Лада гранта что входит в комплектацию норма: Лада Гранта Норма - цена, фото, отзывы Lada Granta в комплектации Норма - Автозапчасти ВАЗ

Лада Гранта: Комплектации Лада Грант

Оборудование	Стандарт	Норма	Люкс	Люкс+
Безопасность
Передняя подушка безопасности водителя	+	+	+	+
Передняя подушка безопасности пассажира	–	–	+	+
Боковые подушки безопасности седоков	–	–	–	+
Трехточечные ремни безопасности для пяти седоков	–	+	+	+
Преднатяжители ремней безопасности	–	–	+	+
Крепления Isofix	+	+	+	+
АБС	–	–	+	+
Система динамической стабилизации	–	–	–	+
Противотуманные фары	–	–	+	+
Подголовники для задних пассажиров	–	–	+	+
Экстерьер
Бамперы в цвет кузова	–	+	+	+
Зеркала и дверные ручки в цвет кузова	–	–	+	+
Хромированный молдинг на решетке радиатора	–	+	+	+
Черные рамки дверей	–	–	+	+
Колпаки на колесах	–	–	–	–
Легкосплавные колеса	–	–	+	+
Комфорт
Воздушный фильтр салона	–	+	+	+
Кондиционер	–	–	+	+
Теплопоглащающие тонированные стекла	–	+	+	+
Электроподогрев лобового стекла	–	–	–	+
Электроусилитель рулевого управления	–	+	+	+
Регулируемая по углу наклона рулевая колонка	–	+	+	+
Центральный замок/дистанционный	–/–	+/–	+/+	+/+
Электропривод и обогрев наружных зеркал	–	–	+	+
Электростеклоподъемники передние/задние	–/–	+/–	+/+	+/+
Обогрев передних сидений	–	–	+	+
Пепельница и прикуриватель	–	+	+	+
Электропривод замка крышки багажника	–	+	+	+
Электроника
Электропроводка для подключения динамиков	–	+	+	+
Радиоприемник с CD-проигрывателем	–	–	+	+
Навигационная система	–	–	–	+
Датчики освещенности и дождя	–	–	–	+
Маршрутный компьютер	–	+	+	+
Задний парктроник	–	–	–	+
Практичность
Складное заднее сиденье с цельной/раздельной спинкой	+/–	+/–	–/+	–/+
Обивка багажника и кронштейны для крепления груза	+	+	+	+
Декоративные вставки в передних дверях	–	+	+	+
Карманы в передних дверях	+	+	+	+
Подстаканники на центральном тоннеле	+	+	+	+
Зеркало в солнцезащитном козырьке пассажира	–	–	+	+
Контейнер для очков	–	–	+	+
Дополнительные уплотнители порогов	–	–	+	+
Полнозарзмерное запасное колесо	+	+	+	+

Lada Granta седан Classic Start 1.

6 87hp 5MT

Тип топлива:	бензин
Конструкция двигателя, число цилиндров:	R4
Семейство двигателей:	инжектор
Рабочий объём, см3:	1596
Мощность, л.с.:	87
Максимальный крутящий момент, Н·м:	140
Вид топлива:	бензин АИ-95
Норма токсичности выхлопных газов:	Евро-4
КПП:	механика
Понижающая передача:	нет
Привод:	передний
Время разгона 0-100 км/ч, с:	12. 2
Максимальная скорость, км/ч:	167
Расход топлива в городском цикле, л/100км:	9.0
Расход топлива в загородном цикле, л/100км:	5.8
Расход топлива в смешанном цикле, л/100км:	7.0
Объем топливного бака, л:	50
Снаряженная масса, кг:	1160
Грузоподъемность, кг:	400
Разрешенная нагрузка на оси (переднюю/заднюю), кг:	810/850
Разрешенная масса буксируемого прицепа с тормозами, кг:	900
Разрешенная масса буксируемого прицепа без тормозов, кг:	450
Длина, мм:	4260
Ширина, мм:	1700
Высота, мм:	1500
Колесная база, мм:	2476
Дорожный просвет, мм:	160
Объем багажника, л:	520
Объем грузового отсека, м3:	0. 0

Lada Granta 2011 — 2018

Вы смотрите поколение, которое уже отсутствует в продаже.
Больше информации о модели можно найти на странице последнего поколения:

Последнее поколение Lada Granta

Все поколения Lada Granta

Lada Granta новинка завода АвтоВАЗ, претендующая на звание «народного автомобиля». На конвейере флагмана российского автопрома этот автомобиль должен заменить «классический» модельный ряд. Таким образом, на ВАЗе в скором будущем не станет заднеприводных моделей. Снимут с производства и устаревший автомобиль Lada Samara? а в последствие и Lada Kalina от которой происходит Granta.Специалисты тольяттинского завода постарались сделать автомобиль, отвечающий всем современным требованиям, предъявляемым к автомобилю, и в то же время остаться в рамках минимальных по автомобильному рынку цен. В результате Granta стала существенным шагом вперед как с точки зрения дизайна, так и по оснащению.Правда, в минимальной комплектации «стандарт» в оснащение Granta входят только подушка безопасности водителя, крепления для детских кресел и дневные ходовые огни. Двигатель в этой версии старый 80 сильный от Lada Kalina. Но и такой уровень комплектации — это уже гораздо больше, чем можно было получить в «классике».В комплектации «второго уровня» «норма» уже есть электроусилитель руля, бортовой компьютер, передние электростеклоподъемники, центральный замок и противоугонная система. Кроме того здесь устанавливается двигатель, по словам разработчиков, специально спроектированный для новинки 1,6 литра 90 л.с. и 140 Нм крутящего момента начиная с 3800 оборотов.Наконец третья, самая дорогая версия, которая должна появиться только летом 2012 года, предоставит в распоряжение владельца такие элементы как ABS c Break Assist, ремни безопасности с преднатяжителями, две фронтальные подушки безопасности, подогрев передних сидений, кондиционер, зеркала с обогревом и элекрорегулировками, атермальные стекла, электростеклоподъемники на всех дверях, а кроме того еще и легкосплавные колесные диски. Эта версия получит и самый мощный мотор в 98 л.с.Заявленный производителем расход топлива един для всех модификаций 7,2 литра в смешанном цикле. Базовой для Granta будет пятиступенчатая механическая коробка передач, но в перспективе появится и четырехступенчатый автомат производства японской компании Jatco. На этом «инновации» не заканчиваются. Задняя подвеска Lada Granta получила «отрицательный» угол развала колес. Наравне с оптимизированной передней подвеской это должно обеспечить большую устойчивость автомобиля как на прямой, так и в поворотах, в сравнении с предшествующими переднеприводными моделями.При том, что Lada Granta построена на платформе Kalina она длиннее предшественницы на 24 см. Увеличена и колесная база.С целью удешевления конструкции были произведены некоторые упрощения позволившие существенно сократить количество деталей.В будущем линейка Lada Granta может быть дополнена кузовами хэтчбек универсал.

Технические характеристики Lada Granta поколения I

седан

Городской авто

ширина
1 700мм
длина
4 260мм
высота
1 500мм
клиренс
160мм
мест
5

Двигатель	Название	Топливо	Привод	Расход	До сотни	Макс. скорость
1.6 MT (87 л.с.)	Норма S	АИ-95	Передний	5,8 / 9	12,2 с	167 км/ч
1.6 MT (87 л.с.)	Норма Классик	АИ-95	Передний	5,8 / 9	12,2 с	167 км/ч
1.6 MT (87 л.с.)	Норма Классик плюс	АИ-95	Передний	5,8 / 9	12,2 с	167 км/ч
1.6 MT (87 л.с.)	Стандарт	АИ-95	Передний	5,8 / 9	12,2 с	167 км/ч
1. 6 MT (87 л.с.)	Стандарт плюс	АИ-95	Передний	5,8 / 9	12,2 с	167 км/ч
1.6 MT (98 л.с.)	Люкс	АИ-95	Передний	5,6 / 8,6	10,9 с	183 км/ч
1.6 MT (98 л.с.)	Люкс Навигация	АИ-95	Передний	5,6 / 8,6	10,9 с	183 км/ч
1.6 MT (98 л.с.)	Норма SE+	АИ-95	Передний	5,6 / 8,6	10,9 с	183 км/ч
1. 6 AT (98 л.с.)	Люкс	АИ-95	Передний	5,2 / 9	12,3 с	180 км/ч
1.6 AT (98 л.с.)	Люкс Навигация	АИ-95	Передний	5,2 / 9	12,3 с	180 км/ч
1.6 AT (98 л.с.)	Норма S	АИ-95	Передний	6,1 / 9,9	13,3 с	173 км/ч
1.6 AT (98 л.с.)	Норма SE+	АИ-95	Передний	5,2 / 9	12,3 с	180 км/ч
1. 6 AT (98 л.с.)	Норма Классик плюс	АИ-95	Передний	5,2 / 9	12,3 с	180 км/ч

Ищите отзывы о Lada Granta?

Посмотреть отзывы о Lada Granta

Сделано тест-драйвов:

2 8 5 8

Гранта — комплектация Норма 033. Запускаем штатную охранную систему.

14.07.2015 Ответы на вопросы, Протестировано нами

Автомобиль Гранта. Комплектация по спецификации дилера — Норма 033. Графа — Центральный замок с дистанционным управлением. Прочерк, то есть отсутствует. Несколько раз приезжали такие автомобили на установку сигнализации. Основное требование клиентов — хочу лентяйку, двери открывать — закрывать. Все не было возможности и времени изучить автомобиль хорошо. Наконец-то время появилось, да и автомобиль этой комплектации подвернулся.

Что нас смутило, почему возник вопрос с изучением электрики автомобиля. Самое основное, что бросается в глаза — модуль водительской двери для управления стеклоподъемниками. Он не силовой, а значит на автомобиле установлен блок кузовной электроники. Тогда почему же нет пультов управления?

Начинаем разбираться, ведь если блок такой же, как на автомобилях в люксовом исполнении, то что мешает нам прописать туда штатный пульт управления? Вскрываем модуль и проверяем есть ли в нем схема радиоканала. Да, есть. Да и вряд ли производитель будет заморачиваться с изготовлением нескольких вариантов блоков электроники. Приобретаем пульт и проводим процедуру обучения. Процедура прошла штатно, правда не было звукового сигнала при завершении программирования. Но пульт заработал, двери открывает и закрывает.

Проверяем охранные возможности. Вскрываем закрытый пультом автомобиль личинкой замка двери и наблюдаем мигание поворотниками, но опять же без звукового тревожного сигнала. Проверяем колодку блока кузовной электроники и видим, что провод на тревожный сигнал из нее выходит. А вот самого сигнала то и нет. Странная экономия производителя, вернее странный подход к конфигурации комплектаций. Не думаю, что исключив пульт управления, звуковой сигнал и 4 концевика, производитель выпустил на рынок намного более дешевую комплектацию, тем более пучок проводов остался полноценный. А вот для пользователя эта конфигурация вылилась в заботы по доводке до ума своего автомобиля. Да и вообще, зачем нужны такие комплектации, непонятно совершенно.

Проводка на концевые кнопки тоже присутствует, правда самих концевиков не наблюдаем, что и не удивительно. Провод на концевик капота так же есть в пучке панели приборов, но под капот он не выходит. Придется его протянуть самостоятельно.

Копаем дальше. Опция открывания багажника с пульта — работает. Последнее, что осталось проверить — доводка стекол при постановке на охрану. Нажимаем и удерживаем кнопку постановки на охрану. Стекла закрылись. Нажимаем кнопку снятия с охраны и удерживаем — стекла открылись.

Устанавливаем концевики дверей, капота, устанавливаем звуковой сигнал, подключаем дополнительно датчик удара и готово. Автомобиль получил штатную охранную систему с опцией контроля ударов по кузову.

Обзваниваю несколько знакомых установочных центров и задаю вопрос: А не пытались ли Вы доукомплектовать автомобили этой комплектации штатной охранной системой, ведь блок электроники установлен. Получил ожидаемый ответ: А зачем пытаться? На этом много не заработаешь …

Обзор комплектаций Лада GRANTA

Лада Гранта – автомобиль бюджетного класса, сошедший с конвейера Волжского автомобильного завода в 2011 году. Построенный на базе более старой модели — Лада Калина, с кузовом седан и передним приводом. Данный представитель семейства ВАЗ имеет несколько конфигураций, отличающихся между собой мощностью двигателя, типом КПП и дополнительными опциями.

Стандартная комплектация данной модели – лада гранта стандарт, имеет 5-ти ступенчатую механическую коробку передач. Двигатель, объемом 1596 куб./см., который разгонит автомобиль от 0 до 100 км/час за 12.6 секунды, а максимальная скорость, которую он сможет развить, составляет 165 км/час. Расход бензина при таких характеристиках двигателя составляет в среднем 7,5 литров на 100 км.

Из дополнительных опций, лада гранта стандарт имеет электро-стеклоподъемники, и стандартную аудиоподготовку.

Модификация Гранта норма

Одна, из наиболее распространенных и часто используемых модификаций – лада гранта норма, которая, по планам АвтоВАЗа, должна превысить число продаваемости в несколько раз, по сравнению с модификациями стандарт и люкс.

Автомобиль в комплектации «Норма»

Двигатель в ней не сильно отличается от стандартного по своим характеристикам. Единственное, что было изменено в нем – увеличенная мощность. Вместо стандартных 80 л.с., двигатель комплектации «норма» выдавал аж 87 л.с., при этом практически не изменив максимальную скорость – 167 км/час.

Кардинальные изменения версии «норма» отразились на комфорте автомобиля, в виду дополнительных опций. Первое, что привлечет Ваше внимание, как только Вы сядете в салон – это материал, из которого пошиты чехлы сидений. В отличии от дешевых чехлов комплектации «стандарт», эти выполнены из гобелена, что делает их намного приятнее на ощупь, и придают очень красивый внешний вид. А также, такой материал обладает повышенной износостойкостью.

Также, комфорта прибавит регулируемая рулевая колонка. Теперь, для выбора удобного положения за рулевым колесом, водитель может использовать не только регулировку сидений, а и руля.

В данной модификации, помимо электростеклоподъемников, есть функция открытия багажника кнопкой изнутри салона, чего не было в комплектации Гранта стандарт, и дополнительно установлен центральный замок.

Модификация Гранта люкс

Лада гранта люкс является самой дорогой, а также наиболее современной и функциональной среди всего ряда «гранта».

В комплектации ЛЮКС достпна магнитола с ЖК экраном и «автомат»

Начнем с коробки передач. В данной модификации, коробка имеет функцию автоматической блокировки, которая предотвращает ошибочное включение передачи заднего хода. Смена передачи происходит за счет троса привода управления, что повышает четкость включения передачи, уменьшает усилие на рычаг переключения и уменьшает износ шестеренок коробки.

Двигатель остался без изменений, кроме увеличенной мощности до 90 л.с.

А вот что касается внутреннего обеспечения и комфорта, то лада гранта люкс намного опережает своих предшественников. Например, вместо обычной аудиоподготовки, тут установлена автомагнитола нового поколения, имеющая 7 – дюймовый сенсорный дисплей. Встроенный GPS – навигатор, на котором будет отображаться включенная передача, в случае комплектации с автоматической коробкой передач.

Помимо того, что в гранте люкс есть центральный замок, как и у ее предшественниц, он управляется дистанционно, как и открытие багажника. Зеркала заднего вида оснащены подогревом, и имеют электропривод для регулировки. Передние сидения также оснащены подогревом. Имеются датчики света и дождя, противотуманные фары.

Что касается управления, то на данной модификации установлен гидроусилитель руля, а также антиблокировочная система тормозов и система контроля устойчивости. А по вопросу безопасности – имеются боковые и передние подушки безопасности, травмобезопасный руль и ремни безопасности, ограничивающие напряжение на грудь во время столкновения.

Модификация Гранта лифтбек люкс

Лада Гранта Лифтбек Люкс – это совершенно новый штрих проявления фантазии дизайна автомобиля. В отличии от остальных модификаций, она получила наиболее крупные внешние изменения.

LADA Granta в типе кузова «лифтбек»

В отличии от приевшегося нам, скучного дизайна Гранты, Лада Гранта Лифтбек Люкс имеет стремительный, агрессивный характер. Идея такого дизайна позаимствована у автомобилей марки Рено.

Что же именно было изменено в комплектации Лада Гранта Лифтбек Люкс? Давайте рассмотрим подробнее.

Внутренние изменения:

Оригинальная ручка коробки передач;
Новые материалы отделки салона;
Серебристая окантовка воздуховодов и поручней.

Наружные изменения:

Уникальный дизайн заднего и переднего бамперов;
Измененный кузов;
Полностью поменян дизайн оптики.

Существует две вариации двигателя: 8 и 16 клапанный. 8-ми клапанный не отличается от версии «Люкс», а вот 16-ти клапанный имеет увеличенную мощность в 106 л. с.

Комплектация лада гранта. Плюсы и минусы Лада Гранта Люкс

Общий рейтинг модели

Здравствуйте! Хочу выразить огромную благодарность за покупку автомобиля Лада Гранта 25.01.2020. всему коллективу автосалона Автогермес, Мо…

Александр | 27 янв

Приехал с подругой в автосалон на Каширке на своей машине в техцентр. Пообщавшись с менеджером Альбертом Амирханяном, я поняла, что машина Lada Granta для меня легкая…

Елена | 21 декабря

Здравствуйте! В последний день ноября мы решили приобрести автомобиль Лада Гранта по адресу Автогермес Каширское шоссе, 41.s2 У нас появился самый неординарный менеджер…

Елена | 5 декабря

Куплена первый раз в субботу с женой. новый автомобиль Лада Гранта в АвтоГермес Каширское шоссе 41.с2. Выражаю благодарность всему персоналу…

Ильдар | 3 декабря

Добрый день! Совсем недавно купил автомобиль Лада Гранта в автосалоне на Каширском шоссе. Это вторая новая машина, которую я купил в…

Евгений | 26 июн

Купил новый автомобиль Лада Гранта по системе трейд-ин. Впечатления от автосалона и его сотрудников только самые положительные.Особенно хочу…

Светлана | 22 мая

Купил автомобиль Лада Гранта в салоне на Каширке 41. Порадовала слаженная работа всех сотрудников салона. Машину сделали быстро. Особо хочу отметить…

Павел | 5 мая

Дополнение к отзыву (Купил ладу гранту 26.01.2019) Компания Автогермес, начальники отдела продаж, позвонили лично, принесли извинения за неаккуратные действия своих…

Нестеров Денис | 3 февраля Здравствуйте! Хочу выразить огромную благодарность за покупку автомобиля Лада Гранта 25.01.2020.всему коллективу автосалона «Автогермес» г. Москва, ул. Сормовская 21 а. Особо хочу отметить профессиональную работу менеджеров Петра Солдатова и его коллеги Игоря (фамилию извините не знаю), общение с ними вызывает только положительные эмоции, на все вопросы получила подробные и компетентные ответы.

Оформление автомобиля заняло два часа – это отличный показатель работы слаженной команды. С удовольствием буду рекомендовать ваш автосалон для покупки автомобиля.Спасибо за вашу работу и отношение к клиентам, желаю больших продаж и крепкого здоровья всему коллективу Автогермес. С уважением, Александр. закрыть Приехал с подругой в автосалон на Каширке на своей машине в техцентр. Пообщавшись с менеджером Альбертом Амирханяном, я понял, что мне просто необходим автомобиль Lada Granta. Остался доволен внимательным отношением к клиентам, сотрудников салона, человеческим отношением. Отдельное спасибо руководству автосалона, за грамотный подбор сотрудников.закрыть Здравствуйте! В последний день ноября мы решили приобрести автомобиль Lada Granta по адресу Автогермес Каширское шоссе 41.с2. К нам попал самый неординарный менеджер Александр Ковешников. В премиальном смысле слова «был до последнего клиента». Огромное ему человеческое спасибо за терпение и понимание. Спасибо Триодину Илье, который не оставил нас без внимания и подарил подарки.

Я всегда буду рассчитывать на их помощь. :). Еще раз большое спасибо Александру Ковешникову. Мы были довольны.С уважением к вам, Елена и Ильдар. закрыть В субботу мы с женой впервые приобрели новый автомобиль Лада Гранта в АвтоГермес Каширское шоссе 41.с2. Хочу выразить благодарность всем сотрудникам автосалона. Отдельное спасибо Триодину Илье, менеджеру, милой девушке из отдела страхового кредитования и сотруднику банка Павлу. Большое спасибо менеджеру по продажам Александру Ковешникову!!! Ребята не ходите к серым дилерам, идите к официалам.закрыть Добрый день! Совсем недавно я купил автомобиль Лада Гранта в автосалоне на Каширском шоссе. Это второй новый автомобиль, который я приобрел в Autogermes. Обычно не пишу отзывы, но решил поделиться. Совершая повторную сделку по покупке нового автомобиля в Автогермес, я невольно сравнил качество работы менеджера автосалона, и, к счастью, в этот раз все прошло намного лучше и без неприятных сюрпризов, как в прошлый раз. Обратите внимание на качество работы менеджера по имени Олег Шек.

При первом посещении я не был на 100% уверен в покупке. Олег доходчиво объяснил, какие машины есть в наличии из тех комплектаций, которые я присмотрел, и сразу показал машину, на которой я сейчас езжу :). доходчиво и понятно объяснил какие выгоды я могу получить, если совершу покупку в ближайшие 1-2 дня, порекомендовал внести предоплату за машину, а дополнительным аргументом, убедившим меня в покупке, стал тот факт, что завод начал установку новый тип поршневой группы, так называемая «бесконтактная конструкция», не знаю как Олег догадался, но этот момент оказался для меня крайне важным и я решился на покупку.Приехав в оговоренный день подавать заявку на кредит, я заметил еще один плюс. Машина уже была готова к сдаче и я был доволен. Все оформление прошло гладко, и после обеда я уехал на новенькой машине. Данным отзывом хочу выразить благодарность Олегу Шеку и администрации автосалона за слаженную и качественную работу! закрыть

В предоставленном видео представлен полный обзор версии автомобиля, выпущенной в 2013 году. Данная модель является модернизированной версией, так как построена на базе этого автомобиля.При этом автомобиль претерпел множество изменений, поэтому его отнесли к С-классу (см. фото). АвтоВАЗ начал серийное производство этой модели в 2013 году. Сегодня отечественный авторынок предлагает несколько разновидностей Lada Grant, топовой из которых считается комплектация класса люкс. Более подробно это обсуждается ниже.

Обзор модели Лада Гранта в комплектации люкс

Обладает массой достоинств, среди которых стоит отметить вместительность багажника и подушку безопасности для водителя, они хорошо рассмотрены в видео.При этом топовая комплектация Лады оснащена большим количеством доработок, касающихся внешнего вида кузова, салона, безопасности, комфорта и электрооборудования автомобиля, что также показано в представленном видео.

Пакет Lux 2013 года имеет следующие дополнительные усовершенствования, недоступные в комплектациях Standard и Norm:

ремни безопасности с преднатягом;
тормозная система ABS и B. A.S.
черная рамка на двери с наличием молдингов;
боковые зеркала перекрашены в цвет автомобиля;
электрические стеклоподъемники на всех дверях;
атермальные стекла;
климатическая система с кондиционером;
подогрев передних сидений;
электропривод регулировки боковых зеркал со встроенным подогревом;
улучшенный бортовой компьютер;
;
дистанционное управление дверными замками и крышкой багажника.

