создают роботов, а затем программируют их для выполнения заданий.

Поскольку существует так много интересов, например видеоигры, которые конкурируют за внимание детей, г-н.Наир сказал: «Нам нужно волновать учащихся в том возрасте, когда их ничто [академическое] не волнует».

В докладе Business Roundtable отмечается, что финансирование фундаментальных исследований в области физических наук в процентах от валового внутреннего продукта США сократилось вдвое с 1970 года. Эту ситуацию необходимо исправить, если страна хочет добиться какого-либо реального прогресса в предотвращении Международный конкурс, утверждает г-жа Сили из NCTM.

«Нам необходимо инвестировать в фундаментальную науку и исследования по всем направлениям, а также в систему образования, основанную на высоких ожиданиях студентов, изучающих математику и естественные науки», — сказала она.«Если мы решим пойти по этому пути, у нас будет возможность быть конкурентоспособными на международном уровне».

Динамическая структурная биология на основе FRET: проблемы, перспективы и призыв к практикам открытой науки

Понимание того, как биомолекулы соединяют структурную динамику с функцией, лежит в основе нескольких дисциплин и остается выдающейся целью биологии. Связывание конформационных состояний и их переходов с биохимической функцией требует способности точно определять структуру и динамику биологической системы, которая часто изменяется при связывании лиганда или находится под влиянием химических и физических свойств окружающей среды.Наиболее хорошо зарекомендовавшие себя инструменты структурной биологии предоставили с высоким разрешением «снимки» состояний в кристаллизованной или замороженной форме (например, рентгеновская кристаллография и криоэлектронная микроскопия одиночных частиц, криоЭМ) или усредненное по ансамблю всех конформаций. (например, ядерный магнитный резонанс, ЯМР; малоугловое рассеяние рентгеновских лучей, МУРР; малоугловое рассеяние нейтронов, МУРН; двойной электронно-электронный резонанс, DEER; сшивающая масс-спектрометрия, XL-MS; ансамбль-FRET). В последние годы дальнейшие разработки позволили этим традиционным структурным инструментам обнаруживать конформационную динамику и промежуточные продукты реакции.Например, методы ЯМР (Anthis and Clore, 2015; Clore and Iwahara, 2009; Palmer, 2004; Ravera et al., 2014; Sekhar and Kay, 2019) и методы электронного парамагнитного резонанса (Jeschke, 2018; Jeschke, 2012; Krstić). et al., 2011) были продвинуты для изучения конформационной динамики и захвата временных промежуточных соединений. Кристаллографические исследования с временным разрешением использовались для определения функционально значимых структурных смещений, связанных с биологической функцией (Kupitz et al., 2014; Moffat, 2001; Schlichting et al., 1990; Шлихтинг и Чу, 2000; Schotte et al., 2003). Достижения в микрожидкостных устройствах для смешивания и распыления позволили использовать криоЭМ с временным разрешением (Feng et al., 2017; Kaledhonkar et al., 2018) и масс-спектрометрию с поперечными связями (XL-MS или CL-MS) (Braitbard et al., 2019 ; Brodie et al., 2019; Chen et al., 2020; Iacobucci et al., 2019; Murakami et al., 2013; Славин, Калисман, 2018). Прогресс в вычислительных методах также предоставил новые инструменты для изучения биомолекулярной структуры и динамики. Каждое из этих достижений подчеркивает возросшее понимание того, что необходимо напрямую и непрерывно отслеживать динамические свойства отдельных биомолекул, чтобы понять их функции и регуляцию.

