Lada 2110: Lada 2110 (2111,21112) — обзор, цены, видео, технические характеристики

Моторные и трансмиссионные масла для Lada 2110

ВАЗовская «десятка» стала для российских автомобилистов поистине культовой. Четырёхдверный переднеприводный седан планировался к выпуску ещё в 1992 году, но из-за кризиса выпуск был отложен. Серийное производство было налажено только в 1996 году. С того момента до 2007 года «десятка» выпускалась на заводе в Тольятти и с 2007 по 2014 на Украине. ВАЗ-2110 позиционировался как автомобиль более высокого класса, чем классические модели ВАЗа. Например, на машине была электронная система управления двигателем и бортовой компьютер, а также возможность установки гидроусилителя руля и электрических стеклоподъёмников. «Десятка» открыла новую эпоху в истории российского автопроизводства. Кроме седана «десятое» семейство включает «универсал» 2111 и «хэтчбек» 2112. Всем представителям этого ряда автомобилей устанавливались бензиновые моторы объемом 1.5 и 1.6 литра с 5-ступенчатой МКПП.

Моторное масло для Lada 2110.

LIQUI MOLY OPTIMAL 5W-40

Наиболее универсальным вариантом, который подойдёт в большинстве случаев это HC-синтетическое моторное масло Optimal 5W-40 с адаптированным для российских условий пакетом присадок. Новейшие технологии синтеза обеспечивают высокий уровень защиты и оптимальное смазывание деталей двигателя. Продукт обладает отличными антифрикционными свойствами для всесезонного применения. Комбинация базовых масел на основе гидрокрекинга и самой современной технологией присадок гарантирует получение моторного масла, которое снижает до минимума трение, в результате чего уменьшается расход топлива, обеспечивает быстрое поступление масла к деталям двигателя при низких температурах, надежно защищает от износа и снижает вредные выбросы

LIQUI MOLY OPTIMAL 5W-30

Для более новых автомобилей 110 серии ВАЗа рекомендуется HC-синтетическое моторное масло Optimal 5W-30. Масло обладает популярнейшим классом вязкости для современных автомобилей и оптимально подходит для эксплуатации в России. Optimal 5W-30 обеспечивает лёгкий ход мотора, высокую устойчивость смазки, быстрое смазывание деталей при низких температурах, оптимальное давление при любых условиях, отличную защиту от износа, а также экономит топливо и снижает выброс вредных веществ.

Благодаря доступной цене масла линейки Optimal являются идеальным соотношением цены и настоящего немецкого качества. Масла соответствуют современным международным стандартам API/ACEA.

Трансмиссионное моторное масло для Lada 2110.

Hypoid-Getriebeoil TDL 75W-90

В МКПП «десяток» специалисты LIQUI MOLY рекомендует применять Hypoid-Getriebeoil TDL 75W-90. Полусинтетическое трансмиссионное масло класса GL-4/GL-5 обеспечивает четкое переключение передач, обладает отличными смазывающими и антикоррозионными свойствами, что увеличивает срок службы коробки передач. В масле Hypoid-Getriebeoil TDL 75W-90 используется комплекс высококачественные базовых компонентов и специальный пакет присадок, что даёт высокую устойчивость к нагрузкам и снижение износа.

Соответствия и допуски:

Допуски:
-API: GL-4/GL-5/MT-1
-MIL-L: 2105 D
-MIL-PRF: 2105 E

Отзывы владельцев Лада 2110 (Lada 2110)

ГлавнаяОтзывыЛада2110


3.7 (отзывов: 99) *

Воспользуйтесь Фильтром «год выпуска», чтобы сделать выборку отзывов о Лада 2110 конкретного года.

Сортировка: —по умолчанию—от больших к меньшимот меньших к большимот свежих к старымот старых к свежимот лучших к худшимот худших к лучшим

7

Машину приобретал 3 года назад в примерно таком же состоянии. На момент приобретения счетчик был скручен и показывал всего 1000 км. пробега. В настоящий…

1 Сейчас у меня Митсубиси Аутлендер, 2 литра двигатель 150 л. с., масса авто 1500 кг, так вот по сравнению с Ладой 2110 (эксплуатировал только 16 клапанные 124 моторы ВАЗ) — приёмистости ничуть не больше, чем у 2110. Вообще соотношение стоимость содержания/комфорт/сопртивность у иномарок проигрывает ВАЗ 2110. Т.е. если морально готов отдавать 50-60 т. р в год, без стоимости бензина (в эту стоимость я включил затраты на ТО или на запчасти в течении 5 лет эксплуатации плюс потеря в стоимости при продаже), то можно посмотреть на иномарки, а если машина нужна для «работы» — передвижение, привезти груз или рабочих — 2110 это песня. 6

Мой первый автомобиль. Скептически относился к продукции Автоваза, но из-за небольшого бюджета купил эту 10ку в хорошем состоянии. Надежностью приятно…

Приобрёл весной и не мог нарадоваться. На спидометре было уже 80000 пробега. Не смотря на отличное состояние, и неприхотливость, начал всё переделывать под себя. Под капотом поменял много…

ВАЗ 2110 1.6, 16 кл., 2002 г. в. Выбрала автомобиль, честно признаться, по внешним данным — понравился дизайн. Купила в 2005, пробег был 130 тыс. км. Машина — зверь была первые полгода…

Отъездил 3 года на восьмиклапанной Десятке. Брал с пробегом 260 тыс. Из них 180 проехал мой приятель, поэтому брать было не страшно (знал, что за авто и основные поломки). Ремонт мотора…

5 Если говорить о средстве передвижения, то ВАЗ 2110 (да и все модели этой марки) — самый выгодный вариант. Очень дешевое обслуживания и доступность запчастей выносят эту марку на первое место среди самый популярных автомобилей. Конечно, о надежности говорить не приходится, автомобиль действительно может Вас подвести в дороге. И я знаю, что заранее, никто его проверять не будет. Наверно, это один из самых больших минусов сей марки. Впрочем, за свои деньги — не плохая машина. Если поездить…

Здравствуйте! Хочу рассказать о владении автомобилями. В 2000 году решил продать девятку и купить 99, но дочь мне говорит: «Пап, давай купим десятку», а мне, если честно, от одного вида…

7

Нормальный авто. Хорошая печка. Легок в ремонте. Дешев в обслуживании. Ну начнём, ВАЗ 21103. Авто покупался на авторынке, опыта по покупке подержанных…

7 Динамика — 4, управляемость — 4, комфорт — 4, салон — 3, багажник — 5, ТО дешево. В общем авто не плохое, эксплуатация не бьет по карману. Запчасти есть в любом магазине. Малый расход топлива. Я брал 10-ти летнюю машину. Конечно вложился, но теперь машина — пуля. За 2.5 года заменил стартер, генератор, аккумулятор, ну и капиталка двигателя. Достоинства авто: Дешев в обслуге, малый расход топлива. Недостатки: Все-таки ломается. Как авто на каждый день — самое то. 7

ВАЗ 21104, двигатель 1.6, очень динамичная машина, а вместе с короткоходной спорт кулисой, почти спортивная динамика. От светофора уходит в считанные …

3 Машина шустрая. Масло от замены до замены. В салоне стоят чехлы. Подвеска мягкая, если стоят масляные стойки. В салоне зимой очень тепло (печка — просто огонь). Двигатель клапана при обрыве ремня клапана не загибает. Но возить запасной ремень не поможет, трудно менять. Лучше на станции и вовремя. Амортизаторы задние разборные. Передние билштайн меняются патроны и поехал.

Здравствуйте, господа автолюбители. Почитал я достаточно отзывов и решил добавить не отзыв, а историю эксплуатации отечественной машины. Сам я человек деревенский, поэтому болтами и гайками…

Всем привет! Вот вдоволь начитался отзывов о чуде нашего автопрома, и решил рассказать о своей 21102. Купил её в мае 2008 г. Сразу оговорюсь, денег в обрез было (то, что за последний курс…

Она у меня уже 4 года — третий хозяин. Купил ВАЗ 2110, так как у начальника ПТО отобрали права. В любое время автомобиль готов к эксплуатации. Динамика — разгон с 9 секунд до 100. Масло Лукойл синтетика зимой, зато летом Visco натуральное, мотор отдыхает. В минус 46 (как здрасьте) завел и поехал. Хочу взять Паджерик, но эту машину ВАЗ 2110 оставлю у себя.

Загрузить еще

* Средняя оценка расчитана на основании 99 отзывов владельцев Лада 2110, размещенных на сайте.

Добавить свой отзывДобавить объявление

Сейчас в продаже

Москва

Geely Emgrand
2012 г.в. | 56,500 км350,000 р.

Москва

Opel Astra
2010 г.в. | 86,150 км460,000 р.

Москва

Skoda Octavia
2008 г.в. | 95,000 км330,000 р.

Москва

Лада 2101
1985 г.в. | 87,000 км240,000 р.

Москва

Opel Astra
2010 г.в. | 92,000 км420,000 р.

Москва

Volkswagen Jetta
2012 г.в. | 126,000 км470,000 р.

Москва

Toyota Prius
2014 г.в. | 66,000 км650,000 р.

Москва

Opel Astra
2006 г.в. | 132,665 км240,000 р.

Москва

Peugeot 308
2008 г.в. | 177,000 км290,000 р.

Москва

Opel Astra
2008 г.в. | 180,000 км193,284 р.


LADA 2110 (2111, 2112, 21123) — описание модели

LADA 2110 автомобиль второго поколения семейства российских переднеприводных автомобилей Волжского автозавода. Автомобиль С – класса, выпускался в кузове четырехдверный седан с 1996 по 2007 год.  Производился в России — Тольяти (АвтоВАЗ), в Украине –Луцк, Черкассы (Богдан), в Египте (Lada Egypt).

Проектирование седана на базе существующего хэтчбека ВАЗ-2108 началось в 1983 году, проект был назван ВАЗ -2110. Опытный образец «десятки» вышел в июле 1985 года, а неофициально познакомиться с ним автолюбители смогли в журнале «За рулем» от 1990 года, где были помещены шпионские снимки пред серийного варианта ВАЗ-2110  , заснятые на испытательном полигоне компании Porsche.

По планам завода седан должен был пойти в серию в 1992году, но разразившийся экономический кризис отодвинул эти планы на несколько лет.

Опытные образцы «десятки» были выпущены 27 июня 1995 года, а серийное производство ВАЗ-2110 началось в 1996 году. Упущенное время сказалось на техническом уровне модели, так как за этот период мировой авто производитель  вышел на другой уровень. Модель была хороша для конца 80-х. но в  конце 90-х ее уже нельзя было назвать новинкой. Однако для отечественного автопрома это был, несомненно, шаг вперед.

Если сравнивать с предыдущими поколениями ВАЗа, то «десятка» уже позиционировалась как более совершенная и стоящая на класс выше. Это был современный и достаточно конкурентоспособный автомобиль, как по экстерьеру, так и по отделке салона.

Интерьер «десятки» вполне отвечает его классу и цене. Удобная панель управления, регулируемые сидения. Эргономика отвечает современным требованиям и не отвлекает водителя от дороги. Наличие бортового компьютера помогает следить за основными параметрами авто. При желании предусмотрена установка иммобилайзера и противотуманных фар.

Комфорт «десятки» на неплохом уровне, если не брать водителей высокого роста, которым будет все же несколько тесновато, несмотря на регулируемую рулевую колонку .

Автомобиль отличает плавность хода и управляемость, но явно не хватает штатного усилителя руля, скажем при дворовой парковке, особенно для женских рук.

За свою стоимость хороший автомобиль, а если добавить оцинкованный кузов, низкую стоимость запчастей и возможность обслуживания и ремонта в любом гараже, то ВАЗ 2110 для покупателя вполне достойный автомобиль.

Багажное отделение седана достаточно вместительное (480л) плюс возможность трансформации сидений, люк в заднем сидении и низкая крышка багажника, способствует перевозке длинномерного груза  и удобной погрузке.

Модификации на базе ВАЗ 2110

На базе седана создан универсал ВАЗ 2111, и ВАЗ 2112 хэтчбек, а также и модель ВАЗ -21123 – трехдверное купе.

ВАЗ 2111 – первый «универсал» с передним приводом от ВАЗа , производство которого продолжалось с 1998 по 2009 год. Универсал пользовался большой популярностью у предпринимателей, так как позволял перевозить большой объем груза. Багажное отделение ВАЗ 2111 составляет 490л, а при сложенных сиденьях увеличивается до 1420л. Общая грузоподъемность багажного отделения – 500 кг.