Технические характеристики Lada Granta Lux 2013

Автомобиль Лада Гранта люкс 2013 года выпуска

Топовая комплектация оснащена бензиновым 4-цилиндровым 16-клапанным двигателем объемом 1,6 л и мощностью 98 л.с. при 5600 об/мин, что подробно видно на видео. Его экологический стандарт соответствует стандарту Euro IV. Автомобиль комплектуется 2-мя различными типами трансмиссии:

5-ступенчатая механическая коробка передач;
4-ступенчатая автоматическая коробка передач.

Коробка автомат поставляется на завод АвтоВАЗ японской компанией Jatco.

Эта модель оснащена 15-дюймовыми легкосплавными дисками. С механической коробкой передач Lada Granta Lux может развивать скорость до 182 км/ч. Максимальная скорость с АКПП — 167 км/ч. Автомобиль потребляет 8,8 литров на 100 км в условиях городской езды. Отзывы владельцев верхней позиции свидетельствуют о том, что этот расход является минимальным среди всех комплектаций автомобиля.

Характеристики Лада Гранта люкс плюс

Внешний вид и интерьер комплектации люкс плюс не отличаются от рассмотренной в видео позиции люкс.Изменения в основном коснулись технического оснащения автомобиля. В то же время изменилась и электрическая схема Lada Granta Lux Plus, так как эта модель оснащена новейшей системой навигации Глонасс.

Среди доработок следует отметить появление системы динамической стабилизации ESP. Lada Granta — первый автомобиль, оснащенный такой технологией. Центральная консоль этой модели оснащена 7-дюймовым сенсорным монитором. Бортовой компьютер напрямую связан с аудиосистемой и другими важными узлами автомобиля, что позволяет проводить все необходимые манипуляции и настройки через центральную консоль.Подробнее об этом можно узнать на видео. Внутри кабины встроили специальные плафоны освещения, которые включаются и выключаются более плавно, чем в предыдущем положении.

Пакет «люкс плюс» оснащен новейшей 5-ступенчатой коробкой передач модели 2181, которая была разработана в сотрудничестве со специалистами автопроизводителей Nissan и Renault. Автоматическая коробка передач также претерпела небольшие изменения. При переключении передач водитель практически не ощущает той вибрации, которая отдается в ручку.Это повысило комфорт вождения.

Цена автомобиля в 2015 году

В 2015 году Lada Granta Lux продается в 3-х различных модификациях. Автомобиль с механической коробкой передач и 98-сильным двигателем можно приобрести по цене от 441 600 рублей. Для автомобиля с 5-ступенчатой МКПП и двигателем мощностью 106 л.с. придется заплатить 448 300 руб.

Лада Гранта люкс с автоматической коробкой передач и 106-сильным двигателем обойдется покупателям в 454 600 рублей.

Lada Granta 2016 года должна получить долгожданное обновление, которое, по слухам, состоится в виде рестайлинга.Новую Lada Granta со свежим экстерьером представят на ближайшем Московском международном автосалоне в конце августа этого года. Помимо седана, который собирают в Тольятти, есть еще версия лифтбэк, но эту модификацию уже собирают в Ижевске.

Стоит отметить, что производитель планирует выпустить Lada Granta в кузове универсал, которая должна заменить Lada Kalina в кузове универсал. Собственно, замена седану Kalina оказалась довольно удачным мероприятием, скорее всего, на этот раз покупатели также получат более практичный и доступный автомобиль.обновленная версия 2016, скорее всего, будет выглядеть примерно так.

Да, рестайлинг пройдет в х-стиле XRay и новой Весты. Правда, кардинальных изменений ждать не приходится, производитель ограничится бамперами, оптикой и решеткой радиатора. Ждем официальной премьеры в августе 2016 года. А пока поговорим о текущей версии бюджетного бестселлера.

Внешний вид Лада Гранта 2016 мало чем отличается от той же Калины.Те же двери, капот, передние крылья. Правда, оптика, бампера и решетка радиатора у Гранты оригинальные. На самом деле кузов Гранты создавался на базе седана Калина, в этом можно определить просто сравнив основные габариты и колесную базу. Однако багажник сделали больше и благодаря ему длина автомобиля выросла на 22 сантиметра, хотя в кузове лифтбек габаритная длина меньше на 14 мм. Смотрите фотографии экстерьера ниже.

Фото Лада Гранта 2016

В салоне Lada Granta все очень бюджетно.Вокруг жесткий темный пластик. В более дорогой комплектации серебристые вставки появляются вокруг круглых воздуховодов, на дверных ручках и на центральной консоли. Делюкс-версия — головное устройство с монохромным дисплеем, заплатив за «навигационный» пакет, можно установить мультимедийный сенсорный монитор диагональю 7 дюймов. Кресла нельзя назвать удобными, боковой поддержки практически нет, а сзади довольно тесно. Все очень дешево сделано, будем объективны, но само качество сборки относительно хорошее.

Фото салона Lada Granta 2016

Багажник Лада Гранта седан по данным производителя вмещает 520 литров, но если измерить этот показатель по стандарту VDA, то получится всего 480 литров. У лифтбека этот показатель 440 литров, но если убрать полку, то можно загрузить гораздо больше, чем в седан. Но в седане тоже можно сложить спинку дивана и засунуть в салон 1,5-метровую вещь.Фотографии багажного отделения седана и лифтбека Granta прилагаются.

Фото багажника Лада Гранта

Технические характеристики Лада Гранта

В техническом плане видна незабвенная платформа ВАЗ-2108. Такая же подвеска, независимая спереди, полунезависимая торсионная балка сзади. Рулевая рейка, но в дорогих комплектациях добавлен гидроусилитель. Тормоза спереди дисковые, сзади алюминиевые барабаны, но есть ABS с EBD (система распределения тормозных усилий).Привод естественно передний, с поперечным расположением силового агрегата.

Двигатель Lada Granta имеет объем 1,6 литра. Это бензиновые атмосферники с 8- и 16-клапанным механизмом ГРМ. Сам механизм имеет ременную передачу, при обрыве ремня гнет клапан. Базовый 8-клапанник имеет мощность 87 л.с. и сочетается только с 5-ступенчатой механикой. Кстати, механических коробок на Гранте две. Один имеет рычаги в качестве привода переключения передач, второй появился позже и имеет тросовый привод.

Более мощный 16-клапанный двигатель мощностью 106 л.с. может устанавливаться как с 5-ступенчатой механикой, так и с новым роботом-автоматом АМТ. Робот собран в Тольятти на базе механической трансмиссии. К коробке и электронному блоку управления прикручен роботизированный механизм переключения передач, который на основании данных о скорости движения и оборотах двигателя сам включает передачи.

Гранта также имеет версию с классическим гидротрансформаторным автоматом от японского производителя Jatco.4-диапазонный автомат сочетается с 16-клапанным двигателем мощностью 98 л.с. Если сравнивать обе АКПП, то по цене и практичности АМТ лучше и дешевле японской АКПП, однако по комфорту выигрывает именно агрегат Jatco. Далее массо-габаритные характеристики Lada Granta.

Размеры, масса, объемы, клиренс Лада Гранта

Длина — 4260 мм (лифтбэк 4246 мм)
Ширина — 1700 мм
Высота — 1500 мм
Снаряженная масса — от 1075 кг
Полная масса — 1560 кг
База, расстояние между передней и задней осью – 2476 мм
Колея передних и задних колес – 1430/1414 мм соответственно
Объем багажника — 520 литров (лифтбек 440/760)
Объем топливного бака – 50 литров
Размер шин — 175/70 R13, 175/65 R14, 185/60 R14 или 185/55 R15
Дорожный просвет Lada Granta — 160 мм (с АКПП 145 мм)

Видео Лада Гранта

Достаточно интересный видео обзор и тест-драйв Лада Гранта с мощнейшим 16-клапанным 106 сильным двигателем.

Цены и комплектации Lada Granta 2016 года

Лада цена Гранта седан , при этом все еще довольно доступный. А вот топовые версии уже перешагнули отметку в полмиллиона рублей. Хотя еще несколько лет назад модель можно было купить всего за 229 000 рублей в базе. Сейчас дешевле 383 тысяч отечественный седан не купишь. Полный список текущих цен приведен ниже.

1,6 л 8-кл, 5МТ, 87 л.с. «Стандарт» — 383 900 руб.
1.6л 8-кл, 5МТ, 87 л.с. «Стандарт+» — 386 900 руб.
1,6 л 8-кл, 5МТ, 87 л.с. «Норма/Классик» — 419 600 руб.
1,6 л 8-кл, 5МТ, 87 л.с. «Норма/Классик+» — 441 700 руб.
1.6L 8-cell, 5MT, 87 л.с. «Норма/SE» — 451 100 руб.
1.6L 16V, 5MT, 106HP «Норма/SE+» — 467 000 руб.
1,6л 16В, 5МТ, 106л.с. «Люкс» — 493 400 руб.
1,6л 16В, 5МТ, 106л.с. «Люкс+НС» — 521 400 руб.
1,6 л 16-кл., 4АТ, 98 л.с. «Норма/SE АТ» — 505 000 руб.
1,6 л 16-кл., 5АМТ, 106 л.с. «Норма/Классик+» — 473 600 руб.
1,6 л 16-кл., 5АМТ, 106 л.с. «Норма/SE+» — 487 000 руб.
1,6 л 16-кл., 5АМТ, 106 л.с. «Люкс» — 513 400 руб.
1,6 л 16-кл., 5АМТ, 106 л.с. «Люкс+НС» — 541 400 руб.

Цены на Лада Гранта лифтбек 2016 года тоже изменились. При этом лифтбек стоит чуть дороже седана. Да и базовая версия этой модификации чуть лучше оснащена.Прайс-лист ниже.

1,6 л 8-кл, 5МТ, 87 л.с. «Стандарт» — 404 200 руб.
1,6 л 8-кл, 5МТ, 87 л.с. «Норма/Классик» — 430 600 руб.
1,6 л 8-кл, 5МТ, 87 л.с. «Норма/Классик+» — 452 700 руб.
1,6 л 8-кл, 5МТ, 87 л.с. «Норма/Комфорт» — 467 500 руб.
1,6л 16В, 5МТ, 106л.с. «Норма/Комфорт+» — 483 400 руб.
1,6л 16В, 5МТ, 106л.с. «Люкс» — 503 200 руб.
1,6л 16В, 5МТ, 106л.с. «Люкс+НС» — 531 200 руб.
1,6 л 16-кл., 4АТ, 98 л.с. «Норма/Комфорт» — 521 400 руб.
1,6 л 16-кл., 5АМТ, 106 л.с. «Норма/Классик+» — 484 600 руб.
1,6 л 16-кл., 5АМТ, 106 л.с. «Норма/Комфорт+» — 503 400 руб.
1,6 л 16-кл., 5АМТ, 106 л.с. «Люкс» — 523 200 руб.
1,6 л 16-кл., 5АМТ, 106 л.с. «Люкс+НС» — 551 200 руб.

Несмотря на свой бюджетный статус, Lada Granta в дорогих комплектациях очень хорошо оснащена. Уже никого не удивишь датчиками дождя, света и заднего парктроника.Есть мультимедиа с навигацией, климатическая система и даже круиз-контроль с ограничителем скорости. Противобуксовочная и противооткатная системы, новая роботизированная коробка и многое другое. В общем, «полный фарш».

На сегодняшний день в России Lada Granta 2016 в новом кузове (фото) комплектации и цены самые привлекательные среди конкурентов. Прайс-листы популярной модели регулярно обновляются, а вместе с ними и уровни оснащения. На данный момент Lada Granta 2016 цена новая машина составляет 383 900 рублей.Новая Гранта в кузове седан имеет 3 комплектации: Стандарт, Норма и Люкс, которые включают в себя 13 модификаций. Цена и диапазон комплектаций Лада Гранта 2016 на официальном сайте составляет 383 900 – 533 400 рублей.

Новая Лада Гранта 2016 цена в начальной комплектации Стандарт начинается от 383 900 рублей. Данная комплектация Лада Гранта имеет 1,6-литровый 8-клапанный двигатель мощностью 87 л.с., 5-ступенчатую механическую коробку передач и представляет собой самую минимальную комплектацию уровня Basic*, включающую: подушку безопасности водителя, крепления детского сиденья ISOFIX, блокировку задних дверей от открывания детские, иммобилайзер, дневные ходовые огни, АБС с усилителем экстренного торможения (ABS+BAS), розетка 12В, воздушный фильтр салона, легкая тонировка стекол, аудиоподготовка, штампованные колесные диски 13 дюймов + полноразмерная запаска.

Следующий уровень комплектации Лада Гранта 2016 в стандартной комплектации по цене 386 900 руб. называется Стандарт+ и отличается только наличием бамперов в цвет кузова (+3000 руб.).

Следующим по списку идет Lada Granta в комплектации Norma и имеет 3 уровня оснащения: Classic, Classic+ и SE с ценами 419 600, 441 700 и 451 100 рублей соответственно. В дополнение к уже имеющемуся оборудованию данный пакет седан получает: подголовники задних сидений (3 шт.), Бортовой компьютер, подсказка переключения передач в комбинации приборов, регулируемая по высоте рулевая колонка с электроусилителем, передние электростеклоподъемники, 14-дюймовые штампованные диски + полноразмерная запаска, колёсные колпаки. В дополнение к этому модификация Classic+ получает электрообогрев наружных зеркал и кондиционер, а версия SE — пассажирский солнцезащитный козырек с зеркалом, подогрев передних сидений и аудиосистему (FM, USB, SD-карта, Bluetooth, Hands free). ), с 4 динамиками.

Next Lada Granta 2016 цена 505 000 рублей в комплектации В норму входит только один уровень комплектации SE AT.Данная модификация Гранты имеет автоматическую 4-х ступенчатую коробку передач «Jatco» и дефорсированный 16-клапанный двигатель объемом 1,6 литра мощностью 98 л. с., встречающийся только в этой комплектации. В остальном оснащение SE AT ничем не отличается от предыдущего SE.

За ним Лада Гранта 2016 в Норма стоимостью 467 000 рублей, которая имеет 5-ступенчатую механическую коробку передач и 1,6-литровый 16-клапанный двигатель мощностью 106 л.с. В этой версии Гранта имеет один уровень оснащения SE+, который отличается от предыдущих модификаций только наличием обогрева лобового стекла.

Еще Lada Granta 2016 в комплектации Норма включает в себя пакеты опций Classic+ и SE+, цены которых составляют 473 600 и 487 000 рублей соответственно. В этой комплектации Гранта также оснащается 1,6-литровым 16-клапанным двигателем, но уже с 5-ступенчатым роботом. В остальном эти «роботизированные» версии Classic+ и SE+ ничем не отличаются от их «механического» уровня оснащения.

На очереди Lada Granta 2016 в комплектации Lux и двух версиях: Basic* и Navigation с по цене 513 400 и 541 400 рублей соответственно. Эта комплектация имеет тот же 1,6-литровый 16-клапанный двигатель, 5-ступенчатую «механику» и примечательна наличием таких дополнительных опций, как противотуманные фары, функция задержки выключения фар, заднее сиденье с компоновкой 60/40, прикуриватель и выносная пепельница. , розетка 12В в багажном отделении, центральный замок с ДУ, задние электростеклоподъемники, электропривод и обогрев наружных зеркал, задний парктроник, датчики дождя и света, климат-система, наружные зеркала заднего вида с поворотниками и наружные ручки дверей в цвет кузова, молдинги боковых дверей , легкосплавные 15-дюймовые диски + штампованная 14-дюймовая запаска (докатка).

В отличие от Basic*, Навигация дополнительно получила следующее оборудование: электронную систему контроля устойчивости (ESC), антипробуксовочную систему (TCS), круиз-контроль и ограничитель скорости, а вместо обычной аудиосистемы — мультимедийную теперь установлен центр с навигацией (7″» дисплей с Touch Screen, FM, USB, SD карта, Bluetooth, Hands free), 4 динамика.

Завершает список обвесов Lada Granta 2016 в комплектации Lux с роботизированной трансмиссией и двумя версиями: Basic* и Navigation, цены составляют 533 400 и 561 400 рублей соответственно.Базовая* версия новой Гранты по оснащению является копией ее «механической» модификации. Уровень оснащения Навигация отличается от своего «механического» аналога только системой помощи при трогании на подъеме (HSA), в остальном они также полностью идентичны.

Сегодня при покупке нового автомобиля L ada Granta 2016 года выпуска в салонах официальных дилеров Лада действуют самые выгодные предложения. Теперь новую Гранту можно приобрести по доступной цене подводя итоги акций по специальным программам Л ада Финанс , Трейд-ин и Утилизация , в результате которых максимальная выгода может составить 100 000 рублей.Подробнее об акциях можно узнать на официальном сайте компании АвтоВАЗ.

Новый корпус

Основной идеей создания Лада Гранта (ВАЗ-2190) было получение недорогого и качественного автомобиля, отвечающего основным современным требованиям: безопасности, практичности и, самое главное, доступности. И, надо сказать, инженерам АвтоВАЗа это удалось. Автомобиль создан на базе Lada Kalina первого поколения, но было бы неправильно сказать, что это один и тот же автомобиль.Для Лада Гранта 2016 в новом кузове (фото) было разработано около 400 узлов и комплектов, более половины из которых закупаются у поставщиков, остальные — собственного производства.

Новый кузов Гранту можно отличить по измененным: светотехнике, капоту, крыльям, бамперам, крышке багажника, передним и задним стеклам а так же деталям салона. Передний и задний свесы нового кузова Лада Гранта 2016 увеличились, капот и багажник стали выше, линии кузова стали острее, придав ему суровости и агрессивности.

лифтбэк

Новый Лада Гранта лифтбек 2016 в новом кузове (фото) комплектации и цены практически не отличаются от седана в комплектациях. В прайс-листах лифтбек комплектация Standard имеет только один уровень оснащения, а пакет опций SE называется Comfort. Цена Lada Granta лифтбек начинается от 404 200 рублей за начальную комплектацию Стандарт, а у самой дорогой Люкс цена 571 200 рублей. В итоге цены на лифтбек несколько выше, чем на седан и колеблются в пределах 404 200 – 571 200 рублей.

Initial Granta лифтбек в комплектации Standard оснащается 8-клапанным двигателем мощностью 87 л.с. и 5-ступенчатая «механика», а самый дорогой Люкс — 16-клапанный двигатель мощностью 106 л.с. и 5-ступенчатый робот. Более того, люксовая комплектация имеет другие углы установки колес, более жесткие пружины и газонаполненные амортизаторы.

Внешний вид Привлекает внимание Lada Granta лифтбек (ВАЗ-2191) — самый красивый автомобиль за всю историю АвтоВАЗа.Внешний вид лифтбека Гранта разрабатывался двумя дизайнерами: начал Иван Лепешкин — автор экстерьера Гранты седан , а закончил Михаил Зубков, известный экспериментальным ВАЗ-2151.

Лада Гранта 2016 в новом кузове, в отличие от Лады Калины, выглядит более «по-мужски»: легкосплавные диски нового дизайна, более «серьезный» бампер, чуть более низкая крыша. Кстати, за счет изменения угла наклона дверного проема задние двери в новой Гранте лифтбек теперь оригинальные.

На люксовых комплектациях лифтбек гранта появились новые наружные зеркала заднего вида с боковыми указателями поворотов, объем багажника увеличился до 480 литров, что на 120 литров больше, чем у Калины. Кстати, багажник стал более приличным: качественные пластиковые накладки, крепления для фиксации груза и т.д. Стеклоподъемники получили дополнительные уплотнители, шумоизоляция в целом повысилась, и даже такие мелочи, как черные саморезы, которые крепятся детали салона снижают градус предвзятости в сторону отечественного автопрома.

Салон Лада Гранта 2016 лифтбек просторный, заднее сиденье, как и положено лифтбеку, складывается, причем во всех комплектациях, кроме базовой Стандарт. Механизм переключения передач теперь имеет тросовый привод, впрочем, как и все последние модификации Лада Гранта вне зависимости от типа кузова.

Спорт

Spectacular Lada Granta Sport 2016 в новом кузове (фото) отличается не только комплектациями и ценами, но и экстерьером.Внешний вид Lada Granta Sport сразу говорит о спортивном характере модели: измененные передний и задний бамперы, спойлер на крышке багажника, 16-дюймовые легкосплавные диски, карбоновые вставки под эмблемами АвтоВАЗа. Радиатор получил дополнительную защиту в виде сетки в верхней части и решетки (крупной сетки) в нижней части. Спереди на решетке радиатора и сзади на багажнике характерная надпись Sport . Дополнительный стоп-сигнал на заднем стекле расположен не вверху, как на обычной Гранте , а внизу.

Новый Lada Granta Sport 2016 модельного года имеет всего 2 комплектации Light и Luxe по цене 541 000 и 577 000 рублей соответственно. В отличие от обычной Гранты , заряженная версия модели получила спортивные настройки подвески и дисковые задние тормоза, а передние тормозные диски увеличились в размерах.

руль, ручки КПП и ручной тормоз обтянуты кожей — гофра рычага КПП тоже из кожи.Кузов получил дополнительную шумоизоляцию, сиденье водителя теперь регулируется по высоте. Кстати, сиденья Grante Sport совершенно другие: более качественный материал кожи, красивая красная строчка, ярко выраженная боковая поддержка.

Багажник такой же большой, как и у штатной Гранты — 520 литров. Запаска легкосплавная, но не полноразмерная, а 15-дюймовая «докатка». Спортивная версия Лада Гранта Спорт 2016 приводится в движение 16-клапанным двигателем объемом 1,6 л мощностью 118 л.с.с крутящим моментом 154 Нм. Максимальная скорость Lada Granta Sport составляет 197 км/ч, а разгон до сотни – 9,5 секунд, что на 17 км/ч скорости и 1,4 секунды ускорения лучше, чем у самых быстрых и мощных «гражданских» Гранты . Несмотря на значительное улучшение динамики, средний расход спортивного топлива Лада Гранта даже немного снизился (-0,2 л) по сравнению с обычной 16-клапанной версией.

Интерьер

Салон Лада Гранта 2016 довольно просторный для такого класса авто, особенно по высоте.Спереди водитель и пассажир чувствуют себя более чем комфортно, впрочем, как и два взрослых пассажира сзади. Но нам троим на галерее уже тесновато. Пластик салона Лада Гранте жесткий, как и положено автомобилям данной ценовой категории. Качество сборки безупречное: зазоры всех пластиковых панелей выдержаны, скрипов и жучков нет. Сиденья эластичные, материал обивки сидений плотный и не маркий.

Приборная панель выглядит современно, дефлекторы воздуха радуют своей простотой и четкостью работы.Полочка над бардачком очень кстати — помню предыдущий Логан. в делюкс версии Гранта есть прикуриватель и выносная пепельница, как приятное, но не всем нужное дополнение.

Технические характеристики

В целях удешевления Лада Гранта 2016 года технические характеристики были существенно изменены, а общее количество деталей автомобиля максимально уменьшено. Это видно как по интерьеру, так и по экстерьеру модели. Как ни странно, но низкая цена Гранты не ухудшила его технических характеристик, а качество сборки и материалов отделки соответствует мировым стандартам.

Моторная гамма Лада Гранта включает в себя 4 силовых агрегата: 8-клапанные мощностью 82 и 87 л.с. и 16-клапанные мощностью 98 и 106 л.с. Трансмиссий всего три: «механика», «автомат» и «робот». Двигатели мощностью 82 и 87 л.с. идут только в паре с 5-ступенчатой механикой, 98-сильный мотор – с 4-ступенчатым «автоматом», а 106-сильный агрегат идет с 5-ступенчатой и «механикой» и «роботом». «. Кстати, в прайс-листах 2016 г. года в Lada Grante нет двигателя мощностью 82 л.с.