В этом контексте FRET (называемый резонансным переносом энергии флуоресценции или резонансным переносом энергии Фёрстера [Braslavsky et al., 2008]) исследования на ансамблевом и одномолекулярном уровнях стали важными инструментами для измерения структурной динамики по крайней мере на протяжении 12 порядков величины во времени и картирование конформационных и функциональных неоднородностей биомолекул в условиях окружающей среды. FRET изучает затухание флуоресценции на уровне ансамбля (Grinvald et al., 1972; Haas et al., 1975; Хаас и Стейнберг, 1984; Hochstrasser et al., 1992) (FRET с временным разрешением) позволили уже в начале 1970-х годов изучать структурные неоднородности во временных масштабах, превышающих время жизни флуоресценции (несколько нс). Этот подход используется до сих пор (Becker, 2019; Orevi et al., 2014; Peulen et al., 2017) и перенесен в исследования одиночных молекул. Возможность измерения FRET в отдельных молекулах (Deniz et al., 1999; Ha et al., 1996; Lerner et al., 2018a) сделала этот метод еще более привлекательным.Подход одномолекулярного FRET (smFRET) широко используется для изучения конформационной динамики и биомолекулярных взаимодействий в стационарных условиях (Dupuis et al., 2014; Larsen et al., 2019; Lerner et al., 2018a; Lipman et al. ., 2003; Margittai et al., 2003; Mazal and Haran, 2019; Michalet et al., 2006; Orevi et al., 2014; Ray et al., 2019; Sasmal et al., 2016; Schuler et al., 2005; Schuler et al., 2002; Steiner et al., 2008; Zhuang et al., 2000). Примечательно, что во многих механистических исследованиях достаточно использовать FRET для различения различных конформаций и определения кинетических скоростей, так что абсолютные эффективности FRET и, следовательно, расстояния не нужно определять.Однако возможность точного измерения расстояний и кинетики с помощью smFRET привела к его появлению в качестве важного инструмента в эту новую эру « динамической структурной биологии » для картирования биомолекулярных неоднородностей и для измерения структурной динамики в широком диапазоне временных масштабов (Lerner et al., 2018a; Mazal, Haran, 2019; Sanabria et al., 2020; Schuler, Hofmann, 2013; Weiss, 1999).

Одномолекулярный FRET (smFRET) имеет много преимуществ в качестве метода структурной биологии, в том числе:

• чувствительность к макромолекулярным расстояниям (2.5–10 нм),

• способность разрешать структурные и динамические неоднородности,

• высококачественные измерения с низким потреблением образцов интересующих молекул (низкие концентрации и низкие объемы), поскольку образец анализируется по одной молекуле за раз,

• определение структурных переходов в равновесии, следовательно, без необходимости синхронизации,

• возможность обнаруживать (очень) редкие события.Действительно, в биологии наиболее интересными молекулами для изучения часто являются редкие, функционально активные молекулы среди моря неактивных молекул,

• высокая чувствительность и специфичность для меченых молекул. Поскольку только меченая молекула вносит уникальный вклад в детектируемый сигнал, эти индикаторы также могут применяться в качестве FRET-репортеров в тесноте (Dupuis et al., 2014; Soranno et al., 2014; Zosel et al., 2020b) (отсюда smFRET может использоваться для проверки результатов, полученных изолированно, или обнаружения модуляции конформационных предпочтений и / или структурной динамики посредством так называемых пяти взаимодействий [Guin and Gruebele, 2019]), и

• высокая специфичность в отношении остатков / доменов за счет специфического мечения.Биомолекулы могут быть специально помечены уникальной парой красителей, что позволяет проводить измерения smFRET для всех размеров молекул, включая большие сложные сборки (см. Рисунок 1 [Kilic et al., 2018]), активные биологические машины (например, рибосомы) ( Dunkle et al., 2011) и даже на целых нативных вирионах (Lu et al., 2019; Munro et al., 2014).

Рабочий процесс моделирования динамических структур по измерениям FRET.