Универсал имеет две уникальные системы: автоматическое  управление отопителем (САУО), осуществляющее прогрев салона; система бортового контроля — уровня  технических жидкостей, износа тормозных колодок, закрытие дверей, ламп в наружном  освещении. Устройство подает сигнал водителю при возникновении неисправностей.

ВАЗ 2112 – 5-дверный хэтчбек выпускался с 1999  по 2008 год.  Автомобиль отличался укороченным до 4170 мм кузовом, что сделало его более чувствительным на поворот руля. Управляемость хэтчбека более спортивная, но в сравнении с «девяткой», имевшей аналогичный тип кузова, гораздо комфортнее.

ВАЗ 21123 выпускался компанией «Автокомплект», являющийся партнером ВАЗа. Модель выпускается с 2003 года в штучных вариантах как трехдверное купе, практически в режиме ручной сборки. За базу была взята модель ВАЗ 2112. Модель отличает от пятидверного хэтчбека — 130 деталей, где 57 — кузовные.  Эти изменения существенно повлияли на поведение автомобиля. Экстерьер модели приобрел спортивную злость и стремительность, что вкупе с задним спойлером значительно преобразило облик автомобиля. На 200 мм выросла ширина дверей, что повлекло их утяжеление и установку литых петель.  Более жесткая подвеска снизила плавность хода, но повысилась управляемость и информативность руля. Модель вышла дорогой, что собственно неудивительно для мелкосерийной эксклюзивной сборки. Цену на модель дилеры объявляют шепотом, чтобы не спугнуть потенциального клиента.

Технические особенности LADA 2110

По сравнению с моделью ВАЗ -21099 эксплуатационные характеристики «десятки» были значительно улучшены. Так расход топлива с 1.5-литровым мотором стал составлять 7.5 /100 км,  что на 12% меньше чем у предыдущей модели, а также была увеличена и максимальная скорость до 162 км/час.

Модель с 8-клапанным 79-сильным, 1.5л двигателем развивала уже 170 км/час и проходила до «сотни» за 14 сек. Мотор отлично вписывался в интенсивное городское движение за счет тяговитости и эластичности.

Версия двигателя с двухвальной 16-клапанной головкой, объемом 1.5л выдавала мощность 94л.с. и обеспечивала разгон до «сотни» — 12.5с и максимальные – 185 км/час.

 

Современное оснащение LADA 2110

Помимо электронной системы управления двигателем  автомобиль получил бортовой компьютер, гидроусилитель руля и электростеклоподъемники, возможность оснащения иммобилайзерам, систему рециркуляции паров топлива, а также  тормозные вентилируемые диски и ряд других усовершенствований.

Автомобиль популярен среди всех возрастных групп, чему способствовала появившаяся возможность выбрать не только модель но и комплектацию, а также выгодное по сравнению с зарубежными аналогами соотношение цена-качество.

 

Интересные факты о LADA 2110

ВАЗ-2110 в кино: «Дорожный патруль», «Нина», «Супертёща для неудачника».

По статистике угонов автомобиль постоянно остается в зоне риска. Среди ВАЗовских моделей на первом месте ВАЗ-2112, на втором — ВАЗ-2110, на третьем — ВАЗ-2199.

 

Плюсы и минусы в сравнении с одноклассниками

Автомобиль перешел в другой класс и стал выглядеть гораздо представительней и выигрывал среди одноклассников в соотношении цена-качество.

Множество проблем с коррозией снял оцинкованный кузов, повысилось качество отделки салона. Автомобиль стал более экономичным благодаря улучшенной аэродинамике и доработке двигателя, а также и измененному соотношению в главной паре с 3.9 на 3.7. Вдобавок изменение соотношения  в главной паре значительно снизили уровень шума производимого КПП. Появилась возможность установки множества полезных опций, как в плане безопасности автомобиля, так и увеличении комфорта.

Цена и доступность запчастей, а также недорогое обслуживание и ремонт в любом сервисе.

Краш-тест подтвердил заверения разработчиков об увеличении «живучести» кузова, при фронтальном ударе область салона остается без каких – либо значительных деформаций.

К минусам относится: громкий звук двигателя, качество сборки, качество применяемого пластика. Не решенные до конца проблемы с тросом сцепления.

Зондирование на основе FRET для получения прямой информации об устойчивости миРНК в живых клетках: асимметричная деградация цепей миРНК

Исследование внутриклеточной судьбы малых интерференционных РНК (миРНК) после их доставки в клетки представляет большой интерес для выяснения динамики миРНК в цитоплазме. Однако для успешного применения siRNA in vivo необходимо понимать его доставку в клетку и устойчивость и улучшать ее.Здесь мы представляем метод на основе флуоресцентного резонансного переноса энергии (FRET) с использованием олигонуклеотидных зондов для изучения внутриклеточной диссоциации (или плавления) и устойчивости миРНК в живых клетках. Зонды FRET были специально разработаны для наблюдения внутриклеточной диссоциации (или плавления) и деградации коротких синтетических РНК в режиме реального времени, обеспечивая, таким образом, желаемую кинетическую информацию в клетках. Внутриклеточный FRET-анализ показывает, что дуплекс siRNA постепенно диффундирует в цитозоль, диссоциирует и деградирует в течение 3.5 ч, что подтверждается измерениями колокализации с помощью конфокальной микроскопии. Кроме того, наши анализы FRET выявляют асимметричную деградацию, а также зависимую от времени диссоциацию каждой цепи миРНК. Применение этого метода FRET может позволить получить прямую информацию о целостности миРНК внутри живых клеток, обеспечивая инструмент обнаружения динамики биологических молекул.

У вас есть доступ к этой статье

Подождите, пока мы загрузим ваш контент… Что-то пошло не так. Попробуй снова?

Разработка генетически закодированных наносенсоров на основе FRET для отображения в реальном времени динамики мышьяка (As 3+) в живых клетках

Разработка и создание наносенсора на основе FRET

Мышьяк (As) является токсичным металлическим элементом, который отрицательно влияет на благополучие человека и окружающая среда.Хотя арсенит As 3+ потенциально более вреден, чем арсенат As 5+ , обе формы мышьяка связаны с серьезными проблемами со здоровьем, такими как хронический дерматит и уротелиальная карцинома 10 . Таким образом, возникла необходимость в создании простого метода, который может контролировать и измерять уровни мышьяка in vivo и , чтобы лучше понять транспорт, распределение и накопление ионов металлов в живых клетках. Репрессор транскрипции ArsR оперона ars имеет сильное сродство к As 3+ , а его способность связывать ионы мышьяка делает его многообещающим кандидатом для разработки наносенсоров на основе FRET.

Здесь, в этой работе, был разработан генетически закодированный датчик с использованием флуоресцентной сенсорной технологии для количественного определения мышьяка в реальном времени неинвазивным способом. Флуоресцентные варианты ECFP (донор) и Venus (акцептор) были связаны с репрессором ArsR, чувствительным к мышьяку, на N- и C-конце соответственно, чтобы получить рекомбинантный белок. Металлорегуляторный белок ArsR E . coli — транс-действующий репрессор, который распознает формы мышьяка, присутствующие в окружающей среде 3 .В качестве пары FRET спектральные варианты ECFP и Venus av-GFP ( Aequorea victoria — зеленый флуоресцентный белок) использовали для получения ратиометрических изменений скорости потока мышьяка (As 3+ ) на клеточном уровне. Наносенсор был успешно сконструирован с использованием стратегий клонирования в бактериальную векторную плазмиду pRSET-B (Invitrogen, США), генерирующую сенсорную конструкцию ECFP-ArsR-Venus в pRSET-B. Вектор pRSET-B предлагает полигистидиновую (6xHis) метку на N-конце для быстрой очистки гибридных белков с помощью хелатирующей никель смолы.Конструкция наносенсора была проверена секвенированием, тем самым подтверждая ее точность (дополнительный рис. S1). Линейное схематическое изображение на рис. 1а показывает расположение сайтов расщепления в сенсорной конструкции. На рисунке 1b показано изображение датчика на основе FRET в присутствии мышьяка. Карта конструкции ECFP_ArsR_Venus в экспрессионных векторах бактерий, дрожжей и млекопитающих показана на дополнительном рисунке S2. Верность гена arsR была подтверждена секвенированием (дополнительный рисунок S3). Одновременно гены, кодирующие флуоресцентные белки ECFP и Venus, были успешно клонированы в векторе экспрессии pRSET-B для создания конструкций pRSET-B_ECFP, pRSET-B_Venus и pRSET-B_ECFP_Venus для проведения экспериментов по флуоресценции и использовались в качестве контроля на протяжении всего исследования.pRSET-B_ECFP_Venus состояла из ECFP и Венеры, но не имела чувствительного домена.

Рисунок 1

Наглядное изображение наносенсора. ( a ) Постройте карту SenALiB с положением рестрикционных сайтов. ( b ) Общий вид разработанного датчика. Поскольку 3+ -индуцированные конформационные изменения в белке ArsR сближают два флуорофора, ECFP и Венеру, тем самым передавая энергию в форме FRET.

Экспрессия и очистка белка

E . coli BL21-кодон плюс трансформировали конструкцией pRSET-B_ECFP_ArsR_Venus, и экспрессию белка индуцировали добавлением 0,5 мМ изопропил-β-D-1-тиогалактопиранозида (IPTG). С помощью аффинных колонок с His-меткой никель-нитрилотриуксусной кислоты (Ni-NTA) рекомбинантный белок был успешно очищен. Точность наносенсорного белка была проанализирована и подтверждена с помощью электрофореза в 10% -ном полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS-PAGE) и была названа SenALiB (датчик мышьяковой болезни черной ноги).

Сканирование флуоресцентного излучения белка наносенсора

Оперон ars из E . coli плазмида R773 предлагает хорошо изученный механизм детоксикации, тем самым придавая устойчивость к соединениям мышьяка, сурьмы и висмута 11 . Хромосомный оперон содержит индуцибельный репрессор As 3+ (arsR), транс-действующий металлорегуляторный белок (arsD), АТФазу (arsA), трансмембранный транспортер As 3+ (arsB) и редуктазу arsC, которая превращает As 5. + к As 3+ 12,13 .В отсутствие металлоида As, ArsR связывается как гомодимер с промотором / оператором ars , блокируя инициацию транскрипции ars. Однако даже низкая концентрация As 3+ , когда присутствует, связывается с ArsR, вызывая конформационные изменения и, таким образом, способствует высвобождению ArsR из ДНК (промотор / оператор) для инициации транскрипции оперона ars 14 . SenALiB, который содержит ArsR в виде чувствительного домена As 3+ , возбуждали при λ 420 нм, и спектральный профиль контролировали в диапазоне длин волн 460-600 нм на считывающем устройстве для микропланшетов с монохроматором.Белок ArsR демонстрирует высокое сродство, чувствительность (может обнаруживать до 10 -15 M As 3+ ) и селективность в отношении арсенита 15 и поэтому был использован для разработки SenALiB. Ранее также ArsR использовался в качестве сенсорной области As 3+ для создания цельноклеточных и микробных сенсоров 4,5,6,7,16 , но имел большое количество недостатков, таких как низкая / умеренная чувствительность, тяжелая аппаратура, высокая стоимость, сложная пробоподготовка и чрезвычайная токсичность.

Спектральный анализ анализатора SenALiB in vitro показывает соответствующие изменения интенсивности флуоресцентного излучения ECFP и Венеры в присутствии арсенита. В присутствии As 3+ интенсивность излучения ECFP уменьшается, а интенсивность Венеры увеличивается (рис. 2). Поскольку 3+, -индуцированные конформационные изменения в белке ArsR сближают ECFP и Венеру на расстояние 10 нм, тем самым безызлучательно передавая энергию от донора к молекуле акцептора. Это согласуется с другими генетически кодируемыми сенсорами, в которых при связывании метаболита две доли PBP закручиваются и закрываются по типу « Venus flytrap ».Это связывание метаболита транслируется в сигнал FRET 17 . Результат показывает передачу энергии от донора к акцептору в присутствии As 3+ . Датчики на основе FRET — эффективные инструменты для изучения внутриклеточной концентрации любого метаболита 18 . Такие сенсоры используют связывающие металлы белки в качестве элементов распознавания, которые подвергаются лиганд-зависимой конформационной динамике для передачи энергии между двумя парами FRET безызлучательным образом 19 . Эффективность (E) передачи энергии зависит от расстояния флуорофоров друг от друга, диполь-дипольной ориентации и перекрытия спектра излучения донора и поглощения акцептора 20,21 .Ранее органические флуоресцентные красители использовались в качестве пары FRET в флуоресцентных датчиках 22 , но из-за их токсичности и трудного проникновения в живые клетки наш подход сравнительно намного более эффективен.