Что касается безопасности, Lada Granta 2016 в новом кузове намного инновационнее своих предшественников. Подушка безопасности водителя и антиблокировочная система (АБС) уже входят в базовое оснащение новой Гранты , а в более дорогих комплектациях есть даже система ESC, которая есть не в каждой иномарке. В дверях имелись ребра жесткости.

передние двери Lada Granta открываются очень широко, почти на 90 градусов, что обеспечивает одинаково удобную посадку пассажиров любого роста.Регулировка рулевой колонки по высоте также добавит удобства водителю, но только начиная с комплектации Норма . Объем багажника новой Гранты 2016 вырос до внушительных 520 литров, что не может не радовать заядлых дачников, шопоголиков и любителей путешествий.

Запасное колесо спрятано в пол багажника и необходимые инструменты: домкрат, баллон, буксировочное кольцо. Кстати, полноразмерная запаска есть не во всех комплектациях. Лада Гранта 2016 года — «люксовые» версии идут с «докаткой», или, правильнее сказать, с запаской во временное пользование.

Новая Лада Гранта 2016 получила модернизированную подвеску. В комплектациях Norma и Lux увеличен кастер передней подвески до 2°45’, что улучшило курсовую устойчивость модели. В результате этой модернизации гидроусилитель руля получил увеличенный компенсирующий момент, а рулевая рейка стала «короче», сократив количество оборотов руля до 3-х. Данная модификация не затронет начальную комплектацию Стандарта, в которой кастер не изменился и равен 1°40′, а число оборотов руля равно 4.

В передней подвеске изменены стойки амортизаторов, стабилизатор поперечной устойчивости, а также усилены опоры кузова. Задняя подвеска была основательно переработана, что привело к отрицательному углу развала (-1°).

Лада Гранта 2016 получила коробку передач с тросовым приводом вместо устаревших конструкций с несколькими тягами и сложной кулисой. Установка тросового привода на коробку передач Лада Гранта позволила убрать неприятные вибрации на рычаге КПП, сделать переключения более четкими и уменьшить люфт самого рычага.На сегодняшний день большинство автопроизводителей сделали выбор в пользу именно этого типа привода.

отзывов

Судя по отзывам владельцев, Lada Granta оказалась достаточно удачной моделью и смело может претендовать на звание народного автомобиля в России. Самыми главными преимуществами Лада Гранта , по мнению большинства автомобилистов, являются: стоимость, надежность и практичность. Действительно, гранта является самым недорогим автомобилем на российском рынке: его цена начинается от 383 900 рублей.В этой ценовой категории сегодня для Гранты просто нет конкурентов.

Надежность «народника» также имеет только положительные отзывы: по паспорту до капитального ремонта двигатель должен пройти 150 000 км, хотя на практике 200 000 км далеко не предел. Поршни двигателя Лада Гранта 2016 имеют графитовое покрытие, значительно облегчающее пуск и повышающее долговечность зеркального покрытия цилиндров. Ресурс двигателя Гранта зависит также от своевременности их обслуживания и качества горюче-смазочных материалов.

Масса положительных отзывов и в адрес подвески Гранта, которая отличается высокой энергоемкостью и при бережной эксплуатации визит в автосервис наступит не ранее, чем через 150 000 км пробега.

Коррозионная стойкость кузова Лада Гранта по отзывам владельцев достаточно высокая, т.к. третья часть кузова состоит из оцинкованной стали, большая часть которой горячеоцинкованная с 2-х сторонним покрытием. Дно кузова обработано прочным и долговечным антигравийным покрытием, а на скрытые полости кузова нанесен антикоррозийный состав.Глушитель изготовлен из нержавеющей стали.

Практичность Lada Grante не позаимствовать, ведь не каждая машина В-класса может похвастаться багажником объемом 520 литров. Стоимость и доступность запчастей, неприхотливость в эксплуатации, надежность – все эти качества присущи только по-настоящему народному автомобилю, который есть в многочисленных отзывах автомобилистов Лада Гранта.

Старт продаж

Новый Lada Granta 2016 , старт продаж которого состоялся 5 лет назад, стал настоящим бестселлером российского автомобильного рынка.Благодаря своей доступности, в России Lada Granta стали невероятно популярны. Продажи Гранты за прошлый год составили 120 182 автомобиля, что является лучшим результатом в истории современного автомобилестроения.

Лада Гранта 2016 комплектации и цены

	Стандарт (21901-50-010) МТ			Норма СЭ + (21907-51-010) МТ	Люкс (21907-52-010) МТ		Люкс (21907-52-050) АМТ
Минимальная цена, руб.	383 900	419 600	505 000	467 000	513 400	473 600	533 400
Автоматическая коробка передач	№	№	+	№	+	+	+
	+	+	+	+	+	+	+
Бамперы в цвет кузова	№	+	+	+	+	+	+
Замок задней двери от открывания детьми	+	+	+	+	+	+	+
Бортовой компьютер	№	+	+	+	+	+	+
Датчик дождя	№	№	№	№	+	№	+
Световой датчик	№	№	№	№	+	№	+
Дневные ходовые огни	+	+	+	+	+	+	+
Центральный замок ДУ	№	№	№	№	+	№	+
	№	№	№	№	+	№	+
Иммобилайзер	+	+	+	+	+	+	+
Климат-контроль	№	№	№	№	+	№	+
	1	1	2	2	2	2	2
Кондиционер	№	№	+	+	№	+	№
Крепления для детей Сиденья ISOFIX	+	+	+	+	+	+	+
Легкосплавные диски	№	№	№	№	+	№	+
Наружные зеркала заднего вида с боковыми указателями поворота в цвет кузова	№	№	№	№	+	№	+
Наружные дверные ручки цвета кузова	№	№	№	№	+	№	+
Зеркала с подогревом	№	№	+	+	+	+	+
Охранная сигнализация	№	№	№	№	+	№	+
Пассивный круиз-контроль	№	№	№	№	№	№	+
Подголовники задних сидений (3 шт. )	№	+	+	+	+	+	+
	№	+	+	+	+	+	+
	№	№	+	+	+	№	+
Рулевое колесо с подогревом	№	№	№	№	№	№	№
Подогрев сидений	№	№	+	+	+	№	+
	+	+	+	+	+	+	+
	№	№	+	+	+	+	+
Противотуманные фары	№	№	№	№	+	№	+
Регулировка рулевой колонки	№	+	+	+	+	+	+
	№	№	№	№	№	№	№
Складное заднее сиденье (40/60)	№	№	№	№	+	№	+
Усилитель руля	№	+	+	+	+	+	+
цвет металлик	+	+	+	+	+	+	+
центральный замок	№	№	№	№	+	№	+
	№	№	+	+	+	№	+
Штатная навигационная система	№	№	№	№	+	№	№
Датчики парковки для персонала	№	№	№	№	+	№	+
Зеркала с электрорегулировкой	№	№	№	№	+	№	+

Лада Гранта 2016 технические характеристики

	Стандарт (21901-50-010) МТ	Норма Классик (21901-51-010) MT	Норма СЭ АТ (21902-51-010) АТ	Норма СЭ + (21907-51-010) МТ	Люкс (21907-52-010) МТ	Норма Классик + (21907-51-050) АМТ	Люкс (21907-52-050) АМТ
Минимальная цена, руб.	383 900	419 600	505 000	467 000	513 400	473 600	533 400
Корпус	седан	седан	седан	седан	седан	седан	седан
Количество дверей	4	4	4	4	4	4	4
Привод	передний	передний	передний	передний	передний	передний	передний
Зазор	160 мм	160 мм	145 мм	160 мм	160 мм	160 мм	160 мм
Длина	4260	4260	4260	4260	4260	4260	4260
Ширина	1700	1700	1700	1700	1700	1700	1700
Высота	1500	1500	1500	1500	1500	1500	1500
Колесная база	2476	2476	2476	2476	2476	2476	2476
Объем багажника	520 л	520 л	520 л	520 л	520 л	520 л	520 л
Снаряженная масса	1075 кг	1075 кг	1160 кг	1075 кг	1075 кг	1160 кг	1160 кг
	Р4	Р4	Р4	Р4	Р4	Р4	Р4
Рабочий объем	1. 6 л	1,6 л	1,6 л	1,6 л	1,6 л	1,6 л	1,6 л
Мощность	87 л.с.	87 л.с.	98 л.с.	106 л.с.	106 л.с.	106 л.с.	106 л.с.
Об/мин	5100	5100	5600	5800	5800	5800	5800
Момент затяжки	140 Н·м	140 Н·м	145 Н·м	148 Н·м	148 Н·м	148 Н·м	148 Н·м
Об/мин	3800	3800	4000	4200	4200	4200	4200
Трансмиссия	Механика	Механика	машина	Механика	Механика	робот	робот
Количество передач	5	5	4	5	5	5	5
Максимальная скорость	167 км/ч	167 км/ч	173 км/ч	183 км/ч	183 км/ч	180 км/ч	180 км/ч
Разгон 0-100 км/ч	12. 2 секунды	12,2 секунды	13,3 секунды	10,9 секунды	10,9 секунды	12,3 секунды	12,3 секунды
Емкость топливного бака	50 л	50 л	50 л	50 л	50 л	50 л	50 л
Расход топлива	9,0/5,8/7,0	9,0/5,8/7,0	9,9/6,1/7.6	8,6/5,6/6,7	8,6/5,6/6,7	9,0/5,2/6,6	9,0/5,2/6,6

Лада Гранта 2016 цена, комплектации и комплектации в сравнении с конкурентами

	Лада Гранта Стандарт (21901-50-010) МТ	Датсун он-ДО Доступ	Brilliance h330 1,5MT Комфорт	Chery Bonus 3 Стандарт 1.5MT
Минимальная цена, руб.	383 900	406 000	459 900	485 900
Корпус	седан	седан	седан	седан
Количество дверей	4	4	4	4
Привод	передний	передний	передний	передний
Зазор	160 мм	174 мм	114 мм	151 мм
Длина	4260	4337	4390	4450
Ширина	1700	1700	1703	1748
Высота	1500	1500	1482	1493
Колесная база	2476	2476	2570	2570
Объем багажника	520 л	530 л	470 л	508 л
Снаряженная масса	1075 кг	1160 кг	1207 кг	1279 кг
Расположение и количество цилиндров	Р4	Р4	Р4	Р4
Рабочий объем	1. 6 л	1,6 л	1,5 л	1,5 л
Мощность	87 л.с.	87 л.с.	105 л.с.	109 л.с.
Об/мин	5100	5100	5800	6000
Момент затяжки	140 Н·м	140	143	140
Об/мин	3800	3800	3800-4200	4500
Трансмиссия	Механика	Механика	Механика	Механика
Количество передач	5	5	5	5
Максимальная скорость	167 км/ч	173 км/ч	175 км/ч	176 км/ч
Разгон 0-100 км/ч	12.2 секунды	12,2 секунды	12,6 секунды	11,5 секунд
Емкость топливного бака	50 л	50 л	42 л	42 л
Расход топлива	9,0/5,8/7,0	9,0/5,8/7,0	0 / 5,5 / 0	9,3/6,2/7,3
Антиблокировочная тормозная система (ABS)	+	+	+	+
Бортовой компьютер	№	№	+	+
Датчик дождя	№	№	№	№
Световой датчик	№	№	№	№
пульт дистанционного управления центральным замком	№	№	+	+
Задние электрические стеклоподъемники	№	№	+	+
Количество подушек безопасности	1	1	2	2
Кондиционер	№	№	+	+
Легкосплавные диски	№	№	№	№
Зеркала с подогревом	№	№	№	№
Передние электрические стеклоподъемники	№	№	+	+
Подготовка к телефону (свободные руки/Bluetooth)	№	№	№	№
Рулевое колесо с подогревом	№	№	№	№
Подогрев сидений	№	+	№	+
Подушка безопасности водителя	+	+	+	+
Подушка безопасности переднего пассажира	№	№	+	+
Противотуманные фары	№	№	№	+
Регулировка рулевой колонки	№	+	+	+
Регулировка высоты сиденья водителя	№	№	№	+
Система стабилизации (ESP)	№	№	№	№
Складное заднее сиденье (1/1)	№	+	№	№
Складное заднее сиденье (1/3-2/3)	+	№	+	+
Усилитель руля	№	+	+	+
цвет металлик	+	+	+	+
центральный замок	№	№	+	+
Аудиосистема OEM с поддержкой CD и MP3	№	№	+	№
Датчики парковки для персонала	№	№	№	№
Магистральный багажник	№	№	№	+
Зеркала с электрорегулировкой	№	№	№	+

* – произвольное название уровня комплектации в рамках данного материала в связи с отсутствием такового в прайс-листах модели. Название Basic * предназначено для простоты классификации и упрощает проведение сравнительного анализа уровней оборудования (пакетов опций).

Модель автомобиля Lada Granta завоевала огромную популярность благодаря доступной цене и стильному внешнему виду. Поэтому концерн АвтоВАЗ выпустил на рынок модель в комплектации Lada Granta Lux. Обладает массой достоинств, способных удовлетворить потребности самого привередливого водителя.

Конечно, стоимость такой конфигурации значительно выше стандартной.Однако если сравнивать с иномарками, то за ту же цену можно купить только базовую, самую бюджетную модель.

Лада Гранта

комплектация Люкс – это абсолютно современный автомобиль, оснащенный опциями, которых не было ни у кого до отечественного автомобиля. Он выпускается в кузовах седан и хэтчбек, которые были переработаны под совершенно новый для внутреннего рынка тип — лифтбек Гранта Люкс.

Технические характеристики Лада Гранта Люкс

Все автомобили Грант Люкс комплектуются 16-клапанными 4-х цилиндровыми двигателями объемом 1. 6 литров. Клапанные гидрокомпенсаторы и облегченная шатунно-поршневая группа обеспечивают мощность 98 л.с., а также максимальный крутящий момент 145 Нм.

В более дорогих моделях мощность двигателя составляет уже 106 л.с. с крутящим моментом 148 Нм. Увеличение производительности достигается за счет внедрения пассивной системы наддува.

ВАЗ предлагает автомобили Lada Granta Lux как с механической коробкой передач (МКПП), так и с автоматической (АКПП). С февраля 2015 года вместо версии с АКПП выпускается модификация с роботом.

Все топовые модификации с АКПП, включая лифтбек Lux Lada Granta, комплектуются АКПП японской фирмы Jatco с 4-мя рабочими диапазонами. Версии с МКПП комплектуются 5-ступенчатой коробкой передач с тросовым приводом. Его использование снижает вибрацию, передаваемую на рычаг переключения передач.

Особенности Suite Granta

Производители доработали модели роскошных автомобилей практически по всем направлениям. Рассмотрим, чем отличается люксовая комплектация Лада Гранта, и какой у нее набор опций.

Интерьер салона

Комфорт и эстетика салона обеспечиваются следующими характеристиками:

Дизайн интерьера выполнен в современном стиле. Окантовка воздуховодов, ручки дверей и приборная панель выполнены в серебристом цвете.

Заднее сиденье имеет три подголовника.

Обивка сидений выполнена из приятного на ощупь и прочного материала. Выполнена тканевая обивка салона.

Заднее сиденье раздельное, раскладывается в пропорции 60 на 40, что дает возможность перевозки нестандартных грузов.

Внешний вид автомобиля

Внешний вид топовых моделей, особенно лифтбека Lada Granta Lux, отличается современным стильным дизайном, который понравится как молодежи, так и опытным водителям. Он вполне может составить конкуренцию многим иномаркам. Фото Lada Granta Lux представлено ниже.

Отличительные черты экстерьера:

Противотуманные фары;
бампера, наружные зеркала и дверные ручки — в цвет кузова;
Дневные ходовые огни;
молдинги и черные арки на боковых дверях;
14 или 15-дюймовые легкосплавные диски в зависимости от версии (например, люксовый лифтбек Lada Granta имеет 15-дюймовые диски и шины 185/55 R15).

Безопасность

Безопасность всегда должна быть приоритетом, особенно для автомобиля. Концерн ВАЗ постарался и оснастил люксовые модификации Lada Granta по высшему разряду.

Подушки безопасности доступны для водителя и переднего пассажира.

Имеются крепления для детских кресел с системой ISOFIX.

Задние двери заблокированы, чтобы дети не могли их открыть.

Установлена штатная противоугонная сигнализация с дистанционным управлением.

Установлен иммобилайзер.

Центральный замок, дополненный дистанционным управлением, позволяет управлять дверными замками и крышкой багажника.

Lada Granta Lux оснащен электронной антиблокировочной системой, распределяющей тормозное усилие, дополненной усилителем экстренного торможения.

Комфорт

Для любого водителя, особенно того, кто находится за рулем длительное время, большое значение имеет удобство и комфорт использования автомобиля. Комплектация Lada Granta Lux имеет описанные ниже опции.

Электроусилитель руля.

Рулевая колонка регулируется по высоте.

Передние сиденья с подогревом.

Наружные зеркала заднего вида с подогревом, а их корпуса снабжены светодиодными повторителями поворотов.

Электрические стеклоподъемники есть как на передних, так и на задних дверях.

Изнутри водительская дверь оборудована небольшим блоком, позволяющим регулировать наружные зеркала заднего вида, управлять всеми четырьмя электростеклоподъемниками, отпирать багажник и люк бензобака.

Современная мультимедийная система с 7-дюймовым сенсорным экраном, имеющая множество настроек и способная читать все форматы аудио и видео.На передней панели магнитолы есть разъем SD, в бардачке — вход USB. Установил четыре динамика в двери.

Над сиденьем водителя есть футляр для очков.

Бортовой компьютер. Все данные с него выводятся на небольшой монитор, который находится на панели приборов.

Стекло слегка тонировано.

Современная система климат-контроля позволяет установить максимально комфортный температурный режим.

Другие приятные дополнения

Парктроник – необходимая опция, особенно для неопытных водителей;
датчики дождя и света;
подсказка переключения передач;
зеркало, встроенное в солнцезащитный козырек переднего пассажира;
Розетка 12 В в багажном отделении;
функция задержки выключения фар;
переносная пепельница и прикуриватель;
салонный фильтр;
обогрев лобового стекла;
сетка для мелких вещей в багажник.

На фото Granta Lux, ее приборная панель и экран мультимедийной системы.

Лада Гранта люкс — цена 2016

И в заключение немного о стоимости различных топовых модификаций. Теперь Lada Granta Lux можно приобрести не только с полным набором опций, но и выбрать пакет необходимых параметров и сэкономить на ненужных. От этого будет зависеть сумма.

Например, цена седана класса люкс начинается от 493 400 рублей, стоимость Lada Granta Lux Liftback начинается от 503 000 рублей.

BLACK FRET SEATTLE ОБЪЯВЛЯЕТ ПОЛУЧАТЕЛЕЙ ГРАНТА 2020

[fusion_builder_container type=”flex” сотня_процентов=”нет” сотня_процентов=”нет” мин_высота=”” сто_процент_высота_прокрутка=”нет” align_content=”растянуть” stone_percent_height_center_content = «да» equal_height_columns = «нет» container_tag = «div» menu_anchor = »» hide_on_mobile = «малая видимость, средняя видимость, большая видимость» статус = «опубликовано» publish_date = »» класс = »» id = » ” link_color=”” link_hover_color=”” border_sizes=”” border_sizes_top=”” border_sizes_right=”” border_sizes_bottom=”” border_sizes_left=”” border_color=”” border_style=”solid” spacing_medium=”” margin_top_medium=”” margin_bottom_medium=”” spacing_small=”” margin_top_small=”” margin_bottom_small=”” margin_top=”” margin_bottom=”” padding_dimensions_medium=”” padding_top_medium=”” padding_right_medium=”” padding_bottom_medium=”” padding_left_medium=”” padding_dimensions_small=”” padding_top_small=”” padding_right «» п add_bottom_small=”” padding_left_small=”” padding_top=”” padding_right=”” padding_bottom=”” padding_left=”” box_shadow=”нет” box_shadow_vertical=”” box_shadow_horizontal=”” box_shadow_blur=”0″ box_shadow_spread=”0″ box_shadow_color=” ” box_shadow_style=”” z_index=”” overflow=”” градиент_начало_цвет=”” градиент_конец_цвет=”” градиент_старт_позиция=”0″ градиент_конечная_позиция=”100″ градиент_тип=”линейный” радиальное_направление=”центр по центру” linear_angle=”180″ фон_цвет=” ” background_image=”” background_position=”по центру” background_repeat=”без повтора” fade=”нет” background_parallax=”нет” enable_mobile=”нет” parallax_speed=”0. 3″ background_blend_mode=»none» video_mp4=»» video_webm=»» video_ogv=»» video_url=»» video_aspect_ratio=»16:9″ video_loop=»yes» video_mute=»yes» video_preview_image=»» absolute=»off» absolute_devices =»маленький,средний,большой» sticky=»выкл» sticky_devices=»маленький,средний,большой» sticky_background_color=»» sticky_height=»» sticky_offset=»» sticky_transition_offset=»0″ scroll_offset=»0″ animation_type=”” animation_direction=”left” animation_speed=”0,3″ animation_offset=”” filter_hue=”0″ filter_saturation=”100″ filter_brightness=”100″ filter_contrast=”100″ filter_invert=”0″ filter_sepia=”0″ filter_opacity= «100» filter_blur = «0» filter_hue_hover = «0» filter_saturation_hover = «100» filter_brightness_hover = «100» filter_contrast_hover = «100» filter_invert_hover = «0» filter_sepia_hover = «0» filter_opacity_hover = «100» [» filter_blur_hover fusion_builder_row][fusion_builder_column type=”1_1″ layout=”1_1″ align_self=”auto” content_layout=”column” align_content=”flex-start” cont ent_wrap=”wrap” spacing=”” center_content=”no” link=”” target=”_self” min_height=”” hide_on_mobile=”малая видимость,средняя видимость,большая видимость” sticky_display=”нормальный,липкий” класс =”” id=”” type_medium=”” type_small=”” order_medium=”0″ order_small=”0″ Dimension_spacing_medium=”” Dimension_spacing_small=”” Dimension_spacing=”” Dimension_margin_medium=”” Dimension_margin_small=”” margin_top=”” margin_bottom =”” padding_medium=”” padding_small=”” padding_top=”” padding_right=”” padding_bottom=”” padding_left=”” hover_type=”none” border_sizes=”” border_color=”” border_style=”solid” border_radius=”” box_shadow =”нет” Dimension_box_shadow=”” box_shadow_blur=”0″ box_shadow_spread=”0″ box_shadow_color=”” box_shadow_style=”” background_type=”одиночный” градиент_start_color=”” градиент_end_color=”” градиент_start_position=”0″ градиент_конец_позиция=”100″ градиент_тип =”linear”radial_direction=”центр по центру” linear_angle=”180″ background_color=”” background_image=”” background_image_id=”” bac kground_position = «слева вверху» background_repeat = «без повтора» background_blend_mode = «нет» animation_type = «» animation_direction = «слева» animation_speed = «0. 3″ animation_offset=”” filter_type=”regular” filter_hue=”0″ filter_saturation=”100″ filter_brightness=”100″ filter_contrast=”100″ filter_invert=”0″ filter_sepia=”0″ filter_opacity=”100″ filter_blur=”0 ″ filter_hue_hover=”0″ filter_saturation_hover=”100″ filter_brightness_hover=”100″ filter_contrast_hover=”100″ filter_invert_hover=”0″ filter_sepia_hover=”0″ filter_opacity_hover=”100″ filter_blur_hover=”0″ last=”true” border ” type=”1_1″ first=”true”][fusion_text columns=”” column_min_width=”” column_spacing=”” rule_style=”default” rule_size=”” rule_color=”” content_alignment_medium=”” content_alignment_small=”” content_alignment=” ” hide_on_mobile=”малая видимость, средняя видимость, большая видимость” sticky_display=”нормальный,липкий” class=”” id=”” font_size=”” fusion_font_family_text_font=”” fusion_font_variant_text_font=”” line_height=”” letter_spacing=” ” text_color=”” animation_type=”” animation_direction=”слева” animation_speed=”0.3″ animation_offset=»»]

МУЗЫКАЛЬНАЯ НЕКОММЕРЧЕСКАЯ НЕКОММЕРЧЕСКАЯ ПРЕДПРИЯТИЯ ПРЕДОСТАВИТ 50 000 ДОЛЛАРОВ США В виде ГРАНТОВ МУЗЫКАНТАМ ИЗ СИЭТЛА

После распределения более 1,75 млн долларов среди музыкантов в Остине, штат Техас, с 2013 года отделение в Сиэтле официально открылось в феврале 2020 года, что стало первым шагом на пути к тому, чтобы стать национальной организацией.