( A ) Интеграционное моделирование требует структурной и динамической информации. Предварительная информация из традиционных подходов (рентген, ЯМР, криоЭМ) вместе с вычислительными инструментами определяет пространство возможных решений для структурного моделирования с помощью FRET. Комбинация структурной (расстояния между красителями) и динамической информации (кинетическая связь и обменные курсы) позволяет идентифицировать непротиворечивую модель. ( B ) Изучение структуры и динамики хроматиновых волокон.Комбинированное TIRF и конфокальное FRET исследование структуры и динамики хроматиновых волокон с использованием трех позиций маркировки FRET (DA1-3) для двух пар красителей с различными расстояниями Ферстера. Расстояния Фёрстера (определены в разделе Расстояния между красителями, уравнение 6). Предварительная структурная информация, полученная с помощью криоэлектронной микроскопии (вверху слева) (Song et al., 2014) и рентгеновской кристаллографии (вверху, справа PDB ID: 1ZBB Schalch et al., 2005), объединена со структурной и динамической информацией. полученные в результате экспериментов FRET на иммобилизованных молекулах, измеренных с помощью микроскопии полного внутреннего отражения (TIRF), и на свободно диффундирующих молекулах с помощью конфокальной микроскопии (Kilic et al., 2018). На основе объединенной информации получена согласованная модель конформаций хроматиновых волокон со смещенными регистрами, которые связаны медленными (> 100 мс) и быстрыми процессами декомпакции (150 мкс), которые протекают не напрямую, а через открытое волокно. конформация. Рисунок 1B был воспроизведен с рисунков 1, 3 и 6 в Kilic et al., 2018, Nature Communications с разрешения, опубликованном под Международной общественной лицензией Creative Commons Attribution 4.0 (CC BY 4.0; https: // creativecommons.org / licenses / by / 4.0 /).

© 2018, Kilic et al. Панель B была воспроизведена с рисунков 1, 3 и 6 в Kilic et al., 2018 с разрешения, опубликованного в соответствии с Международной общественной лицензией Creative Commons Attribution 4.0.

Несколько методов были использованы для определения структурных ансамблей, таких как ЯМР, одночастичная криоЭМ или XL-MS, а недавно также smFRET в интегративном / гибридном (I / H) подходе с компьютерным моделированием для преодоления разреженности экспериментальных данных. относительно атомистического описания (Берман и др., 2019; де Соуза и Пикотти, 2020; Димура и др., 2020; Gauto et al., 2019; Кукос и Бонвин, 2020; На и Пэк, 2020; Тан и Гонг, 2020; Webb et al., 2018). Структурные модели I / H, полученные из экспериментов smFRET с использованием расстояний между красителями в качестве ограничений, были описаны для гибких свернутых белков (Brunger et al., 2011; Hellenkamp et al., 2017; Margittai et al., 2003; McCann et al., 2012). ), конформационные ансамбли неупорядоченных / неструктурированных и развернутых белков (Borgia et al., 2018; Holmstrom et al., 2018; Schuler et al., 2020), нуклеиновые кислоты и комплексы белок-нуклеиновая кислота (Craggs et al., 2019; Craggs, Kapanidis, 2012; Kalinin et al., 2012; Lerner et al., 2018b; Muschielok et al., 2008). ; Возняк и др., 2008).

Еще одним уникальным аспектом исследований smFRET является то, что структурная, кинетическая и спектроскопическая информация о больших и сложных системах может быть записана одновременно в одном измерении. Это облегчает объединение динамической и структурной информации в интегративный подход к (рис. 1A) (Hellenkamp et al., 2017; Килич и др., 2018; Ли и др., 2020b; Санабрия и др., 2020; Вассерман и др., 2016; Янез Ороско и др., 2018):

• определяет количество возможных структур, согласующихся с данными,

• потенциально снижает неоднозначность между различными структурными моделями, совместимыми с экспериментальными данными, а

• раскрывают структурно разрешенные пути динамического обмена.

В качестве примера на рисунке 1B показан результат мультимодального исследования smFRET конформационного ландшафта 12-мерного массива хроматина (~ 2.5 MDa) (Kilic et al., 2018) с динамикой, происходящей во временных масштабах от наносекунд до часов. SmFRET эксперименты могут обнаруживать гибкие конформации хроматина (рис. 1B, средняя панель), показывая их динамическую структурную неоднородность (рис. 1B, нижняя панель), в отличие от хорошо упорядоченных статических структур хроматиновых волокон (рис. 1B, верхняя панель). Эти гибкие, частично открытые и открытые конформации, которые довольно многочисленны в растворе (популяция> 70%; рис. 1B, нижняя панель), не были разрешены ранее, хотя они необходимы для правильной организации и функции гена.Они представляют собой центральный узел взаимопревращений для отдельных регистров стэкинга хроматина и их трудно обнаружить с помощью других структурных методов. Такой подход к визуализации биомолекул в действии в условиях окружающей среды подчеркивает важность их динамической природы, разрешая переходы между различными конформационными состояниями, что во многих случаях способствует их функции (Aviram et al., 2018; Henzler-Wildman et al., 2007; Iljina et al., 2020; Lerner et al., 2018b; Sanabria et al., 2020; Tassis et al., 2020).