Рисунок 2

Спектральное сканирование спектрального излучения In vitro SenALiB. Спектр регистрировался в диапазоне длин волн 460–600 нм. Добавление As 3+ приводит к изменению относительной интенсивности флуоресценции донорного и акцепторного флуорофора.

Анализ стабильности белка наносенсора

Стабильность сенсора определяли в фосфатно-солевом буфере (PBS), 3- (N-морфолино) пропансульфоновой кислоте (MOPS) и Трис-Cl. Белок характеризовали методом FRET в диапазоне pH (от 5,0 до 8,0) различных буферов по изменению интенсивности излучения (Em 540 / Em 485 ). При тестировании на стабильность было обнаружено, что SenALiB показывает незначительные изменения в соотношении интенсивностей двойной эмиссии в 20 мМ буфере MOPS (рис.3а). Буфер 20 мМ MOPS с физиологическим pH 7,2 использовали для разбавления сенсорного белка в дальнейших экспериментальных анализах. Различные спектральные свойства белков ECFP и Venus делают их привлекательной и подходящей парой FRET. Вариант усиленного желтого флуоресцентного белка (EYFP), Венера демонстрирует пониженную чувствительность к окружающей среде, ярче и имеет значительно более низкую pKa (~ 6,0), что делает этот белок менее чувствительным к pH и желательным акцептором 23,24 . Ранее было установлено, что новая мутация, F46L в варианте SEYFP (super-EYFP) -F46L Венеры, ускоряет лимитирующую скорость окислительную стадию созревания хромофора при 37 ° C, что приводит к усилению флуоресценции YFP.Мутации, такие как F64L / M153T / V163A / S175G в быстро созревающем варианте Венеры, делают его менее чувствительным к ацидозу 25 и галогенидам (Cl ). Венера была использована в качестве акцепторной молекулы 26 для разработки сенсоров FRET лактата и пирувата 27,28 .

Рисунок 3

Стабильность буфера. ( a) SenALiB разводили в различных буферах с измененным диапазоном pH от 5,0 до 8,0. Наименьшее изменение соотношения интенсивностей наблюдалось в случае 20 мМ буфера MOPS.( b) Изменение отношения интенсивности испускания флуоресценции регистрировали в 20 мМ буфере MOPS в отсутствие и с добавлением 10 мкМ мышьяка. Точки данных выражены как среднее ± стандартное отклонение от n = 3.

Соотношение FRET также было записано путем разбавления сенсорного белка в 20 мМ буфере MOPS с различным диапазоном pH (от 5,0 до 8,0) в отсутствие, а также в присутствии 10 мкМ. Как 3+ с использованием флуоресцентного монохроматора для чтения микропланшетов (Biotek, США) с 96-луночным. В кислых условиях, то есть до pH 7.0, логометрическое изменение было довольно значительным, но в щелочном физиологическом диапазоне (от 7,0 до 8,0) сенсорный белок кажется сравнительно стабильным, поскольку изменение pH в этом диапазоне вызывает минимальное изменение отношения интенсивности излучения (рис. 3b). Поскольку физиологический pH S . cerevisiae близок к 7,0, стабильность pH SenALiB делает его подходящим выбором для изучения in vivo уровня мышьяка 29 .

Отклик флуоресценции

Чтобы исключить влияние As 3+ на индивидуальный флуорофор (ECFP / Venus), мы создали соответствующие конструкции pRSET-B_ECFP, pRSET-B_Venus и pRSET-B_ECFP_Venus без связывающего домена.Затем белки экспрессировали, очищали и влияние As 3+ на каждый флуорофор изучали с помощью флуоресцентной спектроскопии. Кроме того, чтобы увидеть структурные изменения, которые могут произойти после взаимодействия As 3+ с каждым белком, мы также использовали внутреннюю флуоресценцию Trp в качестве зонда. Для этого флуоресцентные белки возбуждали на λ 280 нм и регистрировали соответствующие спектры излучения в диапазоне длин волн 310–400 нм. Было обнаружено, что при увеличении концентраций As 3+ внутренняя флуоресценция ECFP / Venus уменьшалась, но наблюдаемое тушение было не очень заметным или значительным (дополнительный рис.S4). Кроме того, белки возбуждали на λ 420 нм, и три спектра излучения регистрировали в диапазоне длин волн 460-600 нм. В этом случае добавление As 3+ также не вызывает значительного изменения интенсивности флуоресценции (дополнительный рисунок S5). Эти наблюдения ясно указывают на то, что As 3+ имеют очень слабое сродство к этим флуорофорам или не имеют его. Наблюдаемые изменения интенсивности флуоресценции ECFP / Venus могли быть связаны с эффектом разбавления.

Анализы in vitro SenALiB

Специфичность обнаружения SenALiB была протестирована путем измерения изменения отношения интенсивности излучения (Em 540 / Em 485 ) с использованием анализа на микропланшете, как показано на рис.4а. Помимо арсенита (As 3+ ), арсената металлов (As 5+ ), кадмия (Cd 2+ ), цинка (Zn 2+ ), железа (Fe 2+ ) и ртути. (Hg 2+ ) также были взяты для исследования. Координация As 3+ с ArsR вызывает значительное увеличение отношения интенсивностей двойного излучения, тогда как ионы других металлов, включая As 5+ , вызывают небольшое изменение отношения, указывая на то, что наносенсор является селективным по отношению к As 3+ .Высокая специфичность и селективность белка ArsR в отношении As 3+ способствует тому факту, что связывание As 3+ с аминокислотными остатками Cys-32 и Cys-34 arsR вызывает конформационные изменения в белке, который затем высвобождается. из области промотора / оператора и инициируется транскрипция оперона ars 6,30,31 . Это согласуется с нашими выводами о том, что изменение соотношения FRET не было столь значительным, когда As 5+ был добавлен к сенсорному белку.Как было установлено ранее, несмотря на то, что сайт связывания на белке arsR не может распознавать As 5+ , бактериальные клетки при инкубации с арсенат-ионом демонстрируют двукратное снижение светового выхода. Это может быть связано с различием в скорости ферментативного восстановления As 5+ до As 3+ под действием глутаредоксина и взаимодействием As 3+ с арсенит-связывающим сайтом на белке ArsR 7 . Здесь SenALiB фокусируется на обнаружении и количественном определении арсенита (As 3+ ).Однако он также может обнаруживать As 5+ , но в очень меньшей степени.

Рисунок 4

Характеристика анализа in vitro . ( a ) Была измерена специфичность очищенного белка к ионам металлов, и максимальное изменение соотношения было получено с As 3+ . ( b ) Изменение соотношения флуоресценции акцептора к донору при добавлении потенциальных внутриклеточных интерференций. Точки данных выражены как среднее ± стандартное отклонение от n = 3.

Кроме того, проводятся конкурентные эксперименты с потенциальными внутриклеточными интерференциями, такими как ионы биологически важных металлов (Na + , K + , Ca 2+ и Mg 2). + ), молекулярные краудеры (фиколл 70, декстран 70 и полиэтилгликоль PEG 400), аденозинтрифосфат (АТФ) и глутатион (GSH) также были выполнены в присутствии 10 мкМ As 3+ .Незначительные, но несущественные ратиометрические изменения флуоресценции были получены для всех видов (рис. 4b). Таким образом, был сделан вывод, что эти виды, когда они сосуществуют, не мешают зондированию As 3+ . Такой подход ранее использовался при разработке генетически кодируемых флуоресцентных индикаторов Mg 2+ , K + и H 2 O 2 32,33,34 . Синтетические полимеры (например, Ficoll 70, Dextran 70 и PEG 400) использовали в качестве «агентов скучивания», и их влияние на наносенсор было проанализировано для имитации условий скопления живых клеток.Белки обычно проверяются на их эффективность в присутствии толпы для изучения их стабильности и межбелковых взаимодействий 35 .

Уровень токсичности мышьяка в основном зависит от его химических форм. Трехвалентная мышьяковая форма As 3+ имеет сильное сродство к тиолу или сульфгидрильным группам белков, поскольку она реагирует с остатками цистеина белков через геометрию тригональной пирамиды и может инактивировать до 200 ферментов. Эти взаимодействия изменяют конформацию и структуру определенных белков, тем самым влияя на жизненно важные системы органов.В качестве альтернативы As 5+ действует как аналог фосфата, сравнительно менее токсичен и конкурирует с переносчиками фосфатных ионов в нескольких метаболических путях, нарушая различные клеточные процессы 3,36,37 . Аффинность очищенного SenALiB анализировали, инкубируя сенсорный белок с различными концентрациями арсенита (As 3+ ) и измеряя соотношение 540/485 нм. Анализ флуоресценции показал, что при добавлении As 3+ в диапазоне от 1 мкМ до 70 мкМ наблюдалось зависящее от концентрации увеличение отношения FRET и насыщение при 60 мкМ по сигмоидальной кривой.Очищенный сенсор дикого типа (WT) связывает As 3+ со значением 25,97 мкМ K d , показывая заметное изменение на 0,082 в соотношении FRET (фиг. 5). Таким образом, SenALiB может служить многообещающим инструментом для отслеживания и измерения уровней in vivo, As, 3+, , чтобы лучше понять транспорт, распределение и накопление ионов металлов в живых клетках.

Рисунок 5

Изотерма связывания лиганда SenALiB. Изменение соотношения FRET регистрировали в присутствии различных концентраций As 3+ , чтобы получить кривую насыщения.Точки данных выражены как среднее ± стандартное отклонение от n = 3.

Аффинные варианты по сайт-направленному мутагенезу

Набор мутантов был создан для увеличения динамического диапазона обнаружения мышьяка. Физиологический диапазон обнаружения был расширен за счет разработки мутантных сенсоров после внесения точечных мутаций в белок ArsR конструкции ECFP-ArsR-Venus. Точечные мутации были внесены в аминокислотные остатки, давшие сенсоры аффинности. Мутации были подтверждены анализом последовательности (дополнительный рис.S6). Мутанты по аффинности вместе с датчиком WT охватывают диапазон обнаружения мышьяка от 0,20 мкМ до 58,96 мкМ (рис. 6). Вычисленные K d WT (SenALiB-25µ), E27P (SenALiB-35µ), A81W (SenALiB-14µ) и двойной мутант R55I-E56Q (SenALiB-676n) составляли 25,97 мкМ, 35,97 мкМ, 14,48 мкМ. и 0,676 мкМ соответственно (таблица 1). Варианты сродства могут использоваться в качестве элементов управления для исключения артефактов 14 . SenALiB-676n оказался наиболее эффективным из созданных наносенсоров и в дальнейшем был использован для проведения in vivo измерения потока As 3+ в эукариотах в реальном времени.Созданные аффинные мутанты увеличили диапазон обнаружения сенсора и могут физиологически измерять внутриклеточные уровни мышьяка в различных масштабах. Ранее подход на основе интенсивности, измеряющий соотношение FRET между молекулами донора и акцептора 38 , был реализован при разработке сенсоров для метаболитов, таких как глюкоза, глутамат, тиамин и лизин 39,40,41,42 .

Рис. 6

Лиганд-зависимое изменение соотношения FRET для сенсорных и аффинных мутантов WT.Были созданы аффинные мутанты E27P и A81W, которые сравнили с датчиком WT. Точки данных выражены как среднее ± стандартное отклонение от n = 3.

Таблица 1 Связывающие свойства SenALiB-WT и вариантов сенсора.