25 АВГУСТА 2020 ГОДА СИЭТЛ, ВАШИНГТОН — Black Fret с гордостью объявляет о распределении 50 000 долларов США среди десяти музыкантов и групп из Сиэтла, выполняя свою миссию по поддержке создания и исполнения местной музыки с помощью этого первого гранта.

Black Fret — это общественная благотворительная организация 501 (c) 3, основанная в Остине, штат Техас, в 2013 году, которая распределила более 1,75 миллиона долларов в виде грантов и гонораров за выступления среди музыкантов Остина. Black Fret предоставляет участникам серию уникальных музыкальных впечатлений, где они могут увидеть лучшие и самые яркие из новых местных музыкальных произведений и поддержать развитие местных музыкантов. Сиэтл является первым из новых отделений за пределами Остина, и он уверен, что эти первоначальные гранты в размере 50 000 долларов станут началом многолетней поддержки.

Black Fret Seattle официально запущен 29 февраля 2020 года, как раз когда COVID-19, как раз в тот момент, когда пандемия начала публично появляться в Сиэтле. Масштабы воздействия этого события нельзя было предвидеть, и государственный порядок приюта остановил все мероприятия и массовые собрания, поставив под угрозу миссию Black Fret.

«Мы знали, что музыканты нашего города не могут дождаться улучшения ситуации. Вся отрасль остановилась как вкопанная, поэтому мы ускорили процесс предоставления грантов, чтобы попытаться оказать помощь там, где мы могли», — сказал исполнительный директор Black Fret Seattle Бен Лондон .«Пандемия очень сильно ударила по нам как организации, но еще сильнее она ударила по нашим музыкантам. Мы просто не могли оправдать приостановку нашей программы до окончания пандемии».

Имея это в виду, Black Fret в июле начал процесс выдвижения кандидатур и голосования, чтобы определить, кто станет десятью получателями гранта 2020 года. Восемьдесят один артист и группа из Сиэтла были номинированы на рассмотрение членами и консультантами Black Fret, десять из которых стали нашими артистами Black Fret 2020 года.

Получатели гранта Black Fret Seattle 2020:

Bearaxe, Chong The Nomad, Whitney Mongé, Naked Giants, Sera Cahoone, Smokey Brights, Stephanie Anne Johnson and the Hidogs, The Black Tones, Tomo Nakayama и Tres Leches

Каждый артист/группа получит грант в размере 5000 долларов, который они могут использовать по своему усмотрению для развития своей карьеры.Наши артисты Black Fret Seattle 2020 года поделились своими мыслями о влиянии этого гранта:

«Как музыкант в наше время, поддержка, которую вы нам оказываете, поистине невероятна», — сказала Сера Кахун .

Алайя Д’Алессандро из Tres Leches отметил: «Мы потеряли много концертов из-за COVID. Эти 5000 долларов позволят нам вернуться в студию звукозаписи, чтобы закончить наш второй альбом и быть готовыми отправиться в тур, когда это будет безопасно».

«Мы действительно намерены использовать эти деньги для развития группы. У нас есть несколько новых синглов в работе, и это дает возможность записать и выпустить их», — сказали Райан Девлин и Ким Уэст из Smokey Brights.

«Мы запустили Black Fret, чтобы помочь поддержать и возвеличить музыкантов Остина с мечтой представить эту программу в других городах», — сказал основатель Black Fret Колин Кендрик «Я не могу передать вам, как приятно видеть, что наша мечта сбывается». к жизни. Отделение в Сиэтле — это первый шаг к расширению нашей программы по всей стране и помощи музыкантам по всей стране.

BLACK FRET SEATTLE CONCERT SERIES

Музыканты 2020 года примут участие в десятинедельной серии концертов, которые будут транслироваться в прямом эфире с Nectar, начиная со среды, 9 сентября, в 20:00 по тихоокеанскому времени с участием Кочевника Чонга. Каждое шоу будет приносить пользу какой-либо местной некоммерческой организации. Первые четыре шоу пройдут в сентябре в течение четырех сред, а дополнительные даты последуют позже.

Среда 9/9 Кочевник Чонг (Проект Бамия)
Среда 16/9 Обнаженные великаны (Ферма выращивания корней) Сейчас)

АУДИО И ВИДЕО ПЛЕЙЛИСТЫ

Видео | Аудио

ПОДДЕРЖКА СООБЩЕСТВА: Black Fret Seattle благодарит тех, кто помог запустить эту новаторскую главу Black Fret: City of Shoreline, Port of Seattle, Tito’s Vodka, KEXP, The Stranger, Visit Seattle, The Recording Academy, Nectar, The Collective, evo и Делойт

О ЧЕРНЫЙ ЛАД

Основанная в 2013 году, Black Fret является общественной благотворительной организацией 501(c)3 со штаб-квартирой в Остине, штат Техас, чья миссия состоит в том, чтобы дать возможность местным музыкантам создавать и исполнять новую великолепную музыку.Организация представляет собой инновационную эволюцию старинной модели патронажа симфонических оркестров, ориентированную на поддержку популярной местной музыки. Ежегодные членские взносы Black Fret составляют 1500 долларов в год, которые можно вносить единовременно или ежемесячными платежами. Членство не облагается налогом на 80% и дает право на участие в благотворительных программах для сотрудников. В обмен на ежегодные взносы участники будут вознаграждены выступлениями некоторых из лучших артистов города на широком спектре частных мероприятий, включая ежемесячные шоу в интимных местах и ежегодное гала-мероприятие под названием Black Fret Ball.Желающие стать участниками Black Fret Seattle могут зарегистрироваться на странице https://blackfretorg.stage.site/SEATTLE. Все членства предоставляют члену и гостю доступ к десяти предстоящим мероприятиям Black Fret 2020 года, включая Black Fret Ball. По всем вопросам обращайтесь по адресу [email protected].

О БЕНЕ ЛОНДОН

Бен Лондон — музыкальный профессионал/исполнитель из Сиэтла, который в настоящее время является исполнительным директором Black Fret Seattle. До этого Лондон занимал руководящие должности в Experience Music Project (MoPop), The GRAMMYS (The Recording Academy), Hewlett Packard и Northwest Polite Society. Лондон был первым председателем Музыкальной комиссии Сиэтла и входил в состав советов директоров, включая KEXP и Vera Project. Музыка Лондона была показана в самых разных фильмах и телевизионных программах. Предыдущие лондонские группы включают Alcohol Funnycar, St. Bushmills Choir и Sanford Arms. В настоящее время он выступает в составе сиэтлской группы STAG.

[/fusion_text][/fusion_builder_column][/fusion_builder_row][/fusion_builder_container]

Рамки для количественных измерений FROT в живых клетках

, ¹, ¹, ², ², ³, ³, ² и ¹

Alexis Coullbob

¹ Унив.Grenoble Alpes, CNRS, LIphy, Grenoble, F-38000 France

Cécile M. Bidan

¹ Univ. Grenoble Alpes, CNRS, LIphy, Grenoble, F-38000 France

Chen Qian

² Химический факультет, Центр нанонаук (CENS), Мюнхенский центр интегрированных белковых исследований (CIPSM) и Мюнхенская инициатива по наносистемам (NIM) , Ludwig Maximilians-Universität München, Munich, Germany

Fabian Wehnekamp

² Химический факультет, Центр нанонаук (CENS), Мюнхенский центр интегрированных белковых исследований (CIPSM) и Мюнхенская инициатива по наносистемам (NIM), Людвиг Максимилиан -Universität München, Мюнхен, Германия