SmFRET обычно выполняются с использованием двух подходов: с использованием иммобилизованных на поверхности молекул с использованием флуоресцентной микроскопии полного внутреннего отражения (TIRFM) и обнаружения на основе камеры или со свободно диффундирующими молекулами в растворе с использованием конфокальной микроскопии и точечных детекторов. Экспериментальные системы доступны в продаже, но, как правило, их изготавливают самостоятельно. Образцы готовятся, а данные собираются с использованием специальных лабораторных протоколов, где данные хранятся в различных форматах файлов и анализируются с использованием набора все более мощного программного обеспечения.Для полевых исследований в целом и для структурных исследований в частности важно продемонстрировать, что smFRET как метод воспроизводим и надежен независимо от того, где и как измеряется образец. С этой целью под руководством Торстена Хугеля двадцать лабораторий объединились для измерения smFRET на нескольких конструкциях дцДНК (Hellenkamp et al., 2018a). Изучая шесть различных образцов с разными красителями и различными расстояниями между красителями, средняя эффективность FRET, полученная участвующими лабораториями, показала удивительно высокую степень согласия (ΔE между 0.02 и 0,05 в зависимости от деталей образца). Количественная оценка и воспроизводимость измерений smFRET на основе интенсивности и обсуждение анализа данных стали важной вехой. Эти стандарты дцДНК FRET теперь доступны для ежедневной калибровки и особенно полезны для новых групп, присоединяющихся к сообществу.

Вдохновленный идеями, полученными в ходе вышеупомянутой попытки FRET (Hellenkamp et al., 2018a), были начаты новые многолабораторные слепые исследования.Следующее сравнительное исследование FRET, проведенное Thorben Cordes, исследует надежность и надежность экспериментов smFRET с белками, претерпевающими лиганд-индуцированные конформационные изменения (Gebhardt et al., В стадии подготовки). В этом исследовании используются два различных модельных белка для оценки воспроизводимости и точности smFRET на основе белков для измерения расстояния между красителями. Белковые системы ставят новые задачи, включая статистическую маркировку красителей, специфические для сайта свойства красителей, стабильность белков, транспортировку, хранение и конформационную динамику.Следовательно, в исследовании также оценивается способность smFRET обнаруживать и количественно оценивать динамику в различных временных масштабах от микросекунд до секунд. Еще одна задача FRET, инициированная Соней Шмид, — это программа kinSoftChallenge (http://www.kinsoftchallenge.com, Götz et al., В стадии подготовки), которая оценивает существующие инструменты для извлечения кинетической информации из временных траекторий одиночных молекул. Эта задача направлена ​​на: (1) продемонстрировать способность кинетического анализа на основе smFRET точно выводить динамическую информацию и (2) предоставить сообществу средства оценки различных доступных программных инструментов.

Одним из важных результатов различных исследований FRET в нескольких лабораториях было то, что, хотя согласие было хорошим, его можно было улучшить еще больше. В частности, анализ данных и, в частности, исправления могут повлиять на определенную эффективность FRET и результирующие расстояния. Следовательно, открытое обсуждение того, какие подходы работают наиболее надежно, при каких условиях необходимо. Доступ к первичным данным и возможность их обработки с помощью различных подходов к анализу были и останутся наиболее прозрачным способом продвижения вперед в этой области.В настоящее время это сложно, учитывая множество вариантов используемых методов, их документации, форматов файлов и экспериментальных процедур, применяемых в разных лабораториях, для установления оптимальных условий, рабочего процесса и передовых практик даже для существующих, хорошо протестированных методов, поскольку сравнение этих методов затруднительно. требует много времени, а необходимая информация во многих случаях недоступна. С расширением открытых научных практик и представлением опубликованных данных в репозитории необходим консенсус в отношении того, какие данные и метаданные следует хранить и в каких возможных форматах, чтобы их могло легко использовать сообщество.