In vivo характеристика SenALiB-676n в E . кишечная палочка

SenALiB-676n экспрессировали в бактериальных клетках для отслеживания изменений в соотношении 540/485 нм в in vivo с добавлением As 3+ извне.Логометрическое изменение регистрировалось в течение 80 мин с интервалом 5 мин. Соотношение Venus / ECFP в суспензиях бактериальных клеток, экспрессирующих SenALiB-676n, первоначально показало резкое увеличение с 10 мкМ As 3+ и, по-видимому, достигло насыщения через 60 минут, что указывает на накопление мышьяка в бактериальных клетках (рис. 7). Увеличение отношения FRET указывает на увеличение клеточных уровней мышьяка в результате комбинированного поглощения и транспорта 43 . Это соответствует требованиям As 3+ к E . coli 15 и ранее опубликованные отчеты о том, что логометрическое увеличение действительно связано с механизмом поглощения и транспорта метаболитов 43,44 . Отрицательный контроль pRSET-B_ ECFP_Venus затем экспрессировали в E . coli , как указано ранее, и было рассчитано соотношение флуоресценции акцептора и донора пары FRET. Было замечено, что при добавлении отношения интенсивности излучения As 3+ (Em 540 / Em 485 ) изменение было незначительным, что ясно указывает на то, что передача энергии не происходит, когда область зондирования As 3+ ArsR отсутствует в конструкция.Доказательство идеи, что конформационные изменения в связывающем домене конструкции приводят к FRET. Высокое пространственно-временное разрешение может быть достигнуто с помощью таких датчиков FRET, которые предоставляют подробные сведения о скорости потока и внутриклеточных концентрациях метаболитов 43,45 . Кривая ответа in vivo была получена путем добавления мышьяка в концентрации 10 мкМ к суспензии клеток в 96-луночных микротитровальных планшетах. Конфокальные изображения показали, что сенсорный белок успешно экспрессируется в бактериальных клетках (дополнительный рис.S7).

Рисунок 7

Анализ in vivo SenALiB-676n. Суспензию бактериальных клеток, экспрессирующих наносенсор, инкубировали в отсутствие и с добавлением 10 мкМ As 3+ , и изменение соотношения FRET регистрировали в течение 80 мин. В качестве отрицательного контроля к системе ECFP-Venus добавляли 10 мкМ As 3+ и получали логометрическое изменение за определенный период. Точки данных выражены как среднее ± стандартное отклонение от n = 3.

Мониторинг скорости потока мышьяка в дрожжах

До сих пор ни один флуоресцентный датчик не отслеживал изменения уровня концентрации As 3+ в эукариотической системе в неинвазивным способом.Чтобы проверить эффективность SenALiB-676n в дрожжах, его перенесли с помощью клонирования шлюза в вектор pYEST-DEST52 (Invitrogen, США), а затем трансформировали в Saccharomyces cerevisiae ( S . cerevisiae ) для экспрессии. Конструкцию ECFP-Venus также получали в pYEST-DEST52 для использования в качестве отрицательного контроля. Среду с жидким дрожжевым экстрактом и пептон-декстрозой (YEPD) использовали для выращивания дрожжевых клеток, которые затем индуцировали в присутствии 3% галактозы для экспрессии SenALiB-676n.Ратиометрические изображения выполняли с использованием конфокального микроскопа Leica, оснащенного программным обеспечением LAS-AF (Leica, Wetzlar; возбуждение 420/20 нм; эмиссионные фильтры 485/20 нм и 540/20 нм для ECFP и Венеры соответственно). Конфокальные изображения дрожжевых клеток показали неокрашенную вакуоль и высоко флуоресцентный цитозоль, что указывает на экспрессию SenALiB-676n в цитозоле (рис. 8а). Изменение концентрации мышьяка было визуализировано в цитозоле дрожжевой клетки при добавлении As 3+ по изменению интенсивности флуоресценции двух флуорофоров (рис.8б). При добавлении 10 мкМ As 3+ достигается изменение соотношения FRET, указывающее на поглощение мышьяка в цитозоле, где он распознается SenALiB-676n. Отношение интенсивностей эмиссии Венеры / ECFP значительно увеличилось с 0,894 в 0 сек до 1,005 за 7 мин, что затем достигает уровня насыщения, в то время как изменение отношения не было получено только с ECFP-Венера (рис. 8c). Показано, что FRET является результатом конформационных изменений ArsR при связывании As 3+ .Подобный подход, основанный на FRET, использовался ранее для изучения поглощения метаболитов путем измерения динамических изменений в соотношении FRET 45 .

Рисунок 8

In vivo количественная оценка наносенсора. ( a ) Конфокальное изображение SenALiB-676n, экспрессируемого в цитозоле S . cerevisiae . ( b ) Анализ динамики интенсивности излучения донорных и акцепторных флуорофоров при добавлении As 3+ . ( c ) График показывает изменение соотношения FRET в цитозоле одной дрожжевой клетки и сравнивается с таковым для контроля после добавления 10 мкМ As 3+ вместе с ратиометрическими изображениями.

Мониторинг SenALiB-676n в режиме реального времени в линии клеток HEK-293T

Последовательности

SenALiB-676n были перенесены в вектор pcDNA3.1 (-) (Invitrogen, США) для экспрессии варианта в клетке млекопитающих. Трансфекцию SenALiB-676n в клетки эмбриональной почки человека млекопитающих (HEK) -293T проводили для анализа активности in vivo сенсора в реальном времени. Изображения клеток HEK-293T, экспрессирующих сенсор, получали с помощью конфокальной микроскопии (возбуждение 420/20 нм; эмиссионные лазеры 485/20 нм и 540/20 нм).Успешная экспрессия SenALiB-676n наблюдалась в линии клеток млекопитающих, как показано на ратиометрических изображениях in vivo (фиг. 9a). При добавлении As 3+ интенсивность излучения ECFP уменьшалась со временем с одновременным увеличением интенсивности излучения Венеры (рис. 9b). Отношение FRET было зарегистрировано и было обнаружено, что оно увеличивалось при добавлении 10 мкМ мышьяка в зависимости от времени. Отношение 540/485 нм на базовом уровне составляло 0,896 при 0 с и быстро увеличивалось, достигая уровня насыщения 1.010 через 7 мин инкубации в присутствии As 3+ . Клеточная линия HEK-293T, трансфицированная pcDNA3.1 (-), содержащая конструкцию ECFP-Venus в качестве отрицательного контроля, не было получено значительных изменений в соотношении Venus / ECFP (фиг. 9c). Это показывает, что SenALiB-676n отвечает in vivo на As 3+ , который был добавлен извне, показывая зависимое от As 3+ увеличение отношения интенсивности двойного излучения. Экспрессия млекопитающими аналогичных генетически кодируемых сенсоров на основе FRET доказала, что эти сенсоры позволяют локализовать и обнаруживать метаболиты в клеточных и субклеточных компартментах неинвазивным образом, как продемонстрировано в случае сенсоров кадмия и лизина 42,46 .

Рисунок 9

Логометрический анализ в реальном времени SenALiB-676n в линии клеток млекопитающих. ( a ) Конфокальная визуализация наносенсора, экспрессируемого в клеточной линии HEK-293T. ( b ) Изменение двойной интенсивности излучения донорной и акцепторной молекул со временем. ( c ) Изменение соотношения Венеры / ECFP в присутствии 10 мкМ As 3+ в одной ячейке HEK-293T в течение 10 мин. График показывает логометрическое изменение по отношению к отрицательному контролю за определенный период.

Исследования цитотоксичности

Воздействие мышьяка токсично для клеток человека 47,48 , поэтому для наблюдения токсического потенциала As 3+ на клетках HEK-293T используется 3- [4,5-диметилтиазол-2 -ил] -2,5-дифенилтетразолийбромид (МТТ) был выполнен. Поскольку клетки временно трансфицировали для измерения соотношения FRET, и обработки проводились во время измерений. Таким образом, исследования клеточной токсичности проводились в течение короткого времени (4 часа) и более длительного времени (16 часов). Результаты определения жизнеспособности клеток показали, что обработка As 3+ нетоксична до 4 часов, но вызывает значительную токсичность после 16 часов воздействия (рис.10а). Мы также исследуем морфологические изменения в клетках HEK-293T после обработки 10 мкМ и 100 мкМ As 3+ с использованием фазово-контрастного инвертированного микроскопа. Было обнаружено, что мышьяк не влиял на морфологию клеток HEK-293T, когда обработка проводилась в течение 4 часов, тогда как после 16-часовой обработки морфология клеток резко изменилась (фиг. 10b). Результаты ясно показывают, что короткое время воздействия As 3+ не влияет на морфологию и не вызывает токсичности для клеток HEK-293T, но становится токсичным при увеличении времени обработки.

Рисунок 10

Исследования цитотоксичности. ( a ) Жизнеспособность клеток HEK-293T, оцененная с помощью анализа MTT. Клетки обрабатывали возрастающими концентрациями As 3+ (0–100 мкМ) в течение 4 и 16 часов. Процент жизнеспособности клеток оценивали по отношению к необработанным контрольным клеткам. Точки данных выражены как среднее ± стандартное отклонение от n = 3. ( b ) Репрезентативные изображения (20-кратное увеличение), показывающие морфологию клеток HEK-293T при различных обработках мышьяком 10 и 100 мкМ, снятые на фазово-контрастном инвертированном микроскопе.

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.


Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:

  • В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить, хотите ли вы принимать файлы cookie.
  • Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
  • Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
  • Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
  • Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.


Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файле cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

ПЦР в реальном времени с использованием технологии FRET для дифференциации видов кожного лейшманиоза Старого Света | Паразиты и переносчики

  • 1.

    Herwaldt BL. Лейшманиоз. Ланцет. 1999; 354 ​​(9185): 1191–9. DOI: 10,1016 / s0140-6736 (98) 10178-2.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 2.

    Pavli A, Maltezou HC. Лейшманиоз — новая инфекция у путешественников. Int J Infect Dis. 2010; 14 (12): e1032–9. DOI: 10.1016 / j.ijid.2010.06.019.

    Артикул PubMed Google Scholar

  • 3.

    Desjeux P. Лейшманиоз: аспекты общественного здравоохранения и борьба с ними. Clin Dermatol. 1996. 14 (5): 417–23. http://dx.doi.org/10.1016/0738-081X(96)00057-0.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 4.

    Антинори С., Джанелли Э., Калаттини С., Лонги Э., Грамичция М., Корбеллино М. Кожный лейшманиоз: возрастающая угроза для путешественников.Clin Microbiol Infect. 2005. 11 (5): 343–6. DOI: 10.1111 / j.1469-0691.2004.01046.x.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 5.

    Старк Д., ван Хал С., Ли Р., Марриотт Д., Харкнесс Дж. Лейшманиоз, новая завозная инфекция: отчет о 20 случаях из Австралии. J Travel Med. 2008; 15 (5): 351–4. DOI: 10.1111 / j.1708-8305.2008.00223.x.

    Артикул PubMed Google Scholar

  • 6.

    Перес-Аяла А., Норман Ф., Перес-Молина Дж. А., Эрреро Дж. М., Монж Б., Лопес-Велес Р. Импортный лейшманиоз: гетерогенная группа болезней. J Travel Med. 2009. 16 (6): 395–401. DOI: 10.1111 / j.1708-8305.2009.00341.x.

    Артикул PubMed Google Scholar

  • 7.

    Caumes E, Carriere J, Guermonprez G, Bricaire F, Danis M, Gentilini M. Дерматозы, связанные с поездками в тропические страны: проспективное исследование диагностики и лечения 269 пациентов, поступающих в отделение тропических болезней.Clin Infect Dis. 1995. 20 (3): 542–8.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 8.

    Гонсалес У., Пинарт М., Ревейс Л., Альвар Дж. Вмешательства при кожном лейшманиозе Старого Света (Обзор). Кокрановская база данных Syst Rev.2008 (4). DOI: 10.1002 / 14651858.CD005067.pub3.

  • 9.

    Wall EC, Watson J, Armstrong M, Chiodini PL, Lockwood DN. Эпидемиология завезенного кожного лейшманиоза в Больнице тропических болезней, Лондон, Соединенное Королевство: использование полимеразной цепной реакции для идентификации вида.AmJTrop Med Hyg. 2012. 86 (1): 115–8. DOI: 10.4269 / ajtmh.2012.10-0558.

    Артикул Google Scholar

  • 10.

    Колтас И.С., Эроглу Ф., Алабаз Д., Узун С. Появление Leishmania major и Leishmania donovani на юге Турции. Trans R Soc Trop Med Hyg. 2014; 108 (3): 154–8. DOI: 10,1093 / trstmh / trt119.

    Артикул PubMed Google Scholar

  • 11.

    Reithinger R, Dujardin JC. Молекулярная диагностика лейшманиоза: текущее состояние и будущие применения. J Clin Microbiol. 2007; 45 (1): 21.

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 12.

    Хервальдт Б.Л., Стокс С.Л., Юранек Д.Д. Американский кожный лейшманиоз у путешественников из США. Ann Intern Med. 1993. 118 (10): 779–84.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 13.

    Gangneux JP, Menotti J, Lorenzo F, Sarfati C, Blanche H, Bui H и др. Перспективное значение ПЦР-амплификации и секвенирования для диагностики и типирования инфекций старого мира Leishmania в неэндемичной зоне. J Clin Microbiol. 2003. 41 (4): 1419–22.