Christiane Oddou

^{3 ³
³
³ Alpes Alpes, Inserm Université Greenoble Alpes, Inserm U1209, UMR5309, F38700 La Tronche, France
Corinne Albigès-Rizo
³ Институт для продвинутых биология , Université Grenoble Alpes, INSERM U1209, UMR5309, F38700 La Tronche, France
Don.
C. Lamb ² Факультет химии, Центр нанотехнологий (CENS), Мюнхенский центр интегрированных белковых исследований (CIPSM) и Мюнхенская инициатива по наносистемам (NIM), Мюнхенский университет Людвига Максимилиана, Мюнхен, Германия
Орели Дюпон
¹ Унив. Grenoble Alpes, CNRS, LIphy, Grenoble, F-38000 France
¹ Univ. Grenoble Alpes, CNRS, LIphy, Grenoble, F-38000 France
² Химический факультет, Центр нанотехнологий (CENS), Мюнхенский центр интегрированных белковых исследований (CIPSM) и Мюнхенская инициатива по наносистемам (NIM), Ludwig Maximilians- Universität München, Munich, Germany
³ Institute for Advanced Biosciences, Université Grenoble Alpes, INSERM U1209, UMR5309, F38700 La Tronche, France
Автор, ответственный за переписку. Поступила в редакцию 13 декабря 2019 г.; Принято 17 марта 2020 г.
Открытый доступ Эта статья находится под лицензией Creative Commons Attribution 4. 0 International License, которая разрешает использование, совместное использование, адаптацию, распространение и воспроизведение на любом носителе или в любом формате при условии, что вы укажете оригинал. автор(ы) и источник, предоставьте ссылку на лицензию Creative Commons и укажите, были ли внесены изменения. Изображения или другие сторонние материалы в этой статье включены в лицензию Creative Commons для статьи, если иное не указано в кредитной строке материала.Если материал не включен в лицензию Creative Commons статьи, а ваше предполагаемое использование не разрешено законом или выходит за рамки разрешенного использования, вам необходимо получить разрешение непосредственно от правообладателя. Чтобы просмотреть копию этой лицензии, посетите http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/.Эта статья цитировалась в других статьях PMC. Abstract
Резонансная передача энергии Фёрстера (FRET) позволяет визуализировать расстояния в нанометровом масштабе и изменения расстояний.Такая чувствительность регулярно достигается в экспериментах с одиночными молекулами in vitro , но все еще проблематична в биологических материалах. Несмотря на многочисленные усилия, количественный FRET в живых образцах либо ограничен конкретными инструментами, либо ограничен сложностью требуемого анализа. С недавней разработкой и расширением использования биосенсоров на основе FRET становится необходимым позволить биологам получать количественные результаты, которые можно напрямую сравнивать. Здесь мы представляем новый метод калибровки и анализа, позволяющий проводить количественную визуализацию FRET в живых клетках с помощью простого флуоресцентного микроскопа.Помимо спектральных поправок на перекрестные помехи, два дополнительных поправочных коэффициента были определены из фотофизических уравнений, описывающих относительные различия в эффективности возбуждения и обнаружения. Калибровка выполняется за один шаг, что делает метод FRET с тремя изображениями (QuanTI-FRET) чрезвычайно надежным. Единственным требованием является образец с известной стехиометрией донор:акцептор, что естественно для внутримолекулярных конструкций FRET. Мы показываем, что QuanTI-FRET дает абсолютные значения FRET, не зависящие от инструмента или уровня экспрессии.Посредством расчета стехиометрии мы оцениваем качество данных, что позволяет уверенно использовать QuanTI-FRET неспециалистам.
Тематические термины: Биологическая флуоресценция, Широкопольная флуоресцентная микроскопия
Введение
Теория, лежащая в основе резонансного переноса энергии Ферстера (FRET), была впервые успешно описана в 1946 году, но ее применение к биологическим системам, особенно в живых клетках, только стал популярным в конце 1990-х годов благодаря клонированию флуоресцентных белков.С момента первого клонирования зеленого флуоресцентного белка (GFP) флуоресцентная микроскопия быстро стала стандартным инструментом в клеточной биологии. Флуоресцентное мечение позволяет локализовать интересующий белок в пространстве и времени в биологическом образце, от клеток до животных. Мечение нескольких белков в одном и том же образце использовалось для изучения белок-белковых взаимодействий с точки зрения колокализации. Однако при использовании стандартной флуоресцентной микроскопии определение межбелкового расстояния ограничивается дифракцией света, т.е.е., до сотен нанометров. Методы резонансного переноса энергии Ферстера (FRET) обходят этот барьер, позволяя обнаруживать расстояния менее 10 нанометров между донорным флуорофором и акцептором за счет безызлучательного переноса энергии, опосредованного диполь-дипольными взаимодействиями. Измерения FRET могут различать два белка, находящихся в одном компартменте или в прямом контакте. Более того, возможность измерения нанометрических вариаций позволяет обнаруживать конформационные изменения белков ^{¹ – ³} .На основе FRET был разработан большой класс флуоресцентных биосенсоров для мониторинга функции белков (киназа ^{⁴, ⁵}, ГТФаза ^⁶), сигналов кальция ^{⁷ 92, или совсем недавно молекулярная шкала ^{⁸ – ¹⁰} . Наиболее распространенный дизайн основан на элементе молекулярного распознавания в сочетании с двумя флуоресцентными белками (FP), экспрессированными в одной и той же аминокислотной последовательности (внутримолекулярный датчик FRET).Возможна также межмолекулярная конструкция FRET, в которой FP встроены в две независимые части. При этом кажущаяся стехиометрия может сильно варьироваться, что значительно затрудняет количественный анализ.}
Существует два основных подхода к измерению FRET в живых клетках: один основан на изменении интенсивности флуоресценции, а другой – на изменении времени жизни флуоресценции донора ^¹¹ . Флуоресцентная визуализирующая микроскопия в течение всего срока службы (FLIM) требует сложной аппаратуры и анализа и часто считается количественным методом измерения живых клеток.Были разработаны различные стратегии для измерения эффективности FRET по интенсивности флуоресценции донора и/или акцептора, некоторые из которых включали полное фотообесцвечивание одного флуорофора или специальные инструменты для спектральной визуализации ^{¹² – ¹⁴} . Метод, наиболее совместимый с динамической количественной FRET-визуализацией и визуализацией живых клеток, основан на испускании сенсибилизированных акцепторов. Поскольку собранная интенсивность флуоресценции сильно зависит от многочисленных инструментальных факторов (возбуждение, набор фильтров, чувствительность камеры и т. д.), этот подход требует нескольких поправок для расчета независимой от инструмента эффективности FRET.Литература богата различными поправочными коэффициентами и математическими выражениями индексов FRET ^{¹⁵ , ¹⁶} . Идея корректировки спектральных перекрестных помех и, по крайней мере, разницы в эффективности детектирования между донорными и акцепторными каналами возникла одновременно в одиночных молекулах ^{¹⁷ , ¹⁸} и в полях визуализации живых клеток ^{¹⁹ – ²¹} . В настоящее время общепризнано, что просачивание излучения донора в акцепторный канал и прямое возбуждение акцептора каналом возбуждения донора необходимо корректировать вычитанием их вкладов. Это требует получения трех различных сигналов, также называемых 3-кубовой стратегией при визуализации живых клеток ^²⁰ . Таким образом, кажущийся индекс FRET зависит от концентрации флуорофора, и даже при дополнительной нормализации прямое сравнение значений FRET, полученных независимо друг от друга, невозможно ^²² . Чтобы учесть фотофизические артефакты, нам нужно вернуться к физическим уравнениям и определить происхождение сигнала в каждом канале. Следующим препятствием является экспериментальное определение поправочных коэффициентов.Существующие методы требуют образцов с известной эффективностью FRET ^²³ или известной концентрацией ^²⁴ или даже дополнительного эксперимента с использованием акцепторного фотообесцвечивания ^²¹ .
В этой работе мы разъясняем теорию, основанную на исследованиях одиночных молекул ^²⁵, и адаптируем ее к визуализации живых клеток. Мы представляем новый метод надежного определения всех поправочных коэффициентов без каких-либо дополнительных экспериментов по фотообесцвечиванию или внешней калибровки эффективности FRET.Единственным требованием для калибровки является знание стехиометрии донор:акцептор, которая обычно известна по конструкции. Таким образом, калибровку можно выполнить непосредственно на интересующем образце или с помощью стандартов FRET ^²⁶ . Хотя в последнем случае можно точно измерить стехиометрию, эту информацию всегда можно использовать в качестве фактора качества для отбрасывания аберрантных пикселей. Специализированный микроскоп не требуется, поскольку метод QuanTi-FRET (количественное трехизображение) можно применять к любому триплету эпифлуоресцентных изображений, полученных с помощью коммерческих инструментов.Здесь мы демонстрируем, что QuanTI-FRET позволяет проводить абсолютные измерения FRET, которые не зависят от настройки прибора и концентрации флуорофора. Будучи надежным и включающим встроенную проверку качества данных, метод может уверенно использоваться неспециалистами, особенно для приложений биосенсоров на основе FRET.
Теория
Эффективность FRET, E, определяется как процент энергии, передаваемой от донорного флуорофора к акцепторному флуорофору, и увеличивается по мере уменьшения расстояния между донором и акцептором.Чтобы правильно рассчитать E по изображениям, необходимо учитывать факторы, влияющие на относительную эффективность возбуждения и обнаружения. Чтобы определить поправочные коэффициенты и получить как можно больше информации об образце, мы следуем схеме множественного возбуждения, предложенной Капанидисом и его коллегами для спектроскопии одиночных молекул ^¹⁸ и близкой к методу трех кубов при визуализации живых клеток. ^¹⁹ . Здесь мы использовали довольно сложную установку (рис.). Но единственным требованием является возможность отдельно возбуждать донорный и акцепторный флуорофоры и отображать оба канала, предпочтительно с помощью устройства разделения изображения для высокодинамичных образцов. Это требование также относится к подходам визуализации с тремя кубами. Быстро переключаясь между обоими источниками возбуждения и разделяя излучение на два канала на камере, мы получаем в двух последовательных снимках четыре изображения:
Подход QuanTI-FRET. ( A ) Показана схема широкопольной эпифлуоресцентной установки, используемой для проверки структуры.Три изображения получаются двумя снимками путем автоматического чередования лазерного возбуждения и разделения камеры на два канала обнаружения, соответствующие донорному и акцепторному каналам. ( B ) Основа для количественного анализа FRET. Для анализа необходимы три изображения, сочетающие детекцию в донорном и акцепторном каналах с возбуждением донора и акцептора. Этап калибровки позволяет определить четыре фактора, корректирующих перекрестные помехи, а также относительную эффективность возбуждения и обнаружения донорных и акцепторных флуорофоров.В результате рассчитываются независимые от прибора вероятности и стехиометрии FRET. Масштабная линейка: 20 мкм м.
I _DD : обнаруженный сигнал в канале донора после возбуждения на длине волны донора,
I _DA : обнаруженный сигнал в акцепте
I _AA : обнаруженный сигнал в акцепторном канале после возбуждения на акцепторной длине волны.
Четвертое изображение IAD не содержит информации, содержит только шум и отбрасывается. В принципе, для расчета эффективности переноса достаточно только IDD и IDA. Это было бы так, если бы фотоны, исходящие от донора и акцептора, имели одинаковую эффективность обнаружения. На практике такой инструмент невозможен, и необходимо учитывать несколько поправок, чтобы получить объективную количественную эффективность FRET. Третье изображение, IAA, не зависит от эффективности FRET, но требуется для расчета всех необходимых поправочных коэффициентов.
Можно записать интенсивность трех типов сигналов в зависимости от фотофизических и инструментальных параметров, количества донорных, nD, и акцепторных, nA, флуорофоров в рассматриваемом пикселе и вероятности FRET, E:
IAA = nalaσaexaφaηadetaem
1
1
IDD = ndldσdexd (1-e) φdηddetdem
2
ida = ndldσdexdeφaηadetaem + ndldσdexd (1-e) φdηadetdem + naldσdexaφaηadetaem
3
, где li — интенсивность возбуждения на длине волны, выбранной для возбуждения флуорофора i, σij — сечение поглощения j на длине волны возбуждения i, ϕi — квантовый выход i, а ηij — эффективность детектирования фотонов, испускаемых j в канале детектирования i. Экспрессия IAA является самой простой, поскольку зависит только от вида A (акцептор). Для IDD необходимо учитывать вероятность передачи энергии акцептору E, так как акцепторные фотоны в этом канале не регистрируются. Наконец, для выражения IDA, FRET-изображения, необходимо принимать во внимание не только сигнал, исходящий от FRET-событий, но и два термина перекрестных помех: (i) просачивание фотонов, испускаемых донором, в акцепторный канал и (ii) прямое возбуждение акцепторных молекул с определенной длиной волны донора.Некоторые параметры в приведенных выше уравнениях трудно измерить. Мы придерживаемся прагматичного подхода и избегаем систематического определения всех двенадцати неизвестных. Во-первых, мы можем упростить выражения, определив поправочный коэффициент на просачивание как αBT и поправочный коэффициент прямого возбуждения как δDE. Кроме того, поправочный коэффициент для различной эффективности обнаружения в обоих каналах определяется как γM, и аналогичным образом поправочный коэффициент для различной эффективности возбуждения в обоих каналах определяется как βX
Следовательно, запись упрощается, и путем обращения предыдущего набора уравнений (см. Дополнительную информацию) мы получаем вероятность FRET: как у Ли и др. .^²⁵, мы определяем стехиометрию как относительное количество донорных молекул по отношению к общему количеству флуорофоров в каждом пикселе:
Из уравнений. ( ¹ ) и ( ² ), получаем выражения для nD и nA и подставляем их в уравнение ( ⁶ ). Путем упрощения с поправочным коэффициентом возбуждения βX, определенным в уравнении. ( ⁴ ), уравнение ( ⁶ ) сводится к:
S=11+IAAIDD1βXγM(1−E)
7
Чтобы разделить стехиометрию и вероятность FRET, мы заменим E выражением, данным в уравнении.( ⁵ ). Наконец, стехиометрия выглядит так:
S=IDA-αBTIDD-δDEIAA+γMIDDIDA-αBTIDD-δDEIAA+γMIDD+IAA/βX
8
. мы получаем два основных уравнения, определяющих вероятность FRET и стехиометрию в каждом пикселе: и IAA, а также четыре параметра: αBT, δDE, γM и βX.Все четыре поправочных коэффициента получены из подробных выражений собранных интенсивностей флуоресценции в трех разных каналах. Обозначения были выбраны в соответствии с консенсусом в поле одиночных молекул ^²⁷ с дополнительным надстрочным индексом для прямого понимания роли каждого поправочного фактора. Поправочные коэффициенты перекрестных помех уже широко используются в 3-кубовых подходах ^²¹ и легко поддаются калибровке.Визуализация образца только донора, in vitro или in cellulo, обеспечивает αBT; аналогичным образом, визуализация образца, состоящего только из акцепторов, дает δDE. αBT зависит только от спектра излучения донора, набора фильтров и спектрального отклика камеры. δDE зависит от спектра возбуждения акцептора, а также от соотношения мощностей освещения в двух каналах. В одних и тех же условиях эксперимента (одинаковые флуорофоры, один и тот же набор фильтров и интенсивность освещения) поправки на перекрестные помехи, которые должны быть приведены в IDA, зависят только от количества обоих флуорофоров, заданного IDD и IAA, в то время как αBT и δDE не меняются.
Два других поправочных коэффициента, γM («M» для излучения) и βX («X» для возбуждения), определить труднее. γM объясняет разницу в измеренном испускании флуоресценции при возбуждении одинакового количества молекул донора или акцептора. Следовательно, это связано с квантовым выходом и эффективностью регистрации установки в каждом канале. βX учитывает разницу в поглощении энергии для каждого канала. Следовательно, это связано с интенсивностью освещения и поперечным сечением поглощения каждого флуорофора.γM уже был описан в одиночной молекуле ^¹⁷ и в визуализации живых клеток ^²¹ . Для определения значения γM было разработано несколько косвенных стратегий: фотообесцвечивание акцептора ^{²¹ – ²⁸} , использование образца FRET с известной эффективностью FRET ^²³ , интерполяция двух конструкций с очень разными FRET значения ^²⁹ или соотношение между 1/S и E ^²⁵ . βX был введен Lee и др. . ^²⁵ для экспериментов с отдельными молекулами, и аналогичный параметр также был эмпирически введен Chen et al . для клеточных экспериментов ^²⁹ . Если βX и γM определяются независимо, βX не влияет на эффективность FRET, а только на стехиометрию (см. уравнения (⁹) и (¹⁰)). Поскольку стехиометрия в исследованиях отдельных молекул часто ограничивается только донорными, только акцепторными и донорно-акцепторными комплексами, нет необходимости точно знать S и βX.С другой стороны, мы покажем, что S может быть очень полезен в экспериментах с живыми клетками, даже если конструкция FRET имеет четко определенную стехиометрию.
Калибровка поправочных коэффициентов
Описав теорию непосредственно на основе физических параметров флуорофоров и экспериментальной установки, трудной частью расчета количественного FRET является определение четырех поправочных коэффициентов. Как упоминалось ранее, поправочные коэффициенты перекрестных помех измеряются только для донорных и только акцепторных клеток и рассчитываются как отношения
берется каждый пиксель всех отображаемых ячеек и среднее значение.Поправочные коэффициенты γM и βX не могут быть определены по образцам только донора или только акцептора, где вероятность FRET равна нулю (или не определена). Необходима еще одна часть информации, которую можно найти в стехиометрии. Уравнение ( ¹⁰ ) можно переписать как
βXγMIDD+βXIDAcorr=S1−SIAA,
12
, которое представляет собой уравнение плоскости в трехмерном пространстве, определяемое {IDD,IDAcorr,IAA}. Если стехиометрия известна, стратегия заключается в подгонке экспериментальных данных {IDD,IDAcorr,IAA} к плоскости и, таким образом, определении βXγM и βX.Если интересующий образец FRET имеет неизвестную стехиометрию, необходимо провести еще один калибровочный эксперимент с зондом FRET определенной стехиометрии. Практически значения пикселей всего набора данных (N ячеек) собираются в векторах X=[IDD,IDAcorr] и Y=[IAA], а матрица A=[γMβX,βX] определяется с использованием XA=Y по наименьшему — квадратный подход. Если образец показывает только одно значение FRET E с различной интенсивностью флуоресценции (т.). В результате в набор данных может поместиться бесконечное количество плоскостей. Поэтому для хорошего определения βX и γM необходимо, чтобы значения FRET набора данных были достаточно разбросаны. Визуализация и расчет поправочных коэффициентов в трехмерном пространстве {IDD,IDAcorr,IAA} является оригинальностью данной работы. Мы сравниваем наш подход с двумя другими родственными методами в последнем разделе.
Измерения FRET по трем стандартам FRET: C5V, C17V и C32V. ( A ) Триплетные флуоресцентные изображения показаны для типичных клеток, трансфицированных тремя стандартами FRET: C5V (короткий линкер), C17V (средний линкер) и C32V (длинный линкер).Рассчитанные карты FRET для отдельных ячеек показаны справа в той же цветовой шкале. Самый высокий FRET наблюдается для самой короткой линкерной конструкции C5V и снижается до самой низкой FRET-конструкции C32V. Масштабная линейка: 20 мкм м. Цветная полоса: эффективность FRET в %. ( B ) Точечная диаграмма всех значений пикселей из всех ячеек, отображаемых в трехмерном пространстве {IDD, IDAcorr, IAA} и подобранной плоскости, вид сбоку на вставке. Три стандартные совокупности FRET, образующие три отдельных облака, лежат в плоскости, определяемой βX и γM.( C ) Коробчатая диаграмма, на которой собраны значения FRET C5V, C17V и C32V, измеренные независимо в двух разных лабораториях ([A] и [B]). После калибровки были получены такие же медианные значения FRET.
Результаты
Валидация QuantI-FRET с использованием стандартов FRET
Для проверки предлагаемого метода в экспериментах с живыми клетками мы использовали стандарты FRET, разработанные Thaler et al . ^²⁴ и Кошик и др. . ^²⁶ .Стандарты FRET состоят из пары флуоресцентных белков, донора (Cerulean) и акцептора (Venus), разделенных аминокислотной последовательностью переменной длины. В настоящей работе для калибровки экспериментальной установки использовали три стандарта: C5V, C17V и C32V, где линкер между донором и акцептором состоял из 5, 17 и 32 аминокислот соответственно. Ожидалось, что конструкция с самым коротким линкером, C5V, будет демонстрировать самую высокую эффективность FRET, и эффективность FRET будет снижаться по мере увеличения длины линкера ^²⁶ .Стандарты FRET экспрессировали в клетках Hela и визуализировали на установке, описанной на рис.
В качестве первого шага калибровки необходимо определить поправки на перекрестные помехи, соответствующие донору, Cerulean, и акцептору, Venus. Следовательно, были отображены клетки только Cerulean и клетки Venus only. Используя уравнение ( ¹¹ ), проницаемость для Cerulean была рассчитана как αBT = 0,421 ± 0,002 (10 клеток), а прямое возбуждение Венеры как δDE = 0,1100 ± 0,0008 (12 клеток). Здесь, примерно с 10 ячейками, была получена очень хорошая неопределенность.Как правило, следует рассматривать как минимум 5 разных ячеек и проверять по попиксельному распределению значений поправочных коэффициентов, что один пик четко определен. Пиксельные распределения αBT и δDE, полученные в этой работе, показаны в дополнительной информации (рис. ^S1) . Второй этап заключается в определении γM и βX, факторов, корректирующих разницу в эффективности детектирования и возбуждения в разных каналах. На фиг.. Все значения пикселей {IDD, IDA, IAA} всех клеток, экспрессирующих три конструкции, были собраны в один набор данных и сопоставлены с уравнением плоскости. ( ¹² ) (рис. ). Была получена маска каждой ячейки, и были сохранены только пиксели, исходящие из ячеек. В этом уравнении есть дополнительная неизвестная S. На этом шаге необходимо сделать предположение относительно S. По замыслу конструкции CxV должны иметь в среднем один донор на один акцептор, , т.е. . S=0,5. Это предполагает, что эффективность созревания донора и акцептора близка к 1.Мы обсудим влияние созревания в следующем разделе. Для S = 0,5 уравнение плоскости сводится к:
βXγMIDD+βXIDAcorr=IAA.
13
Заданный набор условий эксперимента (мощность лазера, набор фильтров, флуорофоры, стехиометрия) соответствует одной плоскости, и в этой плоскости заданная эффективность FRET соответствует линии. Как видно на рис., графики рассеяния трех стандартов выглядят как линейные облака, лежащие в одной плоскости, определяемой βX и γM и предполагаемой стехиометрией S (S=0.5, 1 донор:1 акцептор). Здесь методом наименьших квадратов аппроксимация плоскости дала βX=1,167±0,008 и γM=2,10±0,02 с коэффициентом детерминации R2=0,995.
После определения всех поправочных коэффициентов можно измерить вероятность FRET. Поскольку этот набор данных использовался для калибровки с гипотезой S=0,5, стехиометрия не может быть выходом для этого набора калибровочных данных. Тем не менее никаких предположений относительно E не делалось, поэтому вероятность FRET можно рассчитать на том же наборе данных, который использовался для калибровки.Если интересующий эксперимент представляет достаточно широкое распределение вероятностей FRET для определения плоскости в 3D, нет необходимости в другом эксперименте со стандартами FRET для калибровки. Следовательно, калибровка может быть выполнена на лету на образцах с известной стехиометрией.
Было измерено более 25 клеток Hela, экспрессирующих одну конструкцию CxV. Средняя вероятность FRET составила EC5V=51,1 (s.d=12,2, 26 клеток) для C5V, EC17V=43,1 (s.d=11,8, 25 клеток) для C17V и EC32V=35,1 (s.d=11,5, 27 кл.) для C32V, рассчитано более чем на 3⋅106 пикселей. Неопределенность возникает скорее из-за изменчивости от ячейки к ячейке, чем от статистики пикселей. Следовательно, было взято среднее значение FRET на клетку (рис., набор данных [A]), а неопределенность рассчитана как стандартная ошибка среднего выхода: EC5V = 50,3 ± 0,4, EC17V = 41,7 ± 0,8 и EC32V = 35,1 ± 0,8. Чтобы убедиться, что вероятность FRET не зависит от интенсивности флуоресценции, был рассчитан коэффициент ранговой корреляции Спирмена между E и IAA, единственным каналом, на который не влияет FRET и который связан только с концентрацией флуорофора.Собрав данные всех трех стандартов (N = 5⋅106), полученный коэффициент Спирмена составил ρ = 0,04, что подтверждает отсутствие корреляции между интенсивностью флуоресценции и рассчитанной вероятностью FRET. Это также верно по пикселям на основе одной клетки (см. Дополнительный рисунок ^S2) и по ячейкам при сравнении всех ячеек, выражающих один стандарт FRET (см. Дополнительный рисунок ^S3). Точно так же мы поставили под сомнение влияние поправочного фактора γM, рассчитав коэффициент Спирмена между E и общей интенсивностью флуоресценции донора (γMIDD+IDAcorr) без поправки, ρ=0.111 (γM=1, N=5⋅106) и с поправкой ρ=0,045 (γM=2,10, N=5⋅106). Следовательно, поправка на различную эффективность обнаружения снижает корреляцию в 2,5 раза между интенсивностью флуоресценции донора и рассчитанной вероятностью FRET.
Целью метода QuanTI-FRET является обеспечение возможности сравнения экспериментов на основе FRET из различных исследований т.е. ., полученных независимо в разных лабораториях мира. Чтобы проверить это, мы провели те же самые эксперименты второй раз совершенно независимым способом: с другим инструментом, в другой стране, другой командой на другой культуре клеток со свежими конструкциями, заказанными непосредственно у Addgene. По сравнению с установкой, описанной на рис. , во второй установке использовался объектив с большим увеличением (100 крат против 40 крат), другой источник лазерного излучения (два непрерывноволновых лазера вместо суперконтинуального лазера белого света) и использовались две камеры EMCCD вместо камеры sCMOS. для обнаружения. Экспериментальные данные были проанализированы точно таким же образом. Калибровка дала следующие поправочные коэффициенты αBT=0,467±0,001 (12 ячеек) и δDE=0,101±0,003 (12 ячеек) для перекрестных помех и βX=2,03±0,07 и γM=1.35±0,07 (R2=0,82) для поправочных коэффициентов возбуждения и эмиссии. Вероятность FRET была измерена для трех стандартов FRET, дающих EC5V=50,2±1,7 (10 клеток), EC17V=43,0±1,6 (12 клеток) и EC32V=32,9±1,5 (12 клеток) (рис., набор данных [B]). Для облегчения сравнения поправочные коэффициенты и вероятности FRET из лаборатории [A] и [B] собраны в дополнительных материалах (таблица ^S1) . Изменчивость в этом втором наборе данных была больше, о чем свидетельствует меньший коэффициент детерминации (R2=0. 82) трехмерной подгонки и стандартного отклонения вероятности FRET для каждой конструкции. Тем не менее полученные значения FRET прекрасно согласуются с первым набором данных ([A]). Следовательно, мы показываем, что измерение FRET с помощью метода QuanTI-FRET является количественным: абсолютные значения FRET имеют смысл и могут сравниваться в разных лабораториях.
Использование преимущества S
До сих пор стехиометрическое значение использовалось только для калибровки системы. Однако, как только экспериментальная система откалибрована, анализ QuanTI-FRET может независимо определять E и S.В этом случае из S можно извлечь дополнительную информацию. Как и в исследованиях отдельных молекул, полезным инструментом является двумерная гистограмма, объединяющая гистограммы стехиометрии и вероятности FRET (рис. ). Теоретически стандартные конструкции с 1 донором на 1 акцептор должны выглядеть как облако, соответствующее их средней эффективности FRET, E0 и S=0,5. Известная стехиометрия 1:1 донор:акцептор также приемлема для конструкции биосенсора, которая содержит как донорные, так и акцепторные флуоресцентные белки, которые сворачиваются и созревают с высокой эффективностью. Однако при поиске взаимодействий между различными белками ожидается доля только донорных и/или только акцепторных конструкций. Если на изображении также присутствуют свободные акцепторы, кажущаяся вероятность FRET остается постоянной, но стехиометрия падает (рис. ). Напротив, если в конструкции 1:1 присутствует свободный донор, затрагиваются как S, так и E. Эту вариацию можно описать теоретически. Если раствор, содержащий донорно-акцепторную конструкцию nD0 со средней эффективностью FRET E0, смешивается со свободным донором nDfree, кажущаяся вероятность FRET и кажущаяся стехиометрия определяются по формуле (см. Дополнительную информацию):
Eapp=11+ 1-E0+nfreeD/n0DE0andSapp=1+nfreeD/n0D1/S0+nfreeD/n0D
14
Влияние свободного донора или свободного акцептора в образце.( A ) Теоретическая гистограмма S-E с траекториями, соответствующими добавлению свободного донора или свободного акцептора к конструкции с соотношением донора и акцептора 1:1. Синий диск представляет собой область, где могут появиться образцы чистых доноров, тогда как зеленый эллипс — это место, где могут появиться образцы свободных акцепторов. ( B ) Экспериментальная гистограмма зависимости S от E для конструкций, показывающих разные значения FRET (C32V и C5V) или разные стехиометрии (CVC и VCV), а также чистый донор (Cerulean) и чистый акцептор (Venus).Эта гистограмма была рассчитана с использованием только поправочных коэффициентов перекрестных помех и объединения результатов разных экспериментов. ( С ). Та же экспериментальная гистограмма E-S с полной калибровкой, включая γM и βX. На полностью скорректированной двумерной гистограмме стехиометрия и вероятность FRET не коррелированы (ρ=0,02, N=5⋅106). ( D ) Типовой триплет изображений, показывающий клетку, экспрессирующую C32V, с низким отношением сигнал/шум, масштабная линейка 15 μ m. ( E ) Соответствующие карты RAW E и S и карта FRET для изображений на панели D после фильтрации взвешенным гауссовым фильтром.( F ) Соответствующая гистограмма стехиометрии и веса (W) в зависимости от стехиометрии (линия). Для весовой функции мы использовали гауссиан со средней стехиометрией S = 0,5 и дисперсией σS = 0,1 (уравнение 16). Соответствующая карта весов W показана в ( G ). ( H ) Профили линий, соответствующие трем картам, показанным на панели ( E ). Из-за высокой интенсивности фона в эндосоме эффективность FRET падает (тонкая серая линия). Эта аномалия также наблюдается в стехиометрии (синий).Взвешивая изображение с измеренной стехиометрией, такие артефакты можно распознать (пурпурный).
Теперь мы можем написать аналитическую формулу, описывающую это сочетание на гистограмме E-S:
Sapp=E0/Eapp1/S0+E0/Eapp-1,
15
, схематично показанная на рис. В уравнениях (²) и (³) мы предположили, что все доноры были способны к FRET , т.е. ., имели акцепторного партнера. Если это не так и существуют свободные доноры, то E становится очевидной FRET-вероятностью Eapp, как в уравнении.( ¹⁴ ). Если экспериментальную гистограмму E-S можно подогнать под уравнение ( ¹⁵ ), может быть извлечена вероятность FRET, E0 конструкции 1:1. Присутствие свободных доноров может быть связано с плохой эффективностью акцепторного флуорофора для укладки. Как показано выше, этот случай можно легко увидеть и обработать с помощью метода QuanTI-FRET. Наличие свободных акцепторов не влияет на эффективность FRET после калибровки системы. Если в калибровочных образцах присутствуют свободные акцепторы, следует, по крайней мере, оценить и принять во внимание эффективную стехиометрию, чтобы получить надежную калибровку и избежать распространения погрешностей в интересующих измерениях.Если присутствуют как свободные доноры, так и свободные акцепторы, ситуация усложняется из-за ансамблевого измерения, проводимого в каждом пикселе. Но, к счастью, большинство биосенсоров на основе FRET образованы вариантами GFP, в частности парой CFP/YFP, которые хорошо сворачиваются ^{³⁰ , ³¹} .
Гистограмма E-S 2D дает представление о качестве калибровки. Теоретически для образца с фиксированной стехиометрией вероятность FRET и стехиометрия не должны коррелировать, что приводит к горизонтальным облакам на двумерной гистограмме.На рисунке показаны экспериментальные данные этой работы с коррекцией перекрестных помех, но с βX и γM, равными 1. Конструкции C5V и C32V не лежат на горизонтальной линии, тогда как они должны иметь одинаковую стехиометрию. Напротив, при полной калибровке βX и γM (рис. ) два облака лежат на горизонтальной линии, соответствующей S=0,5 (коэффициент корреляции Спирмена между E и S: ρ=0,02, N=5⋅106 для C5V -C17V-C32V).
После калибровки системы с помощью датчиков FRET с известной стехиометрией стехиометрия становится результатом анализа QuanTi-FRET.Два дополнительных стандарта FRET были визуализированы в тех же условиях, что и раньше, CVC (2 донора:1 акцептор) и VCV (1 донор:2 акцептора) ^²⁴ . Поскольку эти две конструкции не использовались для определения γM и βX, никаких предположений относительно их стехиометрии не делалось. Обе конструкции были построены с одной и той же парой флуорофоров и отображались с использованием одних и тех же условий (набор фильтров, мощность лазера, камера), следовательно, калибровка все еще была действительна. Практически экспериментальные результаты дали S=68.9 ± 0,2 для CVC (24 ячейки) с ожидаемым значением 66% и S = 35,1 ± 0,2 для VCV (9 ячеек) с ожидаемым значением 33% (дополнительный рисунок ^S4). Важно отметить, что эксперименты CVC и VCV хорошо откалиброваны и проявляются в виде горизонтальных облаков на гистограмме E-S (рис. ). На той же гистограмме популяция только акцепторов (Венера) была обнаружена с очень низким значением стехиометрии (S = 7 ± 2, 10 клеток, дополнительный рисунок ^S4), как и ожидалось, и популяция только доноров также обнаружена там, где ожидается, что стехиометрия близка к 1 (S=98.7 ± 0,4, 10 ячеек, дополнительный рисунок ^S4).
В случае образца с фиксированной стехиометрией, как в случае с большинством биосенсоров на основе FRET, S все же может дать важную информацию о достоверности. Обычный способ определить неопределенность в отношении пикселя — полагаться на статистику фотонов: если сигнал флуоресценции высокий, предполагается высокая достоверность. Это, безусловно, верно для чистой флуоресцентной визуализации, но в случае FRET бывают случаи, когда высокая интенсивность флуоресценции возникает в пикселях, где FRET смещен.Например, на FRET может влиять локальная химическая среда (pH), локальная скученность или любое неодинаковое влияние на флуоресценцию донора и акцептора. Пример показан на рис. , где более низкая, чем ожидалось, эффективность FRET наблюдалась в некоторых ярких внутриклеточных везикулах. Соответствующие необработанные результаты анализа на основе пикселей показаны на рис. (Sraw и Eraw), а профили линий нанесены на график (рис. ). В этом примере пятно, указанное стрелкой, имеет высокую интенсивность флуоресценции в трех каналах, но стехиометрия отличается от ожидаемых 50% (близко к 65%).Точно так же темные области изображения вне клетки также показывают отклонения от ожидаемой стехиометрии. Мы определяем индекс достоверности W как:
, где S0 — ожидаемое значение S, а σS — параметр для настройки чувствительности. W отображает отклонение от ожидаемой стехиометрии как оценку от 0 до 1 (S = S0) с гауссовой формой (рис. ). Этот индекс достоверности можно использовать непосредственно для отображения карт FRET со значениями FRET с цветовой кодировкой и W с кодом яркости. Чтобы сделать еще один шаг, индекс достоверности можно вставить в пространственный фильтр.Действительно, карты FRET часто требуют пространственного усреднения, фактическое разрешение ограничено распространением видов FRET и обычно превышает размер пикселя. Поэтому был разработан взвешенный фильтр Гаусса, в котором эффект ядра Гаусса G (обычно 7 × 7 пикселей ² ) был локально взвешен с W (рис. ) следующим образом:
Efilt=(W∘E)∗GW∗ G,
17
, где * обозначает свертку, а ° произведение Адамара, E и W рассматриваются как матрицы, соответствующие необработанному изображению FRET, а веса определены в уравнении. ( ¹⁶ ), Efilt — это отфильтрованная карта FRET. Поскольку распределение Гаусса никогда не достигает нуля, был применен дополнительный порог, основанный на локальном весе рассматриваемого пикселя. Пример показан на рис., применение взвешенного фильтра Гаусса (σS=0,1,σGauss=1,5 и порог по W, Wth=0,5) полностью устраняет фон вокруг ячеек, а также очень тусклые области внутри ячеек, а также яркий везикула с аномальной стехиометрией (рис. ).
Обсуждение
Определения вероятности FRET и стехиометрии, используемые в QuanTI-FRET, математически эквивалентны тому, что было введено ранее Ченом и др. .^²⁰ (γM≡G и βX≡1/(G⋅k)) и Ли и др. . ^²⁵ (γM≡γ и βX≡β). Поэтому мы сравнили характеристики QuanTI-FRET с этими двумя другими методами. В работе Чена и др. . ^²⁹ , физическое происхождение параметров подробно не описывалось, поскольку γM уже было введено Залом и Гаскойном ^²¹ , а второй параметр k был рационально определен из интенсивностей с поправкой на γM для учета стехиометрия. Предлагаемая калибровка была достигнута в два отдельных этапа. Во-первых, для определения γM (также известного как G) потребовались две конструкции с определенной и четко разделенной эффективностью FRET. Во-вторых, был измерен стандарт FRET с известной стехиометрией для расчета другого параметра, k, с использованием G, определенного на этапе 1. В работе Чена калибровка была достигнута путем визуализации стандартов FRET C5V и CTV, где линкер T представляет собой 229-аминогруппу. -кислотный домен TRAF белка TRAF2 ^²⁴ . Однако наблюдение за трехмерным представлением всех стандартов, включая CTV, изображенных в настоящей работе, показывает, что CTV не лежит в той же плоскости, что и C5V, C17V и C32V (дополнительный рис.^S5). Это также видно на гистограмме ES 2D, где облако CTV наклонено (дополнительный рисунок ^S5). Эти наблюдения согласуются с более поздней работой Koushik и Vogel ^³² и демонстрируют полезность трехмерного представления интенсивности флуоресценции, а также двумерной гистограммы E-S для проверки качества экспериментальных данных. Анализ набора экспериментальных данных [A] методом Чена дал результаты, близкие к методу QuanTI-FRET: G=2.19±0,02 для сравнения с γM=2,10±0,02 и 1/(G⋅k)=1,135±0,005 для сравнения с βX=1,167±0,008 (см. таблицу). Однако анализ второго набора данных [B] дал разные результаты между двумя методами: G=3,63±1 для сравнения с γM=1,35±0,07 и 1/(G⋅k)=1,02±7 для сравнения с βX=2,03. ±0,07, что дает менее надежные вероятности FRET (соответственно 16%, 24% и 30% для C32V, C17V и C5V). Это несоответствие возникает из-за того, что набор данных менее однороден, а количество пикселей, содержащих ячейки, ограничено, и двухэтапная калибровка G и k менее надежна, чем одноэтапная подгонка метода QuanTi-FRET.В работе Ли и др. . ^²⁵ , калибровка состоит из первого расчета Eraw и Sraw только с поправками на спектральные перекрестные помехи, а затем подгонки линейного соотношения между 1/Sraw и Eraw при допущении стехиометрии 1:1 (см. Дополнительную информацию). Этот метод дал результаты, очень похожие на QuanTI-FRET: γ=2,37±0,05 для сравнения с γM=2,10±0,02 и β=1,13±0,01 для сравнения с βX=1,167±0,008, в результате чего значения FRET немного ниже для стандартов FRET ( ΔЕ=3%). Второй набор данных ([B]) также использовался для проверки метода Ли, что привело к снижению значений FRET на ΔE=8% с относительной разницей 11% для βX и 28% для γM. Поправочные коэффициенты и результирующие значения FRET для трех стандартов FRET приведены в таблице. Средние вероятности FRET очень хорошо согласуются между методами QuantI-FRET и Чена, для метода Ли наблюдается систематическая разница около 3%. Все три метода можно рассматривать как количественные.
Таблица 1
Систематическое сравнение метода QuantTI-FRET с предыдущей работой Lee et al .^²⁵ и Чен и др. . ^²⁹ Набор данных [A] был проанализирован с использованием трех методов, результирующие поправочные коэффициенты и вероятности FRET для C5V, C17V и C32V приведены в этой таблице, а неопределенность для βX и γM получена в результате другого бутстрап-анализа.
2 3190 Ли 5,3192 ^²⁵ βx Γm γm C5V C5V C17V C32V
Quanti-Fret 1167±0,008 2,10±0,02 50,3±0,4 41,7±0,8 35,1±0,8
1,13 ± 0,01 1,13 ± 0,01 2,37 ± 0,05 47,5 ± 0,4 38,9 ± 0,8 32,4 ± 0,8
Чен в Аль. ^{^{29 ^²⁹}} 1,135 ± 0,005 935 ± 0,005 2,19 ± 0,02 49,4 ± 0,4 40,8 ± 0,8 34,2 ± 0,8
Для дальнейшего тестирования относительной надежности трех методов, систематический загрузчик было проведено тестирование экспериментальных данных ([A] с C5V, C17V и C32V).Весь экспериментальный набор данных был случайным образом разделен для создания искусственно меньших наборов данных и предоставления доступа к статистическим ошибкам при определении поправочных коэффициентов (как указано до сих пор). Стандартное отклонение γM составляло около 0,12 (QuanTI-FRET и Chen’s) и 0,23 (Lee’s) для минимальных тестируемых размеров выборки между 1000 и 1300 точками. Было обнаружено, что стандартное отклонение βX составляет около 0,04 (QuanTI-FRET и Чена) и 0,07 (Ли) для того же диапазона размеров выборки. Во всем диапазоне размеров выборки (от 10 ³ до 10 ⁵ пикселей) стандартное отклонение обоих поправочных коэффициентов, полученных методом Ли, оставалось больше, чем значения, полученные Ченом и QuanTI-FRET (см.^S6). Этот анализ показывает, что метод Ли менее устойчив к длине набора данных, вероятно, из-за подгонки 1/S, которая расходится при малых значениях S.
Был проведен другой тест путем уменьшения диапазона FRET набора калибровочных данных путем альтернативного учета только двух из трех стандартов (C5V-C17V, C17V-C32V и C5V-C32V). В этом случае метод Чена больше не действует для пар C5V-C17V и C17V-C32V, что приводит к относительным вариациям 76% для G и 38% для βX (см.^S6). Действительно, поскольку метод Чена основан исключительно на сравнении средней интенсивности двух популяций, неопределенность растет по мере уменьшения расстояния FRET. Методы QuanTI-FRET и Ли, подбирая общее распределение, хорошо показали себя в этом стендовом тесте (относительные вариации 14% и 22% для γM соответственно с QuanTI-FRET и Ченом, и 7% и 12% соответственно для βX, см. Дополнение). Рис. ^S5).
В целом, даже если три метода являются количественными в лучшем случае, было показано, что QuanTI-FRET более устойчив к дисперсии набора данных, длине и диапазону FRET.Одношаговая калибровка в представлении 3D IDD, IDAcorr, IAA для непрерывного распределения эффективности FRET позволяет проводить калибровку на лету самого интересующего образца при условии определенной стехиометрии и распределения эффективности FRET в диапазон стендовых испытаний (не менее 5%). Вдохновившись литературой по одиночным молекулам, мы можем дополнительно использовать стехиометрию для проверки качества экспериментальных данных и, таким образом, отфильтровать полученные изображения FRET.
Заключение
Опираясь на предыдущие результаты экспериментов FRET с живыми клетками и одиночными молекулами, мы представляем новую схему, позволяющую проводить количественную визуализацию FRET в живых клетках с помощью простого многоканального эпифлуоресцентного микроскопа.Здесь мы продемонстрировали согласованность метода на двух разных системах микроскопии в разных лабораториях. Метод QuanTI-FRET не требует специального оборудования для определения спектров или срока службы, а также разработки специального оборудования. Устройства разделения изображения и светодиодное возбуждение теперь коммерчески доступны и позволяют использовать те же протоколы получения изображений, что и экспериментальная система, используемая в этой работе. Калибровка QuanTI-FRET не требует фотообесцвечивания акцептора, очищенных белков или известных образцов FRET.Единственным требованием является образец известной стехиометрии (как и другие количественные методы) с широким распределением FRET, который может быть получен непосредственно из интересующей конструкции FRET (например, биосенсоры на основе внутримолекулярного FRET). Тем не менее, рекомендуется независимая калибровка с использованием стандартов FRET, поскольку она позволяет независимо оценить эффективность и стехиометрию FRET. Было продемонстрировано, что метод QuanTI-FRET является количественным и надежным, с дополнительным преимуществом встроенной проверки качества данных.
Методы
Клетки и плазмиды
Все плазмиды были подарены Стивеном Фогелем: C5V (плазмида Addgene № 26394), C17V (плазмида Addgene № 26395), C32V (плазмида Addgene № 26396), mVenus N1 (плазмида Addgene 73 №) , mCerulean C1 (плазмида Addgene № 27796), VCV (плазмида Addgene № 27788), CVC (плазмида Addgene № 27809) и CTV (плазмида Addgene № 27803). Плазмиды амплифицировали в E.Coli (DH5 α ) и очищали с использованием набора NucleoBond Xtra от Macherey-Nagel GmbH (http://www.mn-net.com). Клетки Hela культивировали в модифицированной по Дульбекко среде Игла с высоким содержанием глюкозы, дополненной эмбриональной бычьей сывороткой (10%), GlutaMAX (Gibco) и пенициллином/стрептомицином (1%). Клетки трансфицировали Lipofectamine 2000 (Invitrogen) и Opti-MEM (Gibco), затем инкубировали в среде Fluorobrite DMEM (Gibco) в течение ночи и, наконец, визуализировали в среде Leibovitz L-15 (Gibco) без фенолового красного.
Получение микроскопических изображений, Гренобль, установка [A]
Визуализация проводилась с помощью широкопольной системы визуализации на основе корпуса инвертированного микроскопа Olympus IX83, оснащенного самодельным разделителем изображения, соединенным с sCMOS-камерой (ORCA Flash V2, Hamamatsu) как нарисовано на рис.. Возбуждение осуществлялось в режиме эпифлуоресценции с помощью суперконтинуального лазера белого света (Fianium), соединенного с мощным AOTF (Fianium), который управлялся с помощью блока FPGA-RT (National Instruments), закодированного с помощью Labview. Это устройство синхронизировало попеременное лазерное возбуждение с захватом камеры. Изображения были получены при 37 °C с помощью Micromanager и объектива 40x. Донорный флуорофор возбуждали на длине волны 442 нм (мощность 200 мкМ Вт), акцептор — на 515 нм (мощность 240 мкМ Вт).Сначала флуоресцентное излучение отделялось от возбуждения с помощью тройного светоделителя (Brightline R442/514/561 Semrock) в корпусе микроскопа. Далее флуоресцентное излучение разделяли с помощью светоделителя на 510 нм (Chroma) и фильтровали с помощью фильтра 475/50 (BrightLine HC, Semrock) для донорного канала и длиннопроходного фильтра 519/LP (BrightLine HC, Semrock) для акцепторного канала. Таким образом, на двух снимках камеры было получено четыре изображения со всеми комбинациями донорно-акцепторного возбуждения и донорно-акцепторного излучения.
Получение микроскопических изображений, Мюнхен, установка [B]
Изображения были получены на инвертированном микроскопе Nikon Eclipse Ti с самодельным возбуждением эпифлуоресценции и широкопольным детектированием. Для всех измерений использовался масляный иммерсионный объектив с увеличением 100x (Apo-TIRF 100x Oil/NA 1,49, Nikon). Образцы возбуждались диодными лазерами с длиной волны 445 нм (MLD, Cobolt) и 514 нм (Fandango, Cobolt), соединенными с AOTF (PCAOM LFVIS5, Gooch & Housego), управляемым блоком FPGA (cRIO-9074, National Instruments).Излучение флуоресценции отделялось от пути возбуждения с помощью светоделителя с тройной линией 445/514/594. Излучение донора и акцептора разделяли с помощью дополнительного светоделителя 514LP, а затем спектрально фильтровали с помощью полосовых фильтров 480/40 и 555/55 соответственно перед регистрацией на отдельных камерах EMCCD (DU-897, Andor). Каждую ячейку возбуждали в течение 300 мс при 445 нм (мощность 340 мю Вт), а затем 300 мс при 514 нм (мощность 139 мю Вт). Экспозиция камеры была синхронизирована с лазерным возбуждением через блок ПЛИС и самописную программу Labview.В результате было получено четыре изображения за два периода экспозиции, фиксирующие излучение донора и акцептора на каждой длине волны возбуждения.
Анализ изображений
Все расчеты анализа изображений были закодированы в Python, рисунки и графики были сделаны в Python, за исключением блочных диаграмм, полученных с помощью PlotofPlots ^³³ . Необработанные флуоресцентные изображения предварительно обрабатывали путем вычитания темнового счета камеры и сглаживали путем деления с флуоресцентным изображением, полученным из однородного флуоресцентного образца (препарат Chroma).Важным шагом является регистрация между двумя каналами, полученными на каждой половине камеры, или между камерами. Для калибровки использовали светлопольные изображения бусинок, беспорядочно и плотно расположенных на покровном стекле. Вычисляя взаимные корреляции изображения в локальных областях изображения между двумя каналами, была получена карта смещения и, следовательно, была рассчитана матрица преобразования (с учетом смещения, поворота, сдвига и увеличения). Эта матрица преобразования систематически применялась к IDD для сопоставления IDA и IAA перед любым расчетом.Калибровка системы с помощью QuanTI-FRET была выполнена, как описано в основном тексте. Визуализация 3D-подгонки была сделана в Paraview, чтобы изучить все углы обзора. Все расчеты проводились попиксельно. Параметры взвешенного гауссовского фильтра выбираются как для стандартной гауссовой фильтрации. Здесь пространственная фильтрация в основном используется для фильтрации пикселей с аберрантной стехиометрией, , т.е. . S больше 0,6 или меньше 0,4, как определено по гистограммам SE. Пространственная гауссова огибающая предназначена для того, чтобы избежать добавления шума в этой операции, поскольку S подвергается стохастическому попиксельному шуму, как и E .
Данные, подтверждающие результаты этого исследования, можно получить у соответствующего автора по запросу.
Дополнительная информация
Благодарности
Авторы выражают благодарность С. Пинелю и Н. Скарамозино (платформа M2Bio) за советы и помощь в амплификации и очистке плазмид. Мы благодарим Б. Арнала и И. Ванга за плодотворные обсуждения и полезные предложения по коду анализа. П. Моро получил признание за его техническое участие в создании и обслуживании установки.Эта работа финансировалась Национальным агентством исследований (ANR, грант № ANR-13-PDOC-0022-01) и поддерживалась Университетом Гренобльских Альп (UGA, программа AGIR-POLE 2015, проект ACTSUB). C.M.B., A.C. и AD являются частью GDR 3070 CellTiss. Д.К.Л. выражает благодарность за финансовую поддержку Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) через совместный исследовательский центр (SFB1035, проект A11) и Ludwig-Maximilians-Universität через Центр нанонауки (CeNS) и сеть биовизуализации (BIN).CAR и CO поддерживаются FRM и ANR (CE17 CE13 0022 01).
Вклад авторов
А.Д. задумал эксперименты и теорию. Д.К.Л. внес свой вклад в концепцию. СО и К.А.-Р. участвовал в разработке биологических протоколов. AC, C.M.B., C.Q. проводил опыты. AD и AC проанализировали результаты. Ф.В. и К.М.Б. построили и подключили аппаратное обеспечение. А. Д. составил рукопись. Все авторы рассмотрели рукопись и одобрили окончательный вариант.
Конкурирующие интересы
Авторы заявляют об отсутствии конкурирующих интересов.
Сноски
Примечание издателя Springer Nature остается нейтральной в отношении юрисдикционных претензий в опубликованных картах и институциональной принадлежности.
Дополнительная информация
доступна для этого документа по телефону 10.1038/s41598-020-62924-w.
Ссылки
1. Ха, Т. и др. . Одномолекулярная флуоресцентная спектроскопия конформационной динамики фермента и механизма расщепления. Проц. Натл. акад. науч. США 6 (1999).[Бесплатная статья PMC] [PubMed]2. Вайс С. Флуоресцентная спектроскопия одиночных биомолекул. Наука. 1999; 283:1676–1683. doi: 10.1126/science.283.5408.1676. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]3. Эриксон М.Г., Алсейхан Б.А., Петерсон Б.З., Юэ Д.Т. Преассоциация кальмодулина с потенциалзависимыми Ca 2+ -каналами, выявленная методом FRET в одиночных живых клетках. Нейрон. 2001; 31: 973–985. doi: 10.1016/S0896-6273(01)00438-X. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]4. Чжан Дж, Ма Ю, Тейлор С.С., Цзянь Р.Ю. Генетически кодируемые репортеры активности протеинкиназы А обнаруживают влияние привязки субстрата.проц. Натл. акад. науч. 2001; 98:14997–15002. doi: 10.1073/pnas.211566798. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]5. Тинг А.И., Каин К.Х., Клемке Р.Л., Цзянь Р.Ю. Генетически кодируемые флуоресцентные репортеры активности протеинтирозинкиназы в живых клетках. проц. Натл. акад. науч. 2001; 98:15003–15008. doi: 10.1073/pnas.211564598. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]6. Перц О., Ходжсон Л., Клемке Р.Л., Хан К.М. Пространственно-временная динамика активности RhoA в мигрирующих клетках. Природа.2006; 440:1069–72. doi: 10.1038/nature04665. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]7. Мияваки А. и соавт. Флуоресцентные индикаторы Ca2+ на основе зеленых флуоресцентных белков и кальмодулина. Природа. 1997; 388: 882–887. дои: 10.1038/42264. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]8. Грашофф С. и соавт. Измерение механического натяжения винкулина выявляет регуляцию динамики фокальной адгезии. Природа. 2010; 466: 263–6. doi: 10.1038/nature09198. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]9. Мэн Ф., Сучина Т.М., Сакс Ф.Сенсор механического стресса на основе переноса энергии флуоресценции для конкретных белков in situ: сенсор механического стресса. FEBS J. 2008; 275: 3072–3087. doi: 10.1111/j.1742-4658.2008.06461.x. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]10. Рингер П. и др. Мультиплексирование датчиков молекулярного напряжения показывает пиконьютонный градиент силы через талин-1. Нац. Методы. 2017;14:1090–1096. doi: 10.1038/nmeth.4431. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 11. Падилья-Парра С., Трамье М. FRET-микроскопия в живой клетке: разные подходы, сильные и слабые стороны.Биоэссе. 2012; 34: 369–76. doi: 10.1002/bies.201100086. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 12. Chen Y, Mauldin JP, Day RN, Periasamy A. Характеристика спектральной микроскопии FRET. Дж. Микроск. 2007; 228:139–152. doi: 10.1111/j.1365-2818.2007.01838.x. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]14. Арсенович П.Т., Майер Ч.Р., Конвей Д.Э. SensorFRET: нестандартный подход к измерению спектрального просачивания на основе пикселей и эффективности FRET с использованием спектрального изображения. науч. Отчеты. 2017;7:15609.doi: 10.1038/s41598-017-15411-8. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]16. Зеуг А., Велер А., Неер Э., Понимаскин Э.Г. Количественные подходы FRET на основе интенсивности — сравнительный снимок. Биофиз. Дж. 2012; 103:1821–1827. doi: 10.1016/j.bpj.2012.09.031. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]17. Дахан М. и соавт. Ратиометрическое измерение и идентификация одиночных диффундирующих молекул. хим. физ. 1999; 247:85–106. doi: 10.1016/S0301-0104(99)00132-9. [Перекрестная ссылка] [Академия Google] 18.Капанидис А.Н. и соавт. Сортировка молекул с помощью флуоресценции: анализ структуры и взаимодействий путем возбуждения одиночных молекул переменным лазером. проц. Натл. акад. науч. США 2004; 101:8936–8941. doi: 10.1073/pnas.04016. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]19. Юван Д.К. и др. Микроспектрофотометр флуоресцентной визуализации (FIMS) Биотехнология. и др. 1997; 1:1–16. [Google Академия] 20. Гордон Г.В., Берри Г., Лян Х.Х., Левин Б., Герман Б. Количественные измерения переноса энергии флуоресцентного резонанса с использованием флуоресцентной микроскопии.Биофиз. Дж. 1998; 74: 2702–2713. doi: 10.1016/S0006-3495(98)77976-7. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]22. Хохрайтер Б., Кунце М., Мозер Б., Шмид Дж.А. Усовершенствованная нормализация FRET позволяет проводить количественный анализ белковых взаимодействий, включая стехиометрию и относительное сродство в живых клетках. науч. Отчеты. 2019;9:8233. doi: 10.1038/s41598-019-44650-0. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]23. Хоппе А., Кристенсен К., Суонсон Дж.А. Стехиометрия на основе переноса энергии флуоресцентного резонанса в живых клетках.Биофиз. Дж. 2002; 83: 3652–64. doi: 10.1016/S0006-3495(02)75365-4. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]24. Талер С., Кушик С.В., Бланк П.С., Фогель С.С. Количественное многофотонное спектральное изображение и его использование для измерения резонансной передачи энергии. Биофиз. Дж. 2005; 89: 2736–2749. doi: 10.1529/biophysj.105.061853. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]25. Ли Н.К. и др. Точные измерения FRET в отдельных диффундирующих биомолекулах с использованием переменного лазерного возбуждения.Биофиз. Дж. 2005; 88: 2939–53. doi: 10.1529/biophysj.104.054114. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]26. Кошик С.В., Чен Х., Талер С., III HLP, Фогель С.С. Эталонные стандарты Cerulean, Venus и VenusY67c FRET. Биофиз. Дж. 2006; 91: L99–L101. doi: 10.1529/biophysj.106.096206. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]27. Хелленкамп Б. и соавт. Прецизионность и достоверность измерений FRET для отдельных молекул — эталонное исследование в нескольких лабораториях. Нац. Методы. 2018;15:669–676. дои: 10.1038/s41592-018-0085-0. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]28. Ха Т и др. Исследование взаимодействия между двумя отдельными молекулами: резонансный перенос энергии флуоресценции между одним донором и одним акцептором. проц. Натл. акад. науч. 1996; 93: 6264–6268. doi: 10.1073/pnas.93.13.6264. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]29. Чен Х., Пуль Х.Л., Кошик С.В., Фогель С.С., Икеда С.Р. Измерение эффективности FRET и отношения концентрации донора к концентрации акцептора в живых клетках.Биофиз. Дж. 2006; 91:L39–L41. doi: 10.1529/biophysj.106.088773. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]30. Фроммер В.Б., Дэвидсон М.В., Кэмпбелл Р.Э. Генетически кодируемые биосенсоры на основе сконструированных флуоресцентных белков. хим. соц. 2009; 38:2833. doi: 10.1039/b 9a. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 31. Sizaire, F. & Tramier, M. Биосенсоры на основе FRET: генетически закодированные инструменты для отслеживания активности киназы в живых клетках. In Белок фосфорилирован , 179 (IntechOpen, 2017).
32. Кушик С.В., Фогель С.С. Миграция энергии изменяет время жизни флуоресценции Cerulean: последствия для визуализации времени жизни флуоресценции Измерения переноса энергии в резонансе Форстера. Дж. Биомед. Опц. 2008;13:031204. doi: 10.1117/1.2 7. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]33. Postma M, Goedhart J. PlotsOfData — веб-приложение для визуализации данных вместе с их сводками. ПЛОС биол. 2019;17:e3000202. doi: 10.1371/journal.pbio.3000202. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] баксов на лады гранты.Особенности и технические характеристики авто лада грант. Основные ТТХ Гранты
Бензобак (топливный бак) – емкость в автомобиле, в которой хранится топливо. Обычно бензобак устанавливается сзади в нижней части кузова. Такая компоновка хорошо сказывается на «развесовке» автомобиля. На Lada Granta бензобак выполнен из пластика.
Объем топливного бака Лада Гранта
Сколько эта красавица может залить в нашу Гранту?
Объем топливного бака вне зависимости от комплектации на автомобиле Лада Гранта составляет 50 литров.
Добавьте к этому не более 2 литров, которые будут в топливной магистрали и топливном фильтре, и получите максимальное количество, которое можно залить в этот автомобиль. Это именно то, что рекомендует производитель.
Помните, что перед поездкой нужно только «заправиться до отказа». В противном случае при длительной стоянке под воздействием внешних факторов пары бензина будут испаряться через специальные отверстия в бензобаке. Особенно это будет заметно в жаркую погоду.
При «заправке бака до полного» первый выстрел колонки произойдет уже при 45 л.При этом уровень топлива будет отображаться на панели приборов «без деления до полного». Именно из-за этого возникают споры о том, что бензобак на самом деле меньше объема, заявленного АвтоВАЗом в технической документации. По моему опыту, после первой стрельбы в режиме «медленная заправка» удается залить еще около 6 литров.
Путем несложных математических операций сложения объем всего бензина в системе получается не менее 51 литра , что соответствует информации, заявленной производителем автомобиля.
Внешний вид топливного бака
Сливное отверстие на бензобаке Лада Гранта конструкцией не предусмотрено, поэтому.
Когда загорается сигнальная лампа низкого уровня топлива?
Сигнальная лампа низкого уровня бензина при количестве топлива в бензобаке не более 7 литров.
Заправочные объемы автомобиля Лада Гранта
Для более подробного представления информации мы создали таблицу со всеми заправочными объемами автомобиля Lada Granta.Он представлен ниже.
Название Значение
Система смазки двигателя 3,5
Система охлаждения двигателя и обогрева салона* 7,84
Трансмиссия 3,1
Гидравлическая тормозная система 0,45
Бачок стеклоомывателя 5,0
Топливный бак (емкость) 50
Возможные комплектации ВАЗ Гранта, в которых вы без труда подберете для себя оптимальную.Бюджетная стоимость, высокий клиренс Лада Гранта, позволяющий легко преодолевать бездорожье, доступность в обслуживании, вместительный салон, огромный багажник – вот основные достоинства автомобиля.
Она разделяла платформу для малобюджетного переднеприводного автомобиля ВАЗ Гранта. На сегодняшний день семейство Грантов представлено двумя моделями.
Четырехдверный седан.
Пятидверный лифтбек в трех комплектациях:
«стандарт»;
«норма»;
«люкс».
Технические характеристики Гранты в зависимости от конфигурации будут различаться.
Обзор Лада Гранта 219010
Длина кузова седана 4260 мм, ширина 1700 мм, высота 1500 мм. Колесная база автомобиля составляет 2475 мм. Габариты лифтбека отличаются от седана только длиной кузова, которая немного уменьшилась и составляет 4246 мм. Объем топливного бака (50 л) одинаков для всех модификаций. Объем багажника – 480 литров у седана, 440 литров у лифтбека.
Передние вентилируемые, задние — барабанные. Передняя подвеска независимая, типа McPherson, задняя — рессорная полунезависимая. Снаряженная масса 1115 кг, количество пассажирских мест 5. Силовых агрегатов три, мощностью от 83 до 106 л.с. Трансмиссия – механическая или автоматическая.
Всего возможно 5 комбинаций двигателя и трансмиссии, какую из них выбрать, каждый решает в соответствии со своими требованиями. На минимальную «стандартную» комплектацию устанавливается 1,6-литровый бензиновый двигатель мощностью 83 л.с и простой. Максимальная скорость не превышает 164,5 км/ч, разгон до первой сотни занимает 12,5 секунды.
Максимальный крутящий момент 132 Нм при 3500 об/мин. Минимальный дорожный просвет – 160 мм. Если машина пустая, то дорожный просвет достигает 175 мм. Топливо — бензин АИ-95, расход 9,3 л в городском цикле и 6,2 л — по трассе. В смешанном цикле расход составляет 7,4 литра. Содержание вредных веществ в выхлопных газах соответствует стандарту Евро-4.
Руль выкручивается до упора четырьмя оборотами. Рулевой механизм представляет собой реечный механизм. В пакет оборудования входят дневные ходовые огни, полноразмерная запаска, крепления ISOFIX, складывающиеся задние сиденья, подушка безопасности водителя, аудиоподготовка, инерционные ремни безопасности. Лишь 16% из 20 тысяч проданных автомобилей Lada Granta соответствовали модификации «стандарт». Остальные 84% относятся к «норма» или «люкс».
Что касается Гранты лифтбек, то ее «люкс» планируется оснастить более мощным двигателем на 106 л.с., который будет связан только с механикой. На сегодняшний день лифтбек Granta является самой мощной машиной из этого семейства. Самый слабый мотор для лифтбека – 87 л.с. С участием. Как и седан, пятидверная Granta будет оснащаться как механической, так и автоматической коробками передач.
Вместе с небольшим уменьшением длины кузова уменьшилось и количество кубометров. л багажного отделения и дорожного просвета. Объем багажника лифтбека составляет 440 литров. Но при необходимости его вместимость можно легко увеличить, сняв полку или сложив задний ряд сидений.Минимальный дорожный просвет для автомобилей с АКПП составляет 140 мм, дорожный просвет Гранты лифтбек с МКПП – 160 мм.
Варианты «норма» и «стандарт»
Начиная с «нормы» на Гранту устанавливается 4-цилиндровый рядный двигатель объемом 1,6 л мощностью 87 л. с., который комплектуется новой пятиступенчатой механической коробкой с тросовым приводом, или 1,6-литровым двигателем мощностью 98 л. с., оснащенный автоматической коробкой передач. Для всех версий с АКПП на Гранту устанавливается японский четырехдиапазонный автомат Jatco, разработанный при участии концерна Nissan.
В отличие от своего «бедняги», Грант «норма» разгоняется до 100 км/ч за 11,5 секунды. увеличилась до 167 км/ч. При этом расход бензина уменьшился. Езда по городу потребует 8,5 литров, по трассе – 5,8, смешанный цикл потребляет 7,2 литра топлива. Максимальный крутящий момент — 143 Нм, 3500 об/мин. Количество оборотов руля сократилось до 3. Такие показатели, как дорожный просвет, норма безопасности выхлопа, рулевой механизм, остались такими же, как и в «стандартной» комплектации.
Дополнительное оборудование Гранты «нормы» стало значительно больше. Помимо того, что имеется в «стандарте», в базовое оснащение средней комплектации входят трехточечные инерционные ремни безопасности с индикатором непристегнутых ремней, иммобилайзер, гидравлический корректор фар, бортовой компьютер, первичный прибор, сервопривод рулевого управления. (электро), регулируемая в двух плоскостях рулевая колонка, воздушный фильтр, центральный замок, передние электростеклоподъемники.
По желанию и в зависимости от платежеспособности покупателя автомобиль можно доукомплектовать подушкой безопасности переднего пассажира, системами ABS+BAS, атермальными стеклоподъемниками, кондиционером, заменить инерционные ремни на ремни с преднатяжителем.Lada Granta стала первым российским автомобилем, серийно оснащаемым автоматической коробкой передач. Но если «норму» предпочитают покупать в основном на механике, то АКПП — лидер продаж «люкса».
Lada Granta в «люксовом» исполнении имеет под капотом 1,6-литровый 90-сильный мотор или заимствованный у Priora 16-клапанный агрегат мощностью 98 л. С участием. Это второй мотор, который может комплектоваться автоматической коробкой передач. Основные характеристики (габариты, клиренс, объем топливного бака, объем багажника, «длина» руля, тип подвески, тормозная система) совпадают с «нормой».Максимальная скорость Lada Grant составляет 168 км/ч. Расход топлива составляет 8,8/5,9/7,4 литра в городском, загородном и смешанном режимах соответственно.
Чтобы разогнать автомобиль с автоматической коробкой передач до сотни, потребуется не менее 13 секунд. Базовое оснащение дополнено мультимедийным комплексом с четырьмя динамиками, противотуманными фарами, центральным замком с дистанционным управлением, датчиком парковки, теплопоглощающей тонировкой, электростеклоподъемниками «по кругу», подогревом передних сидений, электрорегулировкой зеркал, светом и датчик дождя, сигнализация.Дополнительное оборудование: парктроник, климат-контроль, продвинутая шумоизоляция. На этом технический обзор Гранты завершен. Удачи на дорогах!
Лада Гранта – достаточно популярный автомобиль среди российских потребителей. Его цена приемлема, а эксплуатация значительно дешевле иномарок. Однако не все владельцы могут точно указать основные параметры этой машины.
В этой статье мы расскажем какой объем топливного бака у Лада Гранта.
Немного о Гранте
Как известно, производитель создал Lada Granta на базе более ранней модели — Kalina.Сейчас автомобиль представлен на рынке в четырех версиях:
. лифтбэк;
седан;
хэтчбек;
спорт.
Также есть три типа снаряжения. И люксовая версия, и «Стандарт» и «Норма» оснащаются 1,6-литровыми двигателями различной мощности. Сначала автомобиль снабжали силовыми установками на 8 клапанов, но затем появились 16 клапанов.
Во всех модификациях используется 5-позиционная коробка передач. Он может быть автоматическим или ручным.Передние колеса ведущие.
По стандарту расход топлива на сто километров составляет:
в городских условиях — 8,7-9,3;
по автомобильным дорогам — 5,8-6,2;
смешанный цикл — 7,2-7,3 литра.
Гранта способна развивать максимальную скорость более 168 километров в час. Чтобы разогнаться до сотни, ей нужно максимум 12 секунд.
Бензобак устанавливается на Гранту сзади, под кузовом, с правой стороны.Такая компоновка позволяет идеально сбалансировать автомобиль, что, в свою очередь, способствует более легкому управлению. Топливный бак изготовлен из пластика.
Помимо прочего, конструкторы в ходе разработки рассматриваемого автомобиля также внесли определенные изменения в устройство подвески. В частности, спереди был установлен более широкий кастер, что положительно сказалось на курсовой устойчивости. транспортное средство.
При этом обновилась и рулевая рейка, она теперь несколько короче той, что ставилась на Калину, благодаря чему на полный оборот требуется всего три оборота руля.Это значительно облегчило управление машиной.
Передняя подвеска также имеет новый модуль стоек, конструкция которого претерпела ряд изменений и в результате получила совершенно новые характеристики.
Стабилизаторы, придающие боковую устойчивость, используются более прочные, а также опоры кузова.
Не обошел вниманием при модернизации и заднюю подвеску. Так Гранта стала первой в истории Волжского автозавода машиной с отрицательными значениями развала.И эта мера позволяет значительно улучшить управляемость автомобиля.
Какой объем бензобака
Также следует помнить, что полный бак целесообразно заправлять только в ситуациях, когда предстоит дальняя дорога. В противном случае деньги, потраченные на поставку топлива, будут буквально выброшены на ветер. Все дело в том, что под воздействием внешних факторов топливо испаряется и уходит в атмосферу через специальные отверстия, проделанные в баке. Наиболее быстро этот процесс происходит в жаркое время года.
Как правило, «выстрел» заправочного пистолета в первый раз происходит после заливки в бак 45 литров топлива. При этом индикация на панели приборов будет показывать, что бак не заполнен на одно деление шкалы. Это обстоятельство привело к тому, что многие автолюбители полностью убеждены в том, что бензобак Гранты на самом деле меньше, чем заявляет производитель в сопроводительной документации. Но знающие специалисты отмечают, что после «выстрела» легко залить до 6 литров топлива.
Таким образом, если все сложить, то получается, что общая емкость бензобака в Гранте составляет не менее 51 литра. И это полностью соответствует заверениям конструкторов.
При создании Гранты завод не предусмотрел возможность слива бензина из бака — у него нет для этого специального отверстия. Поэтому при необходимости топливо удаляется через рампу или топливный фильтр.
Сигнал об исчерпании запаса бензина подается сразу после уменьшения его доступного объема до 7 литров.
Прочие объемы наполнения

Данная информация будет полезна всем владельцам автомобиля Гранта, так как позволит эффективнее планировать расходы на эксплуатацию автомобиля. Итак:
Система смазки силовой установки имеет объем 3,5 литра;
на охлаждение и обогрев для работы — 7,84 л антифриза;
КПП — 3.1;
гидроприводов тормозных — 0,45;
Емкость омывателя лобового стекла – 5;
Емкость топливного бака — 50.
Лада Гранта седан (ВАЗ 2190) — новый автомобиль отечественного автопрома, созданный на базе Калины образца 2004 года. Серийное производство народного автомобиля стартовало осенью 2011 года, а первая машина была продана 22 декабря. Выдача первых экземпляров осуществляется только тем, кто заранее оставил заявку на промо-сайте автомобиля. Седан Лада Гранта призван заменить в линейке АвтоВАЗа сразу несколько моделей – классику, семейство Самара и седан Лада Калина.По своим техническим характеристикам седан Lada Granta превосходит перечисленные автомобили. Это обосновано новыми материалами, улучшенным качеством сборки, а также новыми технологиями, впервые примененными на отечественных автомобилях.
Таблица с техническими характеристиками Lada Granta
1,6 л. 8-кл.
(Евро 4) 82 л.с. 1,6 л. 8-кл.
(Евро 4) 87 л.с.
Длина, мм 4260 4260
Ширина, мм 1700 1700
Высота, мм 1500 1500
Основание, мм 2476 2476
Колея передних колес, мм 1430 1430
Колея задних колес, мм 1414 1414
Объем багажного отделения, куб.дм. 480 480
Масса в снаряженном состоянии, кг 1160 1160
Полная масса автомобиля, кг 1560 1560
Допустимая полная масса буксируемого прицепа с тормозами, кг 900 900
Допустимая полная масса буксируемого прицепа без тормозов, кг 450 450
Колесная формула / ведущие колеса 4×2 / передний 4×2 / передний
Компоновка автомобиля передний привод, расположение двигателя спереди, поперечное
Тип кузова/количество дверей седан/4 седан/4
тип двигателя бензин, четырехтактный бензин, четырехтактный
Система подачи распределенный впрыск с электронным управлением
Количество и расположение цилиндров 4, рядный 4, рядный
Объем двигателя, куб.см 1596 1596
Максимальная мощность, кВт/л.с./об/мин 60/82/5100 64/87/5100
Максимальный крутящий момент, Нм при об/мин 132/3800 140/3800
Топливо Бензин неэтилированный АИ-95 (мин)
Расход топлива по ездовому циклу, л/100 км 7,3 7,2
Максимальная скорость, км/ч 164 167
Трансмиссия с ручным управлением с ручным управлением
Количество передач 5 вперед, 1 назад 5 вперед, 1 назад
Передаточное число главной пары 3,7 3,7
Рулевое управление Реечный рулевой механизм Реечный рулевой механизм с электромеханическим усилителем руля
Шины 175/70 R13 (82, Т, Н) 175/65 R14 (82, Н)
Емкость топливного бака, л 50 50

Сравнение габаритных размеров Lada Granta и Lada Kalina (увеличить)
Информация о цене
Пока в продаже только автомобили в двух комплектациях: стандарт и норма, и только в кузове седан.Хэтчбеки поступят в продажу в начале 2013 года. Стартовая цена автомобиля в базовой комплектации – 229 тысяч рублей. Полный комплект нормы обойдется в 256 тысяч, а за диски придется доплатить еще 8000 рублей. Стоимость «люксовой» версии точно пока не известна, но, по словам представителей АвтоВАЗа, она не превысит 270-280 тысяч рублей. С середины 2012 года в продажу могут поступить автомобили Lada Granta с японской автоматической коробкой передач. Сколько будет стоить такая Гранта, неизвестно, но представители АвтоВАЗа говорят, что стоимость автомобиля с АКПП составит около 300 тысяч рублей.
Комплектация Лада Гранта
Безопасность Стандартный Норма Люкс
Втягивающиеся ремни безопасности + + —
Инерционные ремни с преднатягом — — +
Подушка безопасности водителя + + +
Подушка безопасности переднего пассажира — — +
Подголовники задних сидений — — +
АБС+БАС — — +
Внешний вид
Бамперы в цвет кузова — + +
Дневной ходовой огонь в фаре + + +
Колесные диски штампованные, 13 + — —
Колесные диски штампованные, 14 — + —
Литые колеса, 14 шт. — 8 000 руб. +
Колесные колпаки — + —
молдинг решетки — + +
молдинги дверей — — +
Наружные зеркала заднего вида, окрашенные в цвет кузова — — +
Дверные коробки черные — — +
Интерьер
Обивка дверей с декоративными вставками — + +
отдельное заднее сиденье — — +
Отделка порога пола — — +
Уплотнители порогов пола — — +
контейнер для очков — — +
Комфорт
Рулевая колонка с регулировкой по высоте — + +
электроусилитель руля — + +
Передние электрические стеклоподъемники — + +
Задние электрические стеклоподъемники — — +
Атермальные очки — — +
Воздушный фильтр салона — + +
Кондиционер — — +
Наружные зеркала с подогревом и электроприводом — — +
Подогрев передних сидений — — +
Замок багажника с электроприводом — + +
Электроника
центральный замок — + +
Бортовой компьютер — + +
Охранная сигнализация — — +
Дистанционное управление замками и крышкой багажника — + +
Аудиосистема — — +
Стоимость, руб. 229 000 256 000 нет данных
Опытный водитель знает, какой бензин заливать, следя за реакцией своего автомобиля на разные виды топлива. Правильно подобранный бензин играет важную роль в поддержании работоспособности и механизмов автомобиля Лада Гранта. из сотен подобных предложений — настоящее искусство, которое водитель освоит только со временем.
Критерии выбора бензина
Выбирая подходящий вариант топлива, автовладелец должен взять за основу ряд правил:
В случае, если буду эксплуатироваться как в теплое, так и в холодное время года, рекомендуется обращать внимание на класс испаряемости приобретаемого бензина.Требования к этому веществу различаются в зависимости от области эксплуатации, однако в большинстве своем поставщики стремятся предложить универсальный продукт, который и следует выбирать для автомобиля Лада Гранта.
Бензин не должен содержать опасных примесей, таких как свинец, железо или марганец. Такой продукт по праву считается некачественным и может привести к выходу из строя топливной системы автомобиля.
Большинство производителей, стремясь защитить бак от коррозии и разрушения, добавляют в бензин так называемые присадки.Однако не стоит самостоятельно добавлять такое вещество в готовый продукт. Лучше будет приобрести продукт премиум-класса, который обеспечит максимальную защиту.
В реальной жизни выбор варьируется в пределах двух марок заливаемого в бак бензина: 92-й и 95-й. Отечественные водители с одинаковым успехом используют оба варианта, но определить лучший из них довольно сложно.
Производитель Lada Granta рекомендует использовать именно 95-й бензин из-за его Высокого Качества.Такой бензин поставляется очищенным, без примесей. Кроме того, он обладает очищающими свойствами, к которым довольно двойственное отношение. С одной стороны, такое топливо не пропускает пыль и грязь в бензобак, с другой стороны, при постоянном использовании оказывает разрушительное воздействие на сам металл.
Гораздо более щадящим по праву считается 92-й бензин, не содержащий ничего, кроме предусмотренного технологией изготовления сырья. Кроме того, заправка этого изделия будет на порядок дешевле его 95-го аналога.
При выборе подходящего бензина автовладелец должен обращать внимание на рекомендации, которые дает ему производитель, и адаптировать их к своему региону и потребностям автомобиля.
Как заправить бензин самостоятельно?
Решив, какой бензин заливать, автомобилист может отправиться за горючим на АЗС, где на помощь придет профессиональный заправщик. Однако в некоторых случаях ему придется заливать бензин самостоятельно.
Чтобы не остаться без топлива в самый непредсказуемый момент, важно постоянно проверять уровень заполнения топливного бака.
Вам может понадобиться дозаправиться в дороге, поэтому всегда нужно иметь при себе канистру и воронку.
Заправиться, когда остается менее половины бака. Многие неопытные водители предпочитают ехать до тех пор, пока на приборной панели не загорится лампочка, указывающая на то, что контейнер почти пуст. Эта практика довольно рискованна и может значительно навредить двигательной системе. Бензин охлаждает топливный насос, который при перегреве просто лопнет. Если бак заправлен по правилам, можно смело ехать на заправку.
При подъезде к АЗС важно правильно припарковать автомобиль перед заправочной машиной с той стороны, на которой находится крышка бензобака. Машину желательно ставить таким образом, чтобы бензобак и заправка находились на одном уровне. После этого открутите крышку бензобака и вставьте в нее заправочный пистолет соответствующей марки.
После этого необходимо произвести оплату и указать, сколько литров топлива требуется. Вернувшись к машине, нужно нажать рычаг на пистолете, тогда топливо будет подаваться автоматически.
При этом автолюбитель также должен знать, как слить бензин из бака, если ему попался некачественный товар. Это можно сделать тремя основными способами.
Ориентация на белок-белковые взаимодействия для терапевтических открытий с помощью высокопроизводительного скрининга живых клеток на основе FRET
Аркин, М. Р. и Уэллс, Дж. А. Низкомолекулярные ингибиторы белок-белковых взаимодействий: продвижение к мечте. Nat Rev Drug Discov 3 , 301–317, https://doi.org/10.1038/nrd1343 (2004 г.).
Артикул
пабмед
КАС
Google ученый
Уэллс, Дж. А. и Макклендон, К. Л. Достижение высоких результатов в открытии лекарств на межбелковых границах. Nature 450 , 1001–1009, https://doi.org/10.1038/nature06526 (2007).
ОБЪЯВЛЕНИЕ
Статья
пабмед
КАС
Google ученый
Эйснер, Д.А., Колдуэлл, Дж. Л., Кистамас, К. и Траффорд, А. В. Кальций и сопряжение возбуждения и сокращения в сердце. Исследование тиражей 121 , 181–195, https://doi.org/10.1161/CIRCRESAHA.117.310230 (2017).
Артикул
пабмед
ПабМед Центральный
КАС
Google ученый
MacLennan, DH & Kranias, EG Фосфоламбан: важнейший регулятор сердечной сократимости. Nat Rev Mol Cell Biol 4 , 566–577, https://doi.org/10.1038/nrm1151 (2003 г.).
Артикул
пабмед
КАС
Google ученый
Берс Д. М. Связь возбуждения-сокращения сердца. Nature 415 , 198–205, https://doi.org/10.1038/415198a (2002).
ОБЪЯВЛЕНИЕ
Статья
пабмед
КАС
Google ученый
Липская Л., Чемали Э. Р., Хадри Л., Ломпре А. М. и Хаджар Р.J. Са(2+) АТФаза саркоплазматического ретикулума как терапевтическая мишень при сердечной недостаточности. Expert Opin Biol Ther 10 , 29–41, https://doi.org/10.1517/147125901462 (2010).
Артикул
пабмед
ПабМед Центральный
КАС
Google ученый
Ломпре, А. М. и др. . Са2+-циклирование и новые терапевтические подходы к сердечной недостаточности. Тираж 121 , 822–830, https://doi.org/10.1161/CIRCULATIONAHA.109.8 (2010 г.).
Артикул
пабмед
ПабМед Центральный
Google ученый
Schwinger, R.H. и др. . Уровни белка SERCA II и фосфоламбана не изменились, но снизилось поглощение Ca2+ и активность Ca(2+)-АТФазы сердечного саркоплазматического ретикулума у пациентов с дилатационной кардиомиопатией по сравнению с пациентами с неповреждаемым сердцем. Тираж 92 , 3220–3228 (1995).
Артикул
пабмед
КАС
Google ученый
Гватми, Дж. К. и др. . Аномальный внутриклеточный обмен кальция в миокарде у пациентов с сердечной недостаточностью на конечной стадии. Исследование обращения 61 , 70–76 (1987).
Артикул
пабмед
КАС
Google ученый
Hasenfuss, G. Изменения белков, регулирующих кальций, при сердечной недостаточности. Cardiovasc Res 37 , 279–289 (1998).
Артикул
пабмед
КАС
Google ученый
Hasenfuss, G. Животные модели сердечно-сосудистых заболеваний, сердечной недостаточности и гипертрофии человека. Cardiovasc Res 39 , 60–76 (1998).
Артикул
пабмед
КАС
Google ученый
Хосидзима М. и др. .Хроническое подавление прогрессирования сердечной недостаточности псевдофосфорилированным мутантом фосфоламбана посредством доставки in vivo сердечного гена rAAV. Nat Med 8 , 864–871, https://doi.org/10.1038/nm739 (2002).
Артикул
пабмед
КАС
Google ученый
Миямото М.И. и др. . Аденовирусный перенос гена SERCA2a улучшает функцию левого желудочка у крыс с перевязкой аорты при переходе к сердечной недостаточности. Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки 97 , 793–798 (2000).
ОБЪЯВЛЕНИЕ
Статья
пабмед
ПабМед Центральный
КАС
Google ученый
Шмидт, У. и др. . Восстановление диастолической функции в стареющих сердцах крыс путем аденовирусного переноса гена Са(2+)-АТФазы саркоплазматического ретикулума. Тираж 101 , 790–796 (2000).
Артикул
пабмед
КАС
Google ученый
Бирн, М. Дж. и др. . Рециркуляционная сердечная доставка AAV2/1SERCA2a улучшает функцию миокарда в экспериментальной модели сердечной недостаточности у крупных животных. Gene Ther 15 , 1550–1557, https://doi.org/10.1038/gt.2008.120 (2008).
Артикул
пабмед
КАС
Google ученый
Джессап, М. и др. . Активация кальция путем чрескожного введения генной терапии при сердечно-сосудистых заболеваниях (CUPID): испытание фазы 2 интракоронарной генной терапии Са2+-АТФазы саркоплазматического ретикулума у пациентов с прогрессирующей сердечной недостаточностью. Тираж 124 , 304–313, https://doi.org/10.1161/CIRCULATIONAHA.111.022889 (2011).
Артикул
пабмед
ПабМед Центральный
КАС
Google ученый
Зебо, К. и др. . Долгосрочные эффекты переноса гена AAV1/SERCA2a у пациентов с тяжелой сердечной недостаточностью: анализ повторных сердечно-сосудистых событий и смертности. Исследование тиражей 114 , 101–108, https://doi.org/10.1161/CIRCRESAHA.113.302421 (2014).
Артикул
пабмед
КАС
Google ученый
Гринберг Б. и др. . Распространенность нейтрализующих антител к AAV1 и последствия для клинического испытания переноса генов при прогрессирующей сердечной недостаточности. Gene Ther 23 , 313–319, https://doi.org/10.1038/gt.2015.109 (2016).
Артикул
пабмед
КАС
Google ученый
Johnson, R.G. Jr. Фармакология сердечного саркоплазматического ретикулума кальций-АТФаза-фосфоламбан взаимодействия. Анналы Нью-Йоркской академии наук 853 , 380–392 (1998).
ОБЪЯВЛЕНИЕ
Статья
пабмед
КАС
Google ученый
Роговица, р.Л. и др. . Высокопроизводительный анализ FRET дает аллостерические активаторы SERCA. J Biomol Screen, 1087057112456878 https://doi.org/10.1177/1087057112456878 (2012).
Грубер, С. Дж. и др. . Открытие модуляторов ферментов с помощью высокопроизводительного FRET с временным разрешением в живых клетках. J Biomol Screen 19 , 215–222, https://doi.org/10.1177/1087057113510740 (2014).
Артикул
пабмед
ПабМед Центральный
КАС
Google ученый
Петерсен, К.J. и др. . Флуоресцентный считыватель планшетов на весь срок службы: разрешение и точность в сочетании с высокой пропускной способностью. Rev Sci Instrum 85 , 113101, https://doi.org/10.1063/1.4
7 (2014).
ОБЪЯВЛЕНИЕ
Статья
пабмед
ПабМед Центральный
КАС
Google ученый
Bidwell, P., Blackwell, D.J., Hou, Z., Zima, A.V. & Robia, S.L. Фосфоламбан связывается с различным сродством к конформерам кальциевого насоса. J Biol Chem 286 , 35044–35050, https://doi.org/10.1074/jbc.M111.266759 (2011).
Артикул
пабмед
ПабМед Центральный
КАС
Google ученый
Карим, С. Б., Кирби, Т. Л., Чжан, З., Несмелов, Ю. и Томас, Д. Д. Структурная динамика фосфоламбана в липидных бислоях, исследованная с помощью спиновой метки, жестко связанной с пептидным остовом. Proc Natl Acad Sci USA 101 , 14437–14442 (2004).
ОБЪЯВЛЕНИЕ
Статья
пабмед
КАС
Google ученый
Zamoon, J., Mascioni, A., Thomas, D.D. & Veglia, G. Структура раствора ЯМР и топологическая ориентация мономерного фосфоламбана в мицеллах додецилфосфохолина. Biophys J 85 , 2589–2598, https://doi.org/10.1016/S0006-3495(03)74681-5 (2003).
Артикул
пабмед
ПабМед Центральный
КАС
Google ученый
Локвуд, Н.А. и др. . Структура и функция интегральных мембранных белковых доменов, разрешенных пептидами-амфифилами: приложение к фосфоламбану. Биополимеры 69 , 283–292, https://doi.org/10.1002/bip.10365 (2003).
Артикул
пабмед
КАС
Google ученый
Zamoon, J., Nitu, F., Karim, C., Thomas, D.D. & Veglia, G. Картирование поверхности взаимодействия мембранного белка: выявление конформационного переключения фосфоламбана в регуляции кальциевого насоса. Proc Natl Acad Sci USA 102 , 4747–4752 (2005).
ОБЪЯВЛЕНИЕ
Статья
пабмед
КАС
Google ученый
Карим, С.Б., Чжан, З., Ховард, Э.С., Торгерсен, К.Д. и Томас, Д.Д. Зависимый от фосфорилирования конформационный переключатель в спин-меченом фосфоламбане, связанном с SERCA. J Mol Biol 358 , 1032–1040 (2006).
Артикул
пабмед
КАС
Google ученый
Ли, Дж., Джеймс, З.М., Донг, X., Карим, С.Б. и Томас, Д.Д. Структурная и функциональная динамика интегрального мембранного белкового комплекса, модулируемая зарядом липидной головной группы. J Mol Biol 418, 379–389, S0022-2836(12)00152-0 https://doi.org/10.1016/j.jmb.2012.02.011 (2012).
Блэквелл, Д. Дж., Зак, Т. Дж. и Робиа, С. Л. Димеризация сердечной кальциевой АТФазы, измеренная с помощью перекрестного связывания и переноса энергии флуоресценции. Biophys J 111 , 1192–1202, https://doi.org/10.1016/j.bpj.2016.08.005 (2016 г.).
Артикул
пабмед
ПабМед Центральный
КАС
Google ученый
Мюллер, Б., Карим, С.Б., Неграшов, И.В., Кучай, Х. и Томас, Д.Д. Прямое обнаружение взаимодействия фосфоламбана и Са-АТФазы саркоплазматического ретикулума в мембранах с использованием флуоресцентного резонансного переноса энергии. Биохимия 43 , 8754–8765 (2004).
Артикул
пабмед
КАС
Google ученый
Ли, Дж., Xiong, Y., Bigelow, D.J. & Squier, TC. Фосфоламбан связывается в компактной и упорядоченной конформации с Са-АТФазой. Биохимия 43 , 455–463, https://doi.org/10.1021/bi035424v (2004).
Артикул
пабмед
КАС
Google ученый
Августин Дж. М., Кузина В., Андерсен С. Б. и Бак С. Молекулярная активность, биосинтез и эволюция тритерпеноидных сапонинов. Фитохимия 72 , 435–457, https://doi.org/10.1016/j.phytochem.2011.01.015 (2011).
Артикул
пабмед
КАС
Google ученый
Дандапани С., Россе Г., Саутхолл Н., Сальвино Дж. М. и Томас С. Дж. Выбор, приобретение и использование библиотек малых молекул для высокопроизводительного скрининга. Curr Protoc Chem Biol 4 , 177–191, https://doi.org/10.1002/9780470559277.ch210252 (2012).
ПабМед
ПабМед Центральный
Статья
Google ученый
Чжан, Дж.Х., Чанг, Т. Д. и Ольденбург, К. Р. Простой статистический параметр для использования при оценке и валидации высокопроизводительных скрининговых анализов. J Biomol Screen 4 , 67–73, https://doi.org/10.1177/108705719
0206 (1999).
Артикул
пабмед
КАС
Google ученый
Шааф, Т. М. и др. . Высокопроизводительный спектральный и пожизненный скрининг FRET в живых клетках для выявления низкомолекулярных эффекторов SERCA. SLAS Discov 22 , 262–273, https://doi.org/10.1177/1087057116680151 (2017).
ПабМед
КАС
Статья
Google ученый
Шааф, Т. М., Петерсон, К. С., Грант, Б. Д., Томас, Д. Д. и Гиллиспи, Г. Д. Спектральный несмешивающий планшет-ридер: высокопроизводительный и высокоточный анализ FRET в живых клетках. SLAS Discov 22 , 250–261, https://doi.org/10.1177/1087057116679637 (2017).
ПабМед
КАС
Статья
Google ученый
Хьюз, Дж. П., Рис, С., Калинджян, С. Б. и Филпотт, К. Л. Принципы раннего открытия лекарств. Br J Pharmacol 162 , 1239–1249, https://doi.org/10.1111/j.1476-5381.2010.01127.x (2011).
Артикул
пабмед
ПабМед Центральный
КАС
Google ученый
Бильмен Дж.Г., Вуттон, Л.Л. и Микеланджели, Ф. Ингибирование Са2+-АТФазы саркоплазматического/эндоплазматического ретикулума макроциклическими лактонами и циклоспорином А. Biochem J 366 , 255–263, https://doi.org/10.1042 /BJ20020431 (2002).
Артикул
пабмед
ПабМед Центральный
КАС
Google ученый
Морган, Дж. П., Эрни, Р. Э., Аллен, П. Д., Гроссман, В. и Гватми, Дж. К. Нарушение внутриклеточного обмена кальция, основная причина систолической и диастолической дисфункции миокарда желудочков у пациентов с сердечной недостаточностью. Тираж 81 , III21–32 (1990).
ПабМед
КАС
Google ученый
Шмидт, У. и др. . Вклад аномальной активности АТФазы саркоплазматического ретикулума в систолическую и диастолическую дисфункцию при сердечной недостаточности человека. J Mol Cell Cardiol 30 , 1929–1937, https://doi.org/10.1006/jmcc.1998.0748 (1998).
Артикул
пабмед
КАС
Google ученый
Хазенфус, Г. и др. . Белки, управляющие кальцием, в поврежденном человеческом сердце. Basic Res Cardiol 92 (Приложение 1), 87–93 (1997).
Артикул
пабмед
КАС
Google ученый
Hasenfuss, G. и др. . Связь между функцией миокарда и экспрессией Са(2+)-АТФазы саркоплазматического ретикулума в нарушенном и нормальном миокарде человека. Circ Res 75 , 434–442 (1994).
Артикул
пабмед
КАС
Google ученый
Hasenfuss, G. и др. . Белки, вращающие кальций, и соотношение сила-частота при сердечной недостаточности. Basic Res Cardiol 91 (Приложение 2), 17–22 (1996).
Артикул
пабмед
КАС
Google ученый
дель Монте, Ф. и др. . Устранение желудочковых аритмий в модели ишемии и реперфузии путем воздействия на цикл кальция в миокарде. Proc Natl Acad Sci USA 101 , 5622–5627, https://doi.org/10.1073/pnas.0305778101 (2004).
ОБЪЯВЛЕНИЕ
Статья
пабмед
КАС
Google ученый
дель Монте, Ф. и др. . Улучшение выживаемости и сердечного метаболизма после переноса гена Са(2+)-АТФазы саркоплазматического ретикулума в крысиной модели сердечной недостаточности. Тираж 104 , 1424–1429 (2001).
Артикул
пабмед
ПабМед Центральный
Google ученый
Кавасэ Ю. и др. . Реверсия сердечной дисфункции после длительной экспрессии SERCA2a путем переноса генов в доклинической модели сердечной недостаточности. J Am Coll Cardiol 51 , 1112–1119, https://doi.org/10.1016/j.jacc.2007.12.014 (2008).
Артикул
пабмед
КАС
Google ученый
Schmitt, J. P. и др. . Дилатационная кардиомиопатия и сердечная недостаточность, вызванные мутацией фосфоламбана. Science 299 , 1410–1413, https://doi.org/10.1126/science.1081578 (2003).
Артикул
пабмед
КАС
Google ученый
Лю, Г. С. и др. . Новая мутация R25C-фосфоламбана человека связана с супер-ингибированием цикла кальция и желудочковой аритмии. Cardiovasc Res 107 , 164–174, https://doi.org/10.1093/cvr/cvv127 (2015).
Артикул
пабмед
ПабМед Центральный
КАС
Google ученый
Хагиги, К. и др. . Нулевой уровень фосфоламбана человека приводит к летальной дилатационной кардиомиопатии, что свидетельствует о критической разнице между мышами и человеком. J Clin Invest 111 , 869–876, https://doi.org/10.1172/JCI17892 (2003).
Артикул
пабмед
ПабМед Центральный
КАС
Google ученый
Nelson, S.E.D. и др. . Влияние мутаций Arg9Cys и Arg25Cys на конформационное равновесие фосфоламбана в бислоях мембран. Biochim Biophys Acta 1860 , 1335–1341, https://doi.org/10.1016/j.bbamem.2018.02.030 (2018).
Артикул
пабмед
КАС
Google ученый
Pimenta, P.H., Silva, C.L. & Noel, F. Ивермектин является неселективным ингибитором АТФазы Р-типа млекопитающих. Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol 381 , 147–152, https://doi.org/10.1007/s00210-009-0483-z (2010).
Артикул
пабмед
КАС
Google ученый
Джулиано, К.А. и Тейлор, Д.Л. Биосенсоры на флуоресцентных белках: новые инструменты для открытия лекарств. Trends Biotechnol 16 , 135–140, https://doi.org/10.1016/S0167-7799(97)01166-9 (1998).
Артикул
пабмед
КАС
Google ученый
Роде, Дж. А., Томас, Д. Д. и Муретта, Дж. М. Лекарство от сердечной недостаточности изменяет механоэнзимологию сердечного миозинового удара. Proc Natl Acad Sci USA 114 , E1796–E1804, https://doi.org/10.1073/pnas.1611698114 (2017).
Артикул
пабмед
КАС
Google ученый
Ло, С. Х. и др. . Инновационный высокопроизводительный подход к скринингу для обнаружения малых молекул, ингибирующих рецепторы TNF. SLAS Discov 22 , 950–961, https://doi.org/10.1177/2472555217706478 (2017).
ПабМед
ПабМед Центральный
КАС
Статья
Google ученый
Реббек Р.Т. и др. . Высокопроизводительные экраны для обнаружения низкомолекулярных модуляторов каналов высвобождения кальция из рианодиновых рецепторов. Открытие SLAS: продвижение исследований и разработок в области наук о жизни 22 , 176–186, https://doi.org/10.1177/1087057116674312 (2017).
КАС
Статья
Google ученый
Фогель С.С., Талер С. и Кушик С.В. Причудливый FRET. Sci STKE 2006, re2, https://doi.org/10.1126/stke.3312006re2 (2006 г.).
Фогель, С. С., Нгуен, Т. А., ван дер Меер, Б. В. и Бланк, П. С. Влияние гетерогенности и темных акцепторных состояний на FRET: последствия для использования доноров и акцепторов флуоресцентных белков. PLoS One 7 , e49593, https://doi.org/10.1371/journal.pone.0049593 (2012 г.).
ОБЪЯВЛЕНИЕ
Статья
пабмед
ПабМед Центральный
КАС
Google ученый
Свенссон, Б., Отри, Дж. М. и Томас, Д. Д. Молекулярное моделирование флуоресцентных биосенсоров SERCA. Methods Mol Biol 1377 , 503–522, https://doi.org/10.1007/978-1-4939-3179-8_42 (2016).
Артикул
пабмед
КАС
Google ученый
Dong, X. & Thomas, D.D. FRET с временным разрешением раскрывает структурный механизм регуляции SERCA-PLB. Biochem Biophys Res Commun 449 , 196–201, https://doi.org/10.1016/j.bbrc.2014.04.166 (2014 г.).
Артикул
пабмед
ПабМед Центральный
КАС
Google ученый
Палликкут, С. и др. . Фосфорилированный фосфоламбан стабилизирует компактную конформацию сердечной кальций-АТФазы. Biophys J 105 , 1812–1821, https://doi.org/10.1016/j.bpj.2013.08.045 (2013).
Артикул
пабмед
ПабМед Центральный
КАС
Google ученый
Джеймс З.М., Маккефри, Дж. Э., Торгерсен, К. Д., Карим, С. Б. и Томас, Д. Д. Белок-белковые взаимодействия в регуляции транспорта кальция, исследуемые с помощью парамагнитного резонанса с переносом насыщения электронов. Biophys J 103 , 1370–1378, https://doi.org/10.1016/j.bpj.2012.08.032 (2012).
Артикул
пабмед
ПабМед Центральный
КАС
Google ученый
Хоу З. и др. . Двухцветная кальциевая помпа показывает закрытие цитоплазматической головки со связыванием кальция. PLoS ONE , принято (2012 г.).
Грубер, С. Дж., Хейдон, С. и Томас, Д. Д. Мутанты фосфоламбана конкурируют с диким типом за связывание SERCA в живых клетках. Biochem Biophys Res Commun 420 , 236–240, S0006-291X(12)00384-1 https://doi.org/10.1016/j.bbrc.2012.02.125 (2012).
Робиа, С. Л. и др. . Восстановление переноса по Форстеру показывает, что фосфоламбан медленно обменивается с пентамерами, но быстро с регуляторного комплекса SERCA. Circ Res 101 , 1123–1129 (2007 г.).
Артикул
пабмед
ПабМед Центральный
КАС
Google ученый
Панькив С. и др. . p62/SQSTM1 связывается непосредственно с Atg8/LC3, чтобы способствовать деградации агрегатов убиквитинированного белка посредством аутофагии. J Biol Chem 282 , 24131–24145, https://doi.org/10.1074/jbc.M702824200 (2007).
Артикул
пабмед
КАС
Google ученый
Накамура Н. и др. . Эндосомы представляют собой специализированные платформы для распознавания бактерий и передачи сигналов NOD2. Nature 509 , 240–244, https://doi.org/10.1038/nature13133 (2014).
ОБЪЯВЛЕНИЕ
Статья
пабмед
КАС
Google ученый
Алексунес, Л. М., Августин, Л. М., Шеффер, Г. Л., Черрингтон, Нью-Джерси и Манауту, Дж. Э. Почечные переносчики ксенобиотиков по-разному экспрессируются у мышей после лечения цисплатином. Токсикология 250 , 82–88, https://doi.org/10.1016/j.tox.2008.06.009 (2008).
Артикул
пабмед
ПабМед Центральный
КАС
Google ученый
Муретта, Дж. М. и др. . Высокоэффективная флуоресценция с временным разрешением за счет прямой записи сигнала. Rev Sci Instrum 81 , 103101-103101 — 103101-103108 (2010).
Несмелов Ю.Е. и др. .Структурная кинетика миозина с помощью временного FRET с временным разрешением. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 108 , 1891–1896, https://doi.org/10.1073/pnas.1012320108 (2011).
ОБЪЯВЛЕНИЕ
Статья
пабмед
ПабМед Центральный
Google ученый
Муретта, Дж. М., Петерсен, К. Дж. и Томас, Д. Д. Прямое обнаружение актин-активируемого силового удара в реальном времени в каталитическом домене миозина. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 110 , 7211–7216, https://doi.org/10.1073/pnas.1222257110 (2013).
ОБЪЯВЛЕНИЕ
Статья
пабмед
ПабМед Центральный
Google ученый
Фруен, Б. Р., Барди, Дж. М., Байрем, Т. М., Страсбург, Г. М. и Луис, К. Ф. Дифференциальная Ca (2+) чувствительность рианодиновых рецепторов скелетных и сердечных мышц в присутствии кальмодулина.Американский журнал физиологии. Клеточная физиология 279 , C724–733 (2000).
Артикул
пабмед
КАС
Google ученый
Эффективность FRET ± стандартная ошибка среднего значения, определенного для каждого из…
Контекст 1
… этих конструкций экспрессировали в клетках HEK293FT, и эффективность FRET определяли с использованием каждого из методов. способы, описанные здесь, суммированы в таблице 1 и более подробно описаны ниже….
Контекст 2
… описанный во введении, в отличие от спектров излучения Em, в которых сенсибилизированное излучение и излучение непосредственно возбужденного акцептора перекрываются, в случае ExEm появляется новый третий пик, когда FRET принимает место, делающее наличие лада однозначным. Относительная интенсивность пиков излучения донора и сенсибилизированного излучения может быть использована для получения эффективности FRET, которая представлена в таблице 1. Эти данные также показывают превосходное согласие с указанными значениями, указывающими на возможность использования подхода разделения ExEm для количественного определения. — повышение эффективности FRET….
Контекст 3
… первый метод позволяет графически представить FRET, происходящий в клетке, и хорош для визуализации областей в клетке с различной эффективностью FRET, второй подход первого усреднения интенсивностей в ROI перед расчетом FRET дает немного более надежные количественные результаты, которые менее подвержены движению или шуму. Таким образом, мы приводим значения, полученные в этом втором подходе, в таблице 1. …
Контекст 4
… Значения эффективности FRET, полученные с использованием ExEm спектрального разделения данных микроскопа, усредненные по всем изображенным клеткам, приведены в таблице 1. Результаты полностью согласуются с ранее опубликованными значениями для этих образцов и результатами, полученными при разделении данных флуорометра. . …
Context 5
… Значения эффективности FRET, полученные с несмешиванием ExEm, в целом совпадают с результатами, полученными с использованием подхода Em, как показано в таблице 1. Примечательно, что подход ExEm дает более надежные результаты для тусклых пикселей и ближе к заявленным значениям для конструкции VCV….
Управление онлайн-исследованиями Niner (NORM) | Колледж здравоохранения и социальных служб
Каждый главный исследователь (PI) в Университете Северной Каролины Шарлотта должен заполнить NORM , чтобы получить одобрение учреждения, прежде чем предложение или контракт могут быть представлены в агентство, включая, помимо прочего, дополнительные контракты, контракты. , а также любые другие финансируемые исследования, проводимые ИП. Университет не может учредить вашу награду, если в предварительном отделе нет вашего предложения.NORM — это онлайн-система, которая каталогизирует все документы, связанные с грантом, такие как бюджеты, информация о разделении затрат, запросы на выкуп, использование исследовательского пространства и атрибуты вашего исследования. Он также включает информацию о соответствии, в том числе необходимые сертификаты, такие как конфликт интересов и подтверждение PI политики Университета в отношении интеллектуальной собственности, а также другие правила соответствия.
Обратитесь в отдел предварительного присуждения CHHS за помощью в заполнении NORM.
Для исследований, требующих использования позвоночных животных:
Исследователи должны подать протокол через Институциональный комитет по уходу и использованию животных Шарлотты Университета Северной Каролины (IACUC). Многие спонсоры, в том числе Национальные институты здравоохранения (NIH), разрешают PI предоставлять доказательства утвержденного протокола на основе «точно в срок» после того, как они оценили вероятный успех финансирования заявки на грант.
Добавить комментарий Отменить ответ
Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *
Комментарий *
Имя *
Email *
Сайт
Сохранить моё имя, email и адрес сайта в этом браузере для последующих моих комментариев.

Найти:
Лучшие
Последние
Рубрики
ВАЗ 2101
ВАЗ 2104
ВАЗ 2105
ВАЗ 2106
ВАЗ 2107
ВАЗ 2108
ВАЗ 2109
ВАЗ 2110
ВАЗ 2111
ВАЗ 2112
Всё о ремонте
Разное
2019 © Все права защищены. Карта сайта}