В связи с этими соображениями и множеством возможностей для роста сообщества smFRET, несколько лабораторий, обладающих опытом в FRET, без претензии на исчерпывающий или исключительный характер, собрались, чтобы поддержать эти усилия и предложить шаги по организации сообщества вокруг последовательной и открытой науки. практики. Это действие переводится в общие методологические рекомендации или предложения, которые мы представляем после типичного рабочего процесса эксперимента smFRET, включая подготовку и определение характеристик образцов, описание установки, сбор и сохранение данных, а также анализ данных.Эти рекомендации о том, как «практиковать» smFRET, являются не попыткой систематизировать сообщество, а скорее первоначальным предложением, которое направлено на поощрение открытого диалога о существующих практиках в нашей области и приводит к более высокой воспроизводимости результатов экспериментов smFRET. Затем мы обсуждаем практику открытой науки, а также первые шаги, которые были предприняты для формирования международного сообщества FRET. В завершение мы выделим несколько областей, в которых smFRET окажет большое влияние в различных областях науки в ближайшем будущем.

владельцев кинотеатров обеспокоены тем, что SBA борется с программой помощи Covid-19 — крайний срок

Закрытие Pacific Theaters и ArcLight, возможно, стало тревожным сигналом в связи с ужасным состоянием выставки из-за пандемии коронавируса, но владельцы кинотеатров особенно расстроены, встревожены и обеспокоены тем, что подписанная правительственная линия спасения до сих пор изо всех сил пыталась встать и работать.

Грант для операторов закрытых площадок (SVOG), как известна программа Ассоциации малого бизнеса, должен был начать прием заявок на прошлой неделе, более чем через три месяца после того, как 15 миллиардов долларов были первоначально выделены в рамках программы помощи в связи с коронавирусом в конце года. упаковка.

Но технические сбои вынудили SBA закрыть портал, пока не известно, когда он снова заработает.

Существует также путаница в процессе подачи заявок, озабоченность по поводу отсутствия адекватного персонала для надзора за ней и беспокойство, что в противном случае подходящие кандидаты будут ошибочно отклонены, что еще больше задержит приток денежных средств для предприятий, которые были закрыты более года в некоторые штаты.

Связанная история

Китайский театр TCL открывается вовремя для шоу Godzilla Vs.Kong ‘- обновленное издание L.A. Exhibition Rundown

«А нужно ли это нашей компании? Да, это нужно нашей компании. Нам это очень нужно », — сказал Билл Барстоу, генеральный директор Main Street Theaters в Омахе, штат Северная Каролина. «Мы должны заботиться о наших банках, мы должны заботиться о наших арендодателях». Кредиторам были даны гарантии, что помощь будет получена за счет государственных субсидий, но «постоянно объяснять и оправдываться, когда это произойдет, — сложно», — сказал он.

Национальная ассоциация владельцев театров, главная лоббистская организация экспонентов, проводила регулярные телеконференции Zoom для потенциальных претендентов, пытаясь проинформировать их о ситуации, но пока нет точной даты, когда будет продолжен процесс подачи заявок.

В понедельник два главных соавтора законодательства Сената, сенатор Эми Клобучар (D-MN) и сенатор Джон Корнин (R-TX), вместе с другими членами планируют отправить письмо администратору SBA Изабелле Гусман , прося ее предоставить обновления и график запуска программы.

«С каждым днем ​​все больше независимых предприятий вынуждены закрыться навсегда или объявить о банкротстве. Арендодатели и банки больше не разрешают отсрочки и требуют немедленных выплат по просроченным счетам; предприятия получают уведомления о выселении; семейные предприятия вынуждены продавать », — написали они в своем письме, копия которого была получена компанией Deadline.