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 14.

    de Monbrison F, Mihoubi I., Picot S. Анализ ПЦР в реальном времени для идентификации кожных паразитов Leishmania в регионе Константин в Алжире.Acta Trop. 2007. 102 (2): 79–83. DOI: 10.1016 / j.actatropica.2007.04.001.

    Артикул PubMed Google Scholar

  • 15.

    Раманатан Р., Талаат К.Р., Федорко Д.П., Маханти С., Нэш Т.Э. Видоспецифический подход к использованию не содержащих сурьму средств лечения кожного лейшманиоза. AmJTrop Med Hyg. 2011. 84 (1): 109–17. DOI: 10.4269 / ajtmh.2011.10-0437.

    Артикул Google Scholar

  • 16.

    Томас-Перес М., Фиса Р., Риера С. Использование анализа длины флуоресцентных фрагментов (ПЦР-FFL) в прямой диагностике и идентификации кожных видов Leishmania . AmJTrop Med Hyg. 2013. 88 (3): 586–91. DOI: 10.4269 / ajtmh.12-0402.

    CAS Статья Google Scholar

  • 17.

    Bousslimi N, Ben-Ayed S, Ben-Abda I, Aoun K, Bouratbine A. Естественная инфекция североафриканского гунди ( Ctenodactylus gundi ) Leishmania tropica в очаге кожного лейшманиоза, Юго-Восток Тунис.AmJTrop Med Hyg. 2012. 86 (6): 962–5. DOI: 10.4269 / ajtmh.2012.11-0572.

    Артикул Google Scholar

  • 18.

    Стивенсон Л.Г., Федорко Д.П., Желязный А.М. Усовершенствованный метод идентификации Leishmania spp. с использованием полимеразной цепной реакции в реальном времени и анализа последовательности области гена 7SL РНК. Диагностика Microbiol Infect Dis. 2010. 66 (4): 432–5. DOI: 10.1016 / j.diagmicrobio.2009.11.005.

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 19.

    Sue MJ, Yeap SK, Omar AR, Tan SW. Применение ПЦР-ИФА в молекулярной диагностике. Biomed Res Int. 2014; 2014: 653014. DOI: 10.1155 / 2014/653014.

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 20.

    Вортманн Г., Хохберг Л., Хунг Х. Х., Суини С., Запор М., Аронсон Н. и др. Быстрая идентификация комплексов Leishmania с помощью ПЦР в реальном времени. AmJTrop Med Hyg. 2005. 73 (6): 999–1004.

    CAS Google Scholar

  • 21.

    Бен Абда I, де Монбризон Ф., Бусслими Н., Аун К., Буратбин А., Пико С. Преимущества и ограничения ПЦР-анализа в реальном времени и полиморфизма длины рестрикционных фрагментов ПЦР для идентификации кожных видов Leishmania в Тунисе. Trans R Soc Trop Med Hyg. 2011; 105 (1): 17–22. DOI: 10.1016 / j.trstmh.2010.09.003.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 22.

    Castilho TM, Camargo LM, McMahon-Pratt D, Shaw JJ, Floeter-Winter LM.Анализ полимеразной цепной реакции в реальном времени для идентификации и количественного определения видов American Leishmania на основе глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы. AmJTrop Med Hyg. 2008. 78 (1): 122–32.

    CAS Google Scholar

  • 23.

    Николас Л., Милон Г., Прина Е. Быстрая дифференциация видов Leishmania Старого Света с помощью полимеразной цепной реакции LightCycler и анализа кривой плавления. J Microbiol Methods.2002. 51 (3): 295–9.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 24.

    Ceccarelli M, Galluzzi L, Migliazzo A, Magnani M. Обнаружение и характеристика Leishmania ( Leishmania ) и Leishmania ( Viannia ) с помощью ПЦР в реальном времени на основе SYBR и высокого разрешающий анализ расплава, нацеленный на ДНК миникольца кинетопластов. PLoS One. 2014; 9 (2): e88845. DOI: 10.1371 / journal.pone.0088845.

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 25.

    Торнтон Б., Басу С. Конструирование праймеров для ПЦР в реальном времени (КПЦР) с использованием бесплатного онлайн-программного обеспечения. Биохим Мол Биол Образов. 2011; 39 (2): 145–54. DOI: 10.1002 / bmb.20461.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 26.

    Tsukayama P, Núñez JH, De Los Santos M, Soberon V, Lucas CM, Matlashewski G, Llanos-Cuentas A, Ore M, Baldeviano GC, Edgel KA, Lescano AG, Graf PC, Bacon DJ.Анализ ПЦР в реальном времени на основе FRET для выявления основных возбудителей тегументарного лейшманиоза Нового Света. PLoS Negl Trop Dis. 2013; 7 (1): e1956.

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 27.

    Чауш М., Фатхаллах-Мили А., Дрисс М., Лахмади Р., Аяри С., Гуизани И. и др. Идентификация тунисских Leishmania spp. с помощью ПЦР-амплификации генов цистеиновой протеиназы B (cpb) и филогенетического анализа.Acta Trop. 2013; 125 (3): 357–65. DOI: 10.1016 / j.actatropica.2012.11.012.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 28.

    Саканари Дж. А., Надлер С. А., Чан В. Дж., Энгель Дж. К., Лептак С., Бувье Дж. Leishmania major : сравнение генов L- и B-подобных цистеиновых протеаз катепсина с генами других трипаносоматид. Exp Parasitol. 1997. 85 (1): 63–76. DOI: 10.1006 / expr.1996.4116.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 29.

    Куру Т., Януш Н., Гадиса Е., Гедаму Л., Асеффа А. Leishmania aethiopica : разработка специфического и чувствительного диагностического теста ПЦР. Exp Parasitol. 2011; 128: 391–5.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 30.

    Лоран Т., Ван дер Аувера Дж., Хид М., Мертенс П., Киспе-Тинтайя В., Деборггрейв С. и др. Идентификация Старого Света Leishmania spp. с помощью специфической полимеразной цепной реакции амплификации генов цистеиновой протеиназы B и быстрого обнаружения с помощью тест-полоски.Диагностика Microbiol Infect Dis. 2009. 63 (2): 173–81. DOI: 10.1016 / j.diagmicrobio.2008.10.015.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 31.

    Reale S, Maxia L, Vitale F, Glorioso NS, Caracappa S, Vesco G. Обнаружение Leishmania infantum у собак с помощью ПЦР с аспиратами лимфатических узлов и кровью. J Clin Microbiol. 1999. 37 (9): 2931–5.

    CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 32.

    Degrave W, Fernandes O, Campbell D, Bozza M, Lopes U. Использование молекулярных зондов и ПЦР для обнаружения и типирования Leishmania — мини-обзор. Mem Inst Oswaldo Cruz. 1994. 89 (3): 463–9.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 33.

    Рири К.М., Расмуссен Р.П., Виттвер, Коннектикут. Дифференциация продуктов путем анализа кривых плавления ДНК в ходе полимеразной цепной реакции. Анальная биохимия. 1997. 245 (2): 154–60. DOI: 10.1006 / abio.1996.9916.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 34.

    Schwenkenbecher JM, Frohlich C, Gehre F, Schnur LF, Schonian G. Эволюция и сохранение микросателлитных маркеров для Leishmania tropica . Заразить Genet Evol. 2004. 4 (2): 99–105. DOI: 10.1016 / j.meegid.2004.01.005.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 35.

    Krayter L, Alam MZ, Rhajaoui M, Schnur LF, Schonian G. Мультилокусное микросателлитное типирование выявляет внутриочаговое генетическое разнообразие среди штаммов Leishmania tropica в провинции Чичауа, Марокко. Заразить Genet Evol. 2014; 28: 233–9. DOI: 10.1016 / j.meegid.2014.09.037.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 36.

    Wittwer CT, Reed GH, Gundry CN, Vandersteen JG, Pryor RJ. Генотипирование с высоким разрешением с помощью анализа плавления ампликонов с использованием LCGreen.Clin Chem. 2003. 49 (6.1): 853–60.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 37.

    Monis PTGS, Saint CP. Сравнение SYTO9 и SYBR Green I для полимеразной цепной реакции в реальном времени и исследование влияния концентрации красителя на амплификацию и анализ кривой плавления ДНК. Анальная биохимия. 2005; 340: 24–34.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 38.

    Робинсон БСМП, Добсон П.Дж. Быстрая, чувствительная и точная идентификация Naegleria spp. с помощью ПЦР в реальном времени и анализа кривой плавления. Appl Environ Microbiol. 2006. 72: 5857–63.

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 39.

    Talmi-Frank D, Nasereddin A, Schnur LF, Schonian G, Toz SO, Jaffe CL, et al. Обнаружение и идентификация старого мира Leishmania с помощью анализа расплава с высоким разрешением.PLoS Negl Trop Dis. 2010; 4 (1): e581. DOI: 10.1371 / journal.pntd.0000581.

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 40.

    Ямасаки Х., Агацума Т., Павон Б., Моран М., Фуруя М., Аоки Т. Leishmania major -like parasite, патогенный агент кожного лейшманиоза в Парагвае. AmJTrop Med Hyg. 1994. 51 (6): 749–57.

    CAS Google Scholar

  • 41.

    Silva Sde O, Wu AA, Evans DA, Vieira LQ, Melo MN. Leishmania sp. выделен из случаев кожного лейшманиоза у людей в Бразилии, охарактеризован как Leishmania major -like. Acta Trop. 2009. 112 (3): 239–48. DOI: 10.1016 / j.actatropica.2009.07.026.

    Артикул PubMed Google Scholar

  • 42.

    Weirather JL, Jeronimo SM, Gautam S, Sundar S, Kang M, Kurtz MA, Haque R, Schriefer A, Talhari S, Carvalho EM, Donelson JE, Wilson ME.Серийный количественный ПЦР-анализ для обнаружения, распознавания видов и количественного определения Leishmania spp. в человеческих образцах. J Clin Microbiol. 2011: 3892–904.

  • 43.

    Люк Николя Е.П. Тьерри Ланг и Женевьева Милон. ПЦР в реальном времени для обнаружения и количественного определения Leishmania в тканях мыши. J Clin Microbiol. 2002; 40 (5): 1666–9.

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 44.

    Lea Hosnjak BJK, Kusar B, Seme K, Poljak M. Быстрое обнаружение и типирование вируса Molluscum contagiosum с помощью ПЦР в реальном времени на основе FRET. J Virol Methods. 2013; 187: 431–4.

    Артикул PubMed Google Scholar

  • 45.

    Келли Уилбер Quispe-Tintaya TL, Decuypere S, Hide M, Banuls A-L, De Doncker S, Rijal S, Canavate C, Campino L, Dujardin J-C. Флуорогенный анализ для молекулярного типирования комплекса Leishmania donovani : таксономические и клинические применения.J Infect Dis. 2005; 192: 685–92.

    Артикул PubMed Google Scholar

  • 46.

    Александра Шульц К.М., Шониан Г., Флейшер Б., Дростен С. Обнаружение, дифференциация и количественное определение патогенных организмов Leishmania с помощью анализа ПЦР в реальном времени на основе флуоресцентного резонансного переноса энергии. J Clin Microbiol. 2003. 41 (4): 1529–35.

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 47.

    Rasmussen JP, Saint CP, Monis PT. Использование программного обеспечения для моделирования плавления ДНК для разработки диагностических тестов in silico: нацеливание на области со сложными кривыми плавления и подтверждение с помощью ПЦР в реальном времени с использованием интеркалирующих красителей. BMC Bioinformatics. 2007; 8: 107. DOI: 10.1186 / 1471-2105-8-107.

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 48.

    Foulet F, Botterel F, Buffet P, Morizot G, Rivollet D, Deniau M, et al. Обнаружение и идентификация видов Leishmania из клинических образцов с помощью анализа ПЦР в реальном времени и секвенирования гена цитохрома B.J Clin Microbiol. 2007. 45 (7): 2110–5. DOI: 10.1128 / jcm.02555-06.

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 49.

    Антинори С., Калаттини С., Пиолини Р., Лонги Е., Бестетти Дж., Кашио А. и др. Является ли полимеразная цепная реакция (ПЦР) в реальном времени более полезной, чем обычная ПЦР, для клинического лечения лейшманиоза? AmJTrop Med Hyg. 2009. 81 (1): 46–51.

    CAS Google Scholar

  • 50.

    Гарсия А.Л., Киндт А.К., Киспе-Тинтайя К.В., Бермудес Л., Аревало Дж., Банулс А.Л., Де Донкер С., Ле Р., Дюжарден Дж. Американский тегументарный лейшманиоз: полиморфизм антиген-ген, таксономия и клинический плеоморфизм. Заразить Genet Evol. 2005; 5: 109–16.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 51.

    Quispe Tintaya KW, Ying X, Dedet JP, Rijal S, De Bolle X, Dujardin JC. Гены-антигены для молекулярной эпидемиологии лейшманиоза: полиморфизм цистеиновой протеиназы B и поверхностного гликопротеина металлопротеиназы 63 в комплексе Leishmania donovani .J Infect Dis. 2004. 189: 1035–43.

    Артикул PubMed Google Scholar

  • 52.

    Hide M, Bañuls A-L. Видоспецифический ПЦР-анализ для дискриминации L. infantum / L. donovani . Acta Trop. 2006; 100 (3): 241–5. http://dx.doi.org/10.1016/j.actatropica.2006.10.012.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • WD Custom Pickguard для Fender American Deluxe 21 Fret Precision Bass

    Специальная накладка WD® для Fender® American Deluxe 21 Fret Precision Bass®

    Эта сменная накладка подходит только для Fender® American Deluxe 21 Fret Precision Bass®.Хотя многие производители могут изготавливать инструменты аналогичной модели, это не означает, что все накладки этого типа взаимозаменяемы. Если дизайн вашей пикгарда отличается (страна происхождения, дата производства, произведено не Fender®) от изображенного на фотографии, вам может потребоваться предоставить трассировку для индивидуального заказа.

    Если вы не уверены в выборе материала, запросите образец материала, прежде чем оформить заказ.

    Пожалуйста, обратите внимание: все пикгарды изготавливаются на заказ, и все покупки обрабатываются в том порядке, в котором они были получены.Из-за объема заказа и того, что эти продукты изготавливаются вручную, обработка вашего заказа на пикгард может занять до 5 рабочих дней. Выбор ускоренного способа доставки при оформлении заказа не ускорит обработку вашего заказа, а только время его доставки.

    [Артикул: PBAD-2100]

    Разделенная катушка

    Обратите внимание: основное изображение пикгарда — это графическое представление полученной накладки, а не фотография. Образец материала защитной накладки, показывающий скошенный край и отверстие для винта, является подлинной фотографией используемого материала и намного точнее выглядит для накладной накладки, которую вы получите.Из-за природы этих материалов и различий в экранах мобильных или настольных компьютеров, освещении или печати полученные вами защитные накладки могут немного отличаться по рисунку или оттенку от изображенного на картинке.

    Обзоры

    Накладка WD Custom для бас-гитары Fender American Deluxe 21 Fret Precision 5.0

    Отзыв Пола Рогальски

    Фантастическая кастомная накладка

    Я только что установил свою новую накладку White Pearl на Fender American Deluxe Precision Bass.Оригинал был черным на черном корпусе, не очень жирным. Специальная накладка из белого жемчуга установлена ​​идеально и была обработана до точных размеров. Теперь с этой новой накладкой мой бас выделяется на сцене.

    Накладка WD Custom для бас-гитары Fender American Deluxe 21 Fret Precision 5.0

    Отзыв Пола Джаммарко

    Желаю, чтобы в жизни все было так просто!

    Искал мою бас-гитару на сайте wd…. нашел, заказал … отследил по электронной почте Wd с подтверждением. Когда я получил и установил его, он идеально подошел и выглядел фантастически. Удивительно, как новый защитник может вдохновить вас играть больше. Как я уже сказал в теме письма. Желаю, чтобы в жизни все было так просто! Пол

    Накладка WD Custom для бас-гитары Fender American Deluxe 21 Fret Precision 5.0

    Отзыв Тимоти Фергюсона

    Идеально подходит!

    Спасибо, WD Music! Перламутровый медиатор для моего баса Fender American Precision идеально подошел! Допуски были точными! Не только точная посадка, но и сама защита отмычки КРАСИВАЯ! Заказ и доставка прошли быстро! Я буду заказывать у вас всех в будущем и очень рекомендую WD Music! Еще раз спасибо!

    Накладка WD Custom для бас-гитары Fender American Deluxe 21 Fret Precision 5.0

    Обзор Роберта Эккерта

    Накладка Smoked Mirror для P-Bass сияет!

    Это качественный товар. Идеальная подгонка. Заказал после того, как связался с Fender после того, как я не смог найти то, что хотел на их веб-сайте, и они порекомендовали WD Music, поскольку они официально имеют лицензию Fender. Фактический цвет, однако, я бы назвал скорее дымчатым стеклом, чем дымчатым зеркалом, так как он не такой отражающий, как я надеялся … оказывается, я действительно предпочитаю это!

    Накладка WD Custom для бас-гитары Fender American Deluxe 21 Fret Precision 5.0

    Отзыв Уоррена Моли

    Когда дело доходит до отмычки WD — лучший выбор

    За последние пару лет я купил у WD три новых звукоснимателя для своей басовой коллекции. Каждый из них имеет идеальную стойкость к истиранию, превосходящую защитные приспособления OEM, которые поставлялись с бас-гитарами, когда они были новыми. Если WD еще не является предпочтительным поставщиком для ведущих брендов, они должны им стать. Выбор материалов и качество изготовления на сегодняшний день самые лучшие.

    Накладка WD Custom для бас-гитары Fender American Deluxe 21 Fret Precision 4.0

    Обзор Майка Перри

    Большая разница

    Это потрясающе смотрится на моем Elite P Bass. Не был экранирован так сильно, как оригинальный блок, поэтому я добавил медную ленту. Не совсем уверен, что это вообще имеет значение. Подгонка была хорошей, не совсем идеальной. Легко добавить немного привлекательности для выравнивания отверстий. В целом доволен этим товаром и без колебаний куплю снова.

    Измерение резонансного переноса энергии флуоресценции на расстояниях в актине и миозине. Критическая оценка

  • Амос, Л. А., Хаксли, Х. Э., Холмс, К. С., Гуди, Р. С. и Тейлор, К. А. (1982) Структурные доказательства того, что миозиновые головки могут взаимодействовать с двумя участками F-актина. Природный заповедник. , 299, , 467–9.

    Google Scholar

  • Ando, ​​T. & Scales, D. (1985) Субфрагмент-1 миозина скелетных мышц индуцирует образование пучков актиновыми филаментами. Дж биол. Chem. 260 , 2321–27.

    Google Scholar

  • Барден, Дж. А. (1985) Перенос энергии флуоресценции между Tyr-69 и Cys-374 в актине. Biochem. Int. 11 , 583–9.

    Google Scholar

  • Барден, Дж. А., Кук, Р., Райт, П. Э. и Дос Ремедиос, К. Г. (1980) Исследования протонного ядерного магнитного резонанса и электронного парамагнитного резонанса на актине скелетных мышц показывают, что участки связывания металла и нуклеотида разделены. Биохимия 19 , 5912–16.

    Google Scholar

  • Барден, Дж. А. и дос Ремедиос, К. Г. (1983) Исследования G-актина протонным ЯМР высокого разрешения. В Структура и функция актина в мышечных и немышечных клетках (под редакцией душ Ремедиос, К. Г. и Барден, Дж. А.), стр. 53–62. Сидней: Academic Press.

    Google Scholar

  • Барден, Дж.A. & dosRemedios, C.G. (1984) Окружение высокоаффинного сайта связывания катиона на актине и разделение между катионным и АТФ-сайтами, как выявлено с помощью протонного ЯМР и флуоресцентной спектроскопии. J. Biochem., Токио 96 , 913–21.

    Google Scholar

  • Барден, Дж. А. и Мики, М. (1986) Расстояние, отделяющее Tyr-69 от высокоаффинных сайтов связывания нуклеотидов и металлов в актине. Biochem.Int. 12 , 321–9.

    Google Scholar

  • Барден, Дж. А., Мики, М. и дос Ремедиос, К. Г. (1986a) Селективное мечение Cys-10 на актине. Biochem. Int. 12 , 95–101.

    Google Scholar

  • Барден, Дж. А., Мики, М., Хэмбли, Б. Д. и Дос Ремедиос, К. Г. (1986b) Локализация фаллоидиновых и нуклеотид-связывающих сайтов на актине. Eur. J. Biochem . (под давлением).

  • Бхандари, Д. Г., Трейер, Х. Р. и Трейер, И. П. (1985) Доказательства резонансной передачи энергии для двух прикрепленных состояний актомиозинового комплекса. FEBS Lett. 187 , 160–6.

    Google Scholar

  • Боттс, Дж., Такаши, Р., Торгерсон, П., Ходзуми, Т., Мюльрад, А., Морнет, Д. и Моралес, М. Ф. (1984) О механизме передачи энергии в субфрагменте 1 миозина. Proc. натн. Акад. Sci. США 81 , 2060–4.

    Google Scholar

  • Брауэр М. и Сайкс Б. Д. (1982) Влияние иона марганца на спектр ядерного магнитного резонанса фосфора-31 аденозинтрифосфата, связанного с нитрованным актином. Биохимия 21 , 5934–9.

    Google Scholar

  • Брауэр М. и Сайкс Б.D. (1986) 19-F исследования ядерного магнитного резонанса селективно фторированных производных G- и F-актина. Биохимия 25 , 2187–91.

    Google Scholar

  • Burke, M. & Reisler, E. (1977) Влияние связывания нуклеотидов на близость основных сульфгидрильных групп миозина. Химическое исследование движения остатков при конформационных переходах. Биохимия 16 , 4449–53.

    Google Scholar

  • Бертник, Л. (1984) Модификация актина флуоресцеинизотиоцианатом. Biochim. биофиз. Acta 791 , 57–62.

    Google Scholar

  • Cerione, R.A. & Hammes, G.G. (1982) Структурное картирование сайтов связывания нуклеотидов на факторе связывания хлоропластов. Биохимия 21 , 745–52.

    Google Scholar

  • Чантлер, П.D. & Gratzer, W. B. (1975) Эффект специфической химической модификации актина. Eur. J. Biochem. 60 , 67–72.

    Google Scholar

  • Cheung, H.C., Gonsoulin, F. и Garland, F. (1983a) Исследования переноса энергии флуоресценции на близость двух основных тиолов субфрагмента-1 миозина. J. biol. Chem. 258 , 5775–86.

    Google Scholar

  • Чунг, Х.К., Гонсулин Ф. и Гарланд Ф. (1985) Исследование расстояний Sh2-Sh3 и Sh2-АТФазы в субфрагменте-1 миозина путем резонансной передачи энергии с использованием наносекундной флуориметрии. Biochim. биофиз. Acta 832 , 52–62.

    Google Scholar

  • Cheung, H.C. & Liu, B.-M. (1984) Расстояние между нуклеотидным сайтом и цистеином-373 G-актина по измерениям резонансного переноса энергии. J. Musc. Res. Подвижность клеток 5 , 65–80.

    Google Scholar

  • Cheung, H.C., Wang, C.K. и Garland, F. (1983b) Исследования переноса энергии флуоресценции при близости скелетного тропонина C между метионином-25 и цистеином-98. Биохимия 21 , 5135–42.

    Google Scholar

  • Кук Р. (1982) Флуоресценция как зонд сократительных систем. Meth. Энзимол. 85 , 574–93.

    Google Scholar

  • Кук Р. (1986) Механизм сокращения мышц. CRC Crit. Rev. Biochem. 21 , 53–118.

    Google Scholar

  • Кук Р., Краудер М. С. и Томас Д. Д. (1982) Ориентация спиновых меток, прикрепленных к поперечным мостикам в сокращающихся мышечных волокнах. Природа, лонд. 300 , 776–9.

    Google Scholar

  • Кук, Р., Кроудер, М. С., Вендт, К. Х., Барнетт, В. А. и Томас, Д. Д. (1984) Мышечные перемычки: вращаются ли они? В Contractile Mechanisms in Muscle (под редакцией Поллака, Г. Х. и Суги, Х.), стр. 413–27. Нью-Йорк: Пленум.

    Google Scholar

  • Крейг, Р., Триник, Дж. И Найт, П. (1986) Расхождения в длине миозиновой головки. Природа, лонд. 320 , 688.

    Google Scholar

  • Курми, П.М. Г., Барден, Дж. А. и Дос Ремедиос, К. Г. (1982) Конформационные исследования G-актина, содержащего связанный лантаноид. Eur. J. Biochem. 122 , 239–44.

    Google Scholar

  • Курми П. М., Барден Дж. А. и Дос Ремедиос К. Г. (1984) Образование актиновой трубки. Влияние различных обычно используемых условий растворителя. J. Musc. Res. Подвижность клеток 5 , 423–30.

    Google Scholar

  • Далби, Р.Э., Вейл, Дж., Перкинс, У. Дж. И Юнт, Р. Г. (1984) Разрешение множественных времен жизни флуоресценции в гетерогенных системах с помощью флуориметрии с фазовой модуляцией. J. Biochem. биофиз. Meth. 9 , 251–66.

    Google Scholar

  • Dalbey, R.E., Weiel, J. & Yount, R.G. (1983) Измерения Фёрстера переноса энергии между тиолами 1 и тиолами 2 в субфрагменте 1 миозина. Биохимия 22 , 4696–706.

    Google Scholar

  • Дейл Р. Э. и Эйзингер Дж. (1974) Определение внутримолекулярных расстояний с помощью передачи энергии. Зависимость от ориентационной свободы донора и акцептора. Биополимеры 13 , 1573–605.

    Google Scholar

  • Дейл Р. Э., Эйзингер Дж. И Блумберг В. Э. (1979) Ориентационная свобода молекулярных зондов. Фактор ориентации при внутримолекулярном переносе энергии. Biophys. J. 26 , 161–94.

    Google Scholar

  • dosRemedios, C.G. (1983) Обзор молекулярных основ сократимости. Недавно появилось новое свидетельство, которое ставит под сомнение вращающийся механизм поперечного моста. Proc. Aust. физиол. фармакол. Soc. 14 , 202–17.

    Google Scholar

  • dosRemedios, C.G. & Cooke, R. (1984) Передача энергии флуоресценции между зондами на актине и зондами на миозине. Biochim. биофиз. Acta 188 , 193–205.

    Google Scholar

  • dosRemedios, C.G., Hambly, B.D. и Barden, J.A. (1985) О нуклеотидном сайте связывания актина. В книге «Подвижность клеток : механизм и регуляция» (под редакцией Ишикава М., Хатано С. и Сато Х.), стр. 31–8. Университет Токио Пресс.

  • dosRemedios, C.G. & Mihashi, K. (1985) Новый сайт, меченный флуоресценцией, на актине скелетных мышц. Proc. Aust. биохим. Soc. 17 , 45.

    Google Scholar

  • Данн, Б.М., Фам, К., Рэйни, Л., Абаясекара, Д., Гиллеспи, В. и Хсу, А. (1981) Взаимодействие ингибиторов альфа-дансилированного пептида со свиным пепсином: обнаружение образования комплексов с помощью передачи энергии флуоресценции и хроматография и доказательства двухэтапной схемы связывания. Биохимия 20 , 7206–11.

    Google Scholar

  • Айзенберг, Э. и Грин, Л. Э. (1980) Связь биохимии мышц с физиологией мышц. Ann. Rev. Physiol. 42 , 29–309.

    Google Scholar

  • Эльзинга, М. и Коллинза, Дж. (1975) Первичная структура актина из скелетных мышц кролика. J. biol.Chem. 250 , 5897–920.

    Google Scholar

  • Эльзинга, М. и Коллинза, Дж. М. (1977) Аминокислотная последовательность фрагмента миозина, который содержит Sh2, Sh3 и N-метилгистидин. Proc. натн. Акад. Sci. США 74 , 4281–4.

    Google Scholar

  • Fairclough, R.H. и Cantor, C.R. (1978) Использование синглет-синглетного переноса для изучения макромолекулярных ансамблей Meth.Энзимол. 48 , 247–279.

    Google Scholar

  • Фликер П., Пельтц Г., Шитц М. П., Пархэм П. и Спудич Дж. А. (1985) Мономерный миозин I акантамебы поддерживает движение in vitro. J. Cell Biol. 100–1024.

  • Ферстер Т. (1965) Делокализованное возбуждение и передача возбуждения. В Modern Quantum Chemistry (под редакцией Синаноглу, О.), часть III, стр. 93–137. Нью-Йорк: Academic Press.

    Google Scholar

  • Герсман, Л. С., Селден, Л. А. и Эстес, Дж. (1986) Связывание двухвалентного катиона с мономером актина с высоким сродством намного сильнее, чем считалось ранее. Biochem. биофиз. Res. Commun. 135 , 607–14.

    Google Scholar

  • Гуди, Р. С. и Холмс, К. С. (1983) Поперечные мосты и механизм сокращения мышц. Biochim. биофиз. Acta 726 , 13–39.

    Google Scholar

  • Graceffa, P. & Seidel, J. (1980). Реакция с участием белковых сульфгидрильных групп, связанной спиновой метки и KFe (CN) в качестве зонда близости сульфгидрила в миозине. Биохимия 19 , 33–9.

    Google Scholar

  • Хэмбли, Б.Д., Барден, Дж. А., Мики, М.& dosRemedios, C.G. (1986) Структурные и функциональные домены актина. BioEssays 4 , 124–8.

    Google Scholar

  • Hardwicke, P. M. D., Walliman, T. & Szent-gyögeryi, A. G. (1983) Движение легкой цепи и регуляция в миозине гребешка. Природа, лонд. 301 , 478–82.

    Google Scholar

  • Харрингтон, У.F. (1971) Механохимический механизм мышечного сокращения. Proc. натн. Акад. Sci. США 68 , 685–89.

    Google Scholar

  • Харрингтон У. Ф. и Роджерс М. Э. (1984) Myosin. Ann. Rev. Biochem. 53 , 35–73.

    Google Scholar

  • Хатано, С., Оварибе, К., Мацумура, Ф., Хасегава, Т. и Такахаши, С.(1980) Характеристика актина, актинина и миозина, выделенных из Physarum . Canad. J. Ботаника 58 , 750–9.

    Google Scholar

  • Haugland, R.P. (1975) Измерение близости структуры миозина с помощью передачи энергии флуоресценции. J. supramolec. Struct. 3 , 338–47.

    Google Scholar

  • Хигаши, С.И Oosawa, F. (1965) Конформационные изменения, связанные с полимеризацией и связыванием нуклеотидов в молекулах актина. J. mol. Биол. 12 , 843–65.

    Google Scholar

  • Schighsmith, S. & Cooke, R. (1983) Доказательства конформационных изменений актомиозина, участвующих в генерации напряжения. Cell Musc. Подвижность 4 , 207–37.

    Google Scholar

  • Хайсмит, С.& Eden, D. (1986) Субфрагмент 1 миозина имеет третичные структурные домены. Биохимия 25 , 2237–42.

    Google Scholar

  • Hillel, Z. & Wu, C.-W. (1976) Статистическая интерпретация измерений переноса энергии флуоресценции в макромолекулярных системах. Биохимия 15 , 2105–13.

    Google Scholar

  • Хирацука, Т.(1980) Лизиловые остатки сердечного миозина, доступные для мечения с флуоресцентным реагентом, N -метил-2-анилино-6-нафталинсульфонилхлорид. J. Biochem., Токио 88 , 1437–48.

    Google Scholar

  • Хирацука Т. (1983) Новые модифицированные рибозой флуоресцентные аналоги нуклеотидов аденина и гуанина, доступные в качестве субстратов для различных ферментов. Biochim. биофиз. Acta 742 , 496–508.

    Google Scholar

  • Хирацука Т. и Учида К. (1981) Локализация и выделение пептидов в сердечном миозине, которые содержат лизильные остатки, доступные для мечения с помощью флуоресцентного реагента, N-метил-2-анилино-6-нафталинсульфонилхлорида. J. Biochem., Токио 89 , 111–123.

    Google Scholar

  • Хаксли, А.Ф. и Симмонс, Р.М. (1971) Предложен механизм генерации силы в поперечно-полосатой мышце. Природа, лонд. 233 , 533–8.

    Google Scholar

  • Хаксли, Х. Э. (1969) Механизм мышечного сокращения. Наука 164 , 1356–65.

    Google Scholar

  • Джекобсон, Дж. И Розенбуш Дж. (1976) Связывание АТФ с устойчивым к протеазам ядром актина. Proc. натн. Акад. Sci. США 73 , 2742–6.

    Google Scholar

  • Джонсон, Д. А., Воет, Дж. Г. и Тейлор, П. (1984) Перенос энергии флуоресценции между молекулами альфтоксина кобры, связанными с рецептором ацетилхолина. J. biol. Chem. 259 , 5717–725.

    Google Scholar

  • Кабш В., Маннгерц Х. Г. и Сук Д.(1985) Трехмерная структура комплекса актина и ДНКазы I с разрешением 4,5 Å. EMBO J. 4 , 2113–18.

    Google Scholar

  • Касприжик, П. Г., Андерсон, П. М. и Виллафранка, Дж. Дж. (1983) Эксперименты по переносу энергии флуоресценции с карбамоилфосфатсинтетазой Escaria coli . Биохимия 22 , 1877–82.

    Google Scholar

  • Конно, К.И Моралес, М. Ф. (1985) Воздействие актиновых тиолов путем удаления прочно удерживаемых ионов кальция. Proc. натн. Акад. Sci. США 82 , 7904–8.

    Google Scholar

  • Лакович, Дж. Р. (1983) Передача энергии в Принципах флуоресцентной спектроскопии , стр. 305–337. Нью-Йорк: Пленум Пресс.

    Google Scholar

  • Линь, Т.-И.(1978) Флуориметрические исследования актина, меченного дансилазиридином. Arch. Biochem. Биофиз. 185 , 285–99.

    Google Scholar

  • Линь, Т.-И. И Доубен Р. М. (1982) Флуоресцентные спектроскопические исследования аддуктов пирена и актина. Biophys. Chem. 15 , 289–98.

    Google Scholar

  • Ласти, К. Дж. И Фасолд, Х.(1969) Характеристика сульфгидрильных групп актина. Биохимия 8 , 2933–9.

    Google Scholar

  • Марш, Д. Дж. И Лоуи, С. (1980) Перенос энергии флуоресценции субфрагмента 1 миозина. Биохимия 19 , 774–84.

    Google Scholar

  • Мендельсон, Р. А. (1985) Длина первого субфрагмента миозина. Природа, лонд. 318 , 20.

    Google Scholar

  • Мендельсон, Р. А. и Кречмар, К. М. (1980) Структура субфрагмента 1 миозина по результатам малоуглового рассеяния рентгеновских лучей. Биохимия 19 , 4103–8.

    Google Scholar

  • Miki, M., Barden, J. A. & dosRemedios, C. G. (1986a) Флуоресцентный резонансный перенос энергии между сайтом связывания нуклеотида и Cys-10 в G-актине и F-актине. Biochim. биофиз. Acta 872 , 76–82.

    Google Scholar

  • Мики, М., Барден, Дж. А., Хэмбли, Б. Д. и Дос Ремедиос, К. Г. (1986c) Перенос энергии флуоресценции между остатками Cys-10 в филаментах F-актина. Biochem. Int. 12 , 725–31.

    Google Scholar

  • Мики, М., Барден, Дж. А. и дос Ремедиос, К. Г.(1986d) Расстояние, отделяющее Cys-10 от высокоаффинного сайта связывания металла в актине. Biochem. Int. 12 , 807–13.

    Google Scholar

  • Miki, M., Hambly, B.D. и dosRemedios, C.G. (1986b) Перенос энергии флуоресценции между сайтами связывания нуклеотидов в филаменте F-актина. Biochim. биофиз. Acta 871 , 137–41.

    Google Scholar

  • Мики, М.& Iio, T. (1984) Измерения переноса энергии флуоресценции между сайтом связывания нуклеотида и Cys-373 в актине и его применение в кинетике полимеризации актина. Biochim. биофиз. Acta 790 , 201–7.

    Google Scholar

  • Мики, М. и Михаши, К. (1977) Флуоресценция и дихроизм потока F-актин-е-АДФ: ориентация плоскости аденина относительно длинной оси F-актина. Biophys.Chem. 6 , 101–6.

    Google Scholar

  • Miki, M. и Mihashi, K. (1978) Перенос энергии флуоресценции между e-ATP в сайте связывания нуклеотида и N — (4-диметиламино-3, 5-динитрофенил) -малеимид на Cys-373 G-актина. Biochim. биофиз. Acta 533 , 163–72.

    Google Scholar

  • Мики, М., Охнума, Х.И Михаши К. (1974) Взаимодействие актина с е-АТФ. FEBS Lett. 46 , 17–19.

    Google Scholar

  • Miki, M. & Wahl, P. (1984a) Перенос энергии флуоресценции меченым G-актином и F-актином. Biochim. биофиз. Acta 786 , 188–96.

    Google Scholar

  • Miki, M. & Wahl, P. (1984b) Передача энергии флуоресценции между точками в комплексе акто-субфрагмент-1 окоченения. Biochim. биофиз. Acta 790 , 275–83.

    Google Scholar

  • Miki, M. и Wahl, P. (1985) Передача энергии флуоресценции между точками в G-актине: сайт связывания нуклеотида, сайт связывания металла и остаток Cys-373. Biochim. биофиз. Acta 828 , 188–95.

    Google Scholar

  • Моралес, М.Ф., Борейдо, Дж., Боттс, Дж., Кук, Р., Мендельсон, Р. А. и Такаши, Р. (1982) Некоторые физические исследования сократительного механизма в мышцах. Ann. Rev. Phys. Chem. 33 , 319–51.

    Google Scholar

  • Морнет, Д., Бертран, Р., Пантель, П., Одемард, Э. и Кассаб, Р. (1981) Протеолитический подход к структуре и функции сайтов узнавания актина в головках миозина. Биохимия 20 , 2110–20.

    Google Scholar

  • Морнет, Д.& Ue, K. (1984) Протеолиз и доменная организация субфрагмента 1 миозина. Proc. натн. Acad.Sci. США 81 , 736–9.

    Google Scholar

  • Мосс, Д. Дж. И Трентэм, Д. Р. (1983) Измерения расстояния между активным центром и цистеином-177 легкой щелочной цепи субфрагмента 1 из скелетных мышц кролика. Биохимия 22 , 5261–70.

    Google Scholar

  • Осава, Ф.(1983a) Физико-химические свойства отдельных филаментов F-актина. В Структура и функция актина мышечных и немышечных клеток (под редакцией dosRemedios, C.G. и Барден, J.A.), стр. 69–80. Сидней: Academic Press.

    Google Scholar

  • Oosawa, F. (1983b) Сборка макромолекул актина. В Muscle and Nonmuscle Motility (под редакцией Стрэчера А.), стр. 152–216. Нью-Йорк: Academic Press.

    Google Scholar

  • Осава, Ф.И Асакура, С. (1975) Термодинамика полимеризации белка . Лондон: Academic Press.

    Google Scholar

  • Periasamy, M., Strehler, E., Garfinkel, L., Ligubts, R., Ruiz-Opazo, N. & Nadal-Ginard, B. (1984) Легкие цепи миозина 1 и 3 быстрых скелетных мышц продуцируются из одного гена. за счет комбинированного процесса дифференциальной транскрипции и сплайсинга РНК. J. biol. Chem. 259 , 13595–604.

    Google Scholar

  • Перкинс, У. Дж., Вейл, Дж., Граммер, Дж. И Юнт, Р. Г. (1984) Введение пары донор-акцептор путем одной модификации белка. Для измерения расстояния передачи энергии от захваченного l, N6-этеноаденозиндифосфата к хромофорным сшивающим реагентам на критических тиолах субфрагмента миозина 1. J. biol. Chem. 259 , 8786–93.

    Google Scholar

  • Реймент, И.И Винкельманн Д. А. (1984) Кристаллизация субфрагмента 1 миозина. Proc. натн. Акад. Sci. США 81 , 4378–82.

    Google Scholar

  • Реккиа, Дж., Мэтьюз, К. Р., Ри, М. Дж. И Хоррокс, В. Д. Мл. (1982) Измерение расстояния между остатками в белках. Перенос энергии флуоресценции между триптофанами и комплексом Ru (III) (NH) 5-гистидин в альфа-литической протеазе и лизоциме. Biochim.биофиз. Acta 702 , 105–11.

    Google Scholar

  • Роббинс, Д. и Хардести, Б. (1983) Сравнение сайтов связывания рибонуклеиновой кислоты вхождения в рибосомы и переноса акцептора на рибосомах Escariania coli 70S. Измерения переноса энергии флуоресценции для phe-t РНК -phe на 3′-конец 16S рибонуклеиновой кислоты. Биохимия 22 , 5675–9.

    Google Scholar

  • Сакабе, Н., Сакабе, К., Сасаки, К., Кондо, Х., Эма, Т., Камия, Н., Мацусима, М. (1983) КриСталлографические исследования комплекса G-актин-ДНКаза I в желудке курицы с разрешением 5Å. J. Biochem., Токио 93 , 299–302.

    Google Scholar

  • Секин Т. и Кейли У. (1964) Ферментативные свойства миозина, модифицированного N-этилмалеимидом. Biochim. Биофиз. Acta 81 , 336–45.

    Google Scholar

  • Секин, Т.И Ямагучи, М. (1963) Эффект АТФ на связывание N-этилмалеимида с SH-группами в активном центре миозиновой АТФазы. J. Biochem. Токио 54 , 196–202.

    Google Scholar

  • Сани, Р. В. и Берли, Р. В. (1973) Сайт действия сульфгидрильных спиновых меток со скелетным актином. Arch. Biochem. Биофиз. 159 , 792–801.

    Google Scholar

  • Штрелер, Э.E., Strehler-Page, M.-A., Perriard, J.-C., Periasamy, M. & Nadal-Ginard, B. (1986) Полная нуклеотидная и кодируемая аминокислотная последовательность гена тяжелой цепи миозина млекопитающих. Доказательства против интрон-зависимой эволюции стержня. J. Mol. Биол. 190 , 291–317.

    Google Scholar

  • Страйер, Л. (1978) Перенос энергии флуоресценции как спектроскопическая линейка. Ann. Rev. Biochem. 47 , 819–46.

    Google Scholar

  • Страйер, Л. и Хаугланд, Р. П. (1967) Передача энергии: спектроскопическая линейка. Proc. натн. Акад. Sci. США 58 , 719–26.

    Google Scholar

  • Suck, D., Kabsch, W. & Mannherz, H.G. (1981) Трехмерная структура комплекса актина скелетных мышц и ДНКазы I поджелудочной железы крупного рогатого скота с разрешением 6Å. Proc. натн. Акад. Sci. США 78 , 4319–23.

    Google Scholar

  • Sutoh, K. (1982) Актин-связывающий сайт на 20К фрагменте миозинового субфрагмента 1. Биохимия 21 , 3654–61.

    Google Scholar

  • Суто К., Ямамото К. и Вакабаяши Т. (1984) Электронно-микроскопическая визуализация тиола Sh2 миозина с использованием системы авидин-биотин. J. mol. Биол. 178 , 323–39.

    Google Scholar

  • Takashi, R. (1979) Передача энергии флуоресценции между субфрагментом 1 и актиновыми точками в комплексе окоченения акто-субфрагмента-1. Биохимия 18 , 5164–9.

    Google Scholar

  • Takashi, R. (1980) цитируется из Cooke, R .. (1982) Meth. Энзимол. 85 Часть B, 595.

    Google Scholar

  • Такаши Р., Мюльрад А. и Боттс Дж. (1982) Пространственная взаимосвязь между быстро реагирующим тиолом и реактивным остатком лизина субфрагмента 1 миозина. Биохимия 21 , 5661–8.

    Google Scholar

  • Такаши Р., Торгерсон П. М. и Дюк Дж. А. (1984) Близость тиола LC2 к реакционноспособному лизину тяжелой цепи миозина. Biophys. J. 45 , 223а.

    Google Scholar

  • Танигучи, М. (1976) Двухфазные превращения F-актина. Влияние мочевины и MgCl 2 на F-актин. Biochim. биофиз. Acta 427 , 126–40.

    Google Scholar

  • Tao, T. и Lamkin, M. (1981) Изучение передачи энергии возбуждения на близость между SHI и сайтом аденозинтрифосфатазы в субфрагменте 1 миозина. Биохимия 20 , 5051–5.

    Google Scholar

  • Tao, T., Lamkin, M. & Lehrer, S. S. (1983) Исследования передачи энергии возбуждения на основе близости между тропомиозином и актином реконструировали тонкие волокна скелетных мышц. Биохимия 22 , 3059–66.

    Google Scholar

  • Тейлор, Д. Л., Рейдлер, Дж., Спудич, Дж.А. и Страйер, Л. (1981) Обнаружение сборки актина путем передачи энергии флуоресценции. J. Cell Biol. 89 , 362–7.

    Google Scholar

  • Тоошима, К. и Вакабаяси, Т. (1985) Анализ трехмерного изображения комплекса тонких нитей и молекул миозина из скелетных мышц. V. Отнесение актина к комплексу субфрагмента 1 акто-тропомиозинмиозина. J. Biochem., Токио 97 , 245–63.

    Google Scholar

  • Трейер, Х. Р. и Трейер, И. П. (1983) Перенос энергии флуоресценции между изоферментами субфрагмента-1 миозина и F-актином в отсутствие и в присутствии нуклеотидов. Eur. J. Biochem. 135 , 47–59.

    Google Scholar

  • Tregear, R. (1986) Мосты, сила и движение. Природа, лонд. 321 , 563.

    Google Scholar

  • Vanderkerckhove, J. & Weber, K. (1979) Полная аминокислотная последовательность актинов из аорты крупного рогатого скота, сердца крупного рогатого скота, быстрых скелетных мышц крупного рогатого скота и медленных скелетных мышц кролика. Белковый химический анализ дифференцировки мышечного актина. Дифференциация 14 , 123–33.

    Google Scholar

  • Виберт П. и Крейг Р.(1982) Трехмерная реконструкция тонких нитей, украшенных миозином Caregulated. J. mol. Биол. , 157, , 299–320.

    Google Scholar

  • Виберт П., Сенткирали Э., Хардвик П., Сентёрджи А. Г. и Коэн К. (1986) Структурные модели регуляторного переключателя миозина. Biophys. J. 49 , 131–3.

    Google Scholar

  • Вайль, Дж., Perkins, W. J. & Yount, R. G. (1982) Использование анализа времени жизни флуоресценции с фазовой модуляцией для определения пространственных отношений в субфрагменте один миозина (SF1) путем передачи энергии. Biophys. J. 37 , 265а.

    Google Scholar

  • Уэллс, Дж. А. и Юнт, Р. Г. (1980) Реакция 5,5′-дитиобис (2-нитробензойной кислоты) с субфрагментом один миозина: доказательства образования единственного дисульфида белка с захватом металлического нуклеотида в активном центре. Биохимия 19 , 1711–17.

    Google Scholar

  • Ямамото, К., Токунага, М., Суто, К., Вакаба-Яши, Т. и Секин, Т. (1985) Локализация группы SH щелочной легкой цепи на миозиновой головке, обнаруженная с помощью электронной микроскопии. J. mol. Биол. 183 , 287–90.

    Google Scholar

  • Yanagida, T. (1981) Углы нуклеотидов, связанных с поперечными мостиками в глицериновых мышечных волокнах при различных концентрациях e-ATP, e-ADP и e-Amppnp, обнаруживаемых поляризованной флуоресценцией. J. mol. Биол. 146 , 539–49.

    Google Scholar

  • Янг, К. и Солл, Д. (1974) Исследования третичной структуры трансферной РНК с помощью синглет-синглетной передачи энергии. Proc. натн. Акад. Sci. США 71 , 2838–42.

    Google Scholar

  • Три ежедневных шага к совершенству цвета лица — Urban Aesthetics

    В Urban Aesthetics мы знаем, что постоянство является ключом к достижению здоровой, сияющей кожи.Но когда дело доходит до активного ухода за кожей, варианты могут быть устрашающими. От ультра-увлажняющих кремов до сывороток, разглаживающих тонкие линии и морщины, выбор лучших продуктов для баланса вашей кожи может показаться непростой задачей.

    Если вы когда-либо пытались разгадать бесчисленное множество зелий и лосьонов, вам не о чем беспокоиться. Читайте дальше, чтобы узнать, как вы можете освоить базовый трехэтапный распорядок и быстро сделать свою кожу безупречной.

    Шаг 1. Очищение.

    Если вы хотите сохранить здоровую и сияющую кожу, вам следует начать с приобретения хорошего и качественного очищающего средства.Чтобы убедиться, что вы используете идеальную формулу (молоко, сливки, мягкую пену или гель) для конкретных потребностей вашего лица, вам нужно начать с консультации со своим экспертом по уходу за кожей UA. Это потому, что каждая формула разработана с учетом уникальных потребностей вашей кожи. Также помните, что последовательность является ключевым моментом. Чтобы получить максимальную отдачу от целенаправленного очищения, не забывайте мыться дважды в день: утром и вечером.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

    2019 © Все права защищены. Карта сайта