Они также хотят обеспечить процесс рассмотрения отклоненных заявлений. Они призывают к «процессу технических исправлений, чтобы рецензенты могли запросить дополнительную информацию, если представление отклонено из-за очевидной технической ошибки». Владельцы кинотеатров обеспокоены тем, как SBA будет укомплектовать кадрами тех, кому поручено прочесывать заявки.

Андреа Робкер, пресс-секретарь SBA, сообщила, что они выявили и исправили первоначальные проблемы.Но затем они «возобновили тщательное тестирование с нашими поставщиками и провели дополнительный анализ рисков, наши команды определили другие потенциальные проблемы с производительностью, над которыми мы работаем. Мы сосредоточены на повышении производительности портала и расширении возможностей пользователей до его повторного открытия. Мы также продолжаем взаимодействовать с заинтересованными сторонами и заранее уведомим о дате открытия, чтобы у нас было достаточно времени для подготовки ».

Она добавила: «Мы продолжим регулярно публиковать обновления и заблаговременно уведомлять соискателей, чтобы они могли лучше подготовиться к повторному открытию портала приложений.Я могу подтвердить, что он не откроется в эти выходные «.

Несмотря на некоторую путаницу, SBA также планирует обновить руководство пользователя для заявителей и ответы на часто задаваемые вопросы, чтобы уточнить информацию.

Программа первоначально была предназначена для оказания помощи местам проведения живых мероприятий, в том числе концертным залам и законным театрам, как часть закона, названного «Закон о сохранении наших сцен», и кинотеатры были добавлены в законопроект прошлой осенью. Одним из ее поборников был лидер большинства в Сенате Чак Шумер (штат Нью-Йорк), который в прошлом году провел серию пресс-конференций в поддержку фондов помощи, даже надев маску Save Our Stages.Представитель офиса Шумера заявил в четверг: «Мы настаиваем на том, чтобы SBA исправило проблемы как можно скорее. Этапы быстро нуждаются в помощи ».

Закон о сохранении наших стадий был включен в пакет Covid-19 на 900 миллиардов долларов, который был принят Конгрессом в декабре и после угрозы вето был в конечном итоге подписан тогдашним президентом Дональдом Трампом.

В феврале на программу был выделен дополнительный миллиард долларов в рамках Закона о планах спасения США. Частично из-за задержки с запуском и запуском требования были смягчены, так что заявители, получившие ссуды в рамках Программы защиты зарплаты через местных кредиторов, также могли получить гранты SVOG.Торговым точкам по-прежнему будет запрещено получать ссуды ГЧП после получения грантов.

Хотя задержки были связаны со сменой администрации и недавним сбоем веб-сайта, в последнее время также, похоже, происходит то, что SBA оказывается в ловушке между требованиями вывести деньги за дверь и опасениями, что это будет сделано без возможности существенное мошенничество и растрата. Генеральный инспектор SBA Ганнибал «Майк» Уэр написал в отчете на прошлой неделе, что у него «серьезные опасения» по поводу контроля, введенного для «устранения возможного злоупотребления федеральными средствами», включая отсутствие достаточного штата сотрудников для надзора.

«В настоящее время в программном офисе есть одно назначенное должностное лицо, и его сотрудники находятся на временной работе», — написал он. «В настоящее время SBA не формализовало план укомплектования штатов этого офиса относительно ожидаемого количества заявок. Агентство также не определило организационную структуру для управления программой ».

Те, кто имеет право, могут подать заявку на получение гранта, равного 45% их валового дохода, при этом максимальная сумма, доступная для одного гранта, составляет 10 миллионов долларов.В рамках программы выделено 2 миллиарда долларов для предприятий, в которых работает до 50 штатных сотрудников. Согласно SBA, те, у кого больше всего потерь дохода, будут в первую очередь получать гранты.

Грег Леммле, который вместе со своим отцом Робертом владеет и управляет сетью Laemmle в Лос-Анджелесе, сказал, что «это масштабная новая программа, и я полностью понимаю идею, что они действительно хотят убедиться, что они создают программу, которая предотвращает мошенничество ». Но беспокоит то, что они создают что-то «настолько запутанное, что не позволяет получать средства людям, которые законно нуждаются в этом и заслуживают этого.”

Театры Леммле открывают новые артхаусы в районе Лос-Анджелеса, включая новый мультиплекс в Санта-Кларите

Леммле, располагающий восемью филиалами в районе Лос-Анджелеса, получил 150 000 долларов от другой программы, «Ссуда ​​на случай причинения вреда здоровью», но этого было намного меньше, чем было необходимо, и позже получил 905 000 долларов в виде ссуды на Программу защиты зарплаты. Они также продали некоторую недвижимость, заключив сделки купли-продажи с обратной арендой, чтобы пережить кризис.

Гранты SVOG будут значительно больше, что поможет им выплатить арендную плату, а также другие расходы, чтобы поддержать их финансы, сказал Леммле.Только в прошлом месяце кинотеатрам в Лос-Анджелесе разрешили вновь открыться.

«Мы снова открылись, но отчасти нам нужно продемонстрировать распространению, что просмотр фильмов возобновился», — сказал Леммле.

Публичные компании не имеют права на получение грантов SVOG. Также ограничены организации, которые владеют или управляют площадками, театрами, музеями или агентствами по работе с талантами более чем в одной стране, более чем в 10 штатах и имеют более 500 сотрудников по состоянию на 29 февраля 2020 года.Среди тех, кто также имеет право на получение грантов, есть продюсеры и представители талантов, связанные с бизнесом живых мероприятий.

При этих критериях Pacific Theaters и ArcLight могли иметь право на участие в программе, но материнская компания Decurion Corp. не сообщила, планируют ли они добиваться грантов SVOG.

Другие независимые сети, открывшиеся в прошлом году, пытаются компенсировать такую ​​значительную потерю дохода.

Main Street Theaters, семейная сеть, которую Барстоу и его жена основали 30 лет назад, теперь имеет 45 экранов в шести местах.Это включает в себя комплекс из 12 экранов, работавший до пандемии, который открылся в декабре. Хотя они открыты с августа, бизнес работает на 10% от нормы.

«Не нужно быть гением, чтобы увидеть, что когда вы работаете на 7–15% от нормы, вы не выбиваете дверь с прибылью», — сказал Барстоу.

Аллан Рейган, генеральный директор Flix Brewhouse из Техаса, заявил, что теперь он планирует подать заявку на получение кредита ГЧП в качестве временной меры.

Flix Brewhouse имеет 87 экранов в семи штатах, но сейчас все они закрыты.Они ожидали, что в 2020 году выручка составит около 70 миллионов долларов, но сейчас «мы на нуле», — сказал Рейган. Если раньше у них было 1300 сотрудников, то теперь их пять. Он сказал, что им нужно финансирование, чтобы «перезапустить наш бизнес и повторно нанять людей, которые будут поддерживать».

8 апреля, в день открытия приложений, они вошли в систему и зарегистрировались, ответили на первых двух страницах вопросов типа «да или нет», а затем не смогли загрузить свой документ.

Одна из основных проблем заключалась в том, что одним человеком был главный, но это было все; другие задачи были распределены между разными людьми, «которые не согласовывались друг с другом», — сказал Рейган.«Похоже, разные люди составляли разные части программы».

«Мы были обескуражены по нескольким направлениям, но похоже, что они осознают серьезную проблему, которая у них есть», — сказал он.

Ожидание, однако, превратилось в американские горки, поскольку Конгресс спорил по пакетам помощи перед выборами, в конце концов пришел к соглашению по окончании года, а затем из-за трудностей с запуском и запуском SVOG в этом году. Рейган сказал, что ему это напомнило Чарли Брауна, который бежал, чтобы пнуть футбольный мяч, но Люси выхватила его в последнюю минуту.

«Наша отрасль превратилась в Чарли Брауна, а федеральное правительство — в Люси», — сказал он.

Несмотря на то, что они были «разочарованы по нескольким направлениям, похоже, что они осознают серьезную проблему, которая у них есть», — сказал